纳米元素硒的生物合成及生物活性

利用生物载体富集和转化硒是获取活性硒形式的合理途径。一定条件下 ,生物体对硒的代谢可产生红色纳米级胶体元素硒 ,传统认为 ,生物体内元素硒的合成是生物体解除硒毒性的有效机制。最近的一些研究发现 ,人工合成以蛋白质为分散剂的红色纳米元素硒具有抑制肿瘤细胞生长、抗氧化、免疫调节及延缓衰老等生物活性。提示生物来源的纳米元素硒可能具有潜在应用价值。对纳米元素硒及其生物活性的研究进展进行了综述。

纳米元素硒对猪伪狂犬病毒体外增殖抑制作用的初步研究

以IBRS2细胞为模型，研究不同浓度的纳米元素硒对猪伪狂犬病毒体外复制的抑制作用。结果表明，在1-20μmol L^-1范围内，纳米元素硒对细胞生长没有影响，但对猪狂犬病毒的体外复制呈现显著的抑制作用（P〈0．05），且随着浓度的增加其抑制作用增强。

螺旋藻转化纳米元素硒的制备及其体外清除自由基活性的初步研究

研究利用高密度富硒螺旋藻(Se-SP)细胞通过生物转化制备纳米元素硒(Nano-Se)的可行性,观察Nano-Se在体外对氧自由基的清除作用。用梯度离心分选Nano-Se,原子力显微镜(AFM)、透射电镜(TEM)及X-射线能谱(EDX)联用表征纳米粒中的元素硒形态,电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定Nano-Se中的硒含量,化学发光方法检测Nano-Se在体外对超氧自由基和羟自由基的清除作用。结果发现,Nano-Se主要由元素硒构成,形态呈球形,73%的纳米粒子直径大小分布在(61±17)nm范围。Nano-Se在体外对两种氧自由基的最大清除率分别为:30.1%和27.6%,相应的EC50分别为:0.8μg/ml和2.2μg/ml。相同剂量时,Nano-Se对氧自由基的清除作用比硒代蛋氨酸(Se-Met)及Se-SP中其它含硒活性成分更强。结果提示,利用高密度Se-SP可诱导Nano-Se的大量生成,Se-SP转化的Nano-Se可能是一种新的抗氧化硒形态,其作用机制和体内生物活性有待深入研究。

纳米红色元素硒的护肝、抑瘤和免疫调节作用

目的 : 研究纳米红色元素硒的护肝、抑瘤和免疫调节作用。方法 : 采用 CCl4 致小鼠急性肝损伤、S180 移植瘤和免疫模型 ,评价纳米红色元素硒的保护、抑制和调节作用。结果 : 纳米红色元素硒提高血和肝硒、抑制 CCl4 所致的肝丙二醛 (MDA)和血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)升高 ,降低 S180 荷瘤鼠瘤重和提高 S180 荷瘤鼠的吞噬率和天然杀伤细胞 (NK)活性 ,提高正常小鼠的免疫活性 ,均有显著性差别 (P<0 .0 5)。口服 LD50 为 Se 1 1 2 .98mg/ kg bw。结论 : 纳米红色元素硒有护肝、抑瘤和免疫调节作用 。

蛋白质分散的纳米红色元素硒的延缓衰老作用

目的 考察以蛋白质为核、红色元素硒为膜和以蛋白质为分散剂的纳米红色元素硒是否具有延缓衰老作用。方法 采用 D-半乳糖小鼠衰老和黑腹果蝇生存模型 ,评价纳米红色元素硒的抗氧化和延长生存时间作用。结果 纳米红色元素硒能显著降低小鼠全血丙二醛含量和提高小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性 ,显著延长黑腹果蝇生存时间。

纳米红色元素硒的急性毒性和生物利用性

纳米红色元素硒是以蛋白质为分散剂的元素硒的纳米粒子,粒径在60nm 以内。体外研究证实,纳米红色元素硒能够与谷胱甘肽反应,其反应能力约为亚硒酸钠的1/20至1/10。急性毒性实验证实以口服硒元素的量计,纳米红色元素硒的LD50 = 112.98(89.95～141.90)m g/kgBW,亚硒酸钠的LD50= 15.72(13.38～18.47)m g/kgBW,显示出纳米红色元素硒的毒性低。生物利用性试验证实:小鼠分别口服纳米红色元素硒和亚硒酸钠(Se 50μg/kg BW)30天,与对照组比,2种硒都能显著提高小鼠血硒和肝硒浓度,血中谷胱甘肽过氧化物酶活性升高。

纳米红色元素硒对小鼠的免疫功能的调节作用

纳米红色元素硒是以蛋白质为分散剂的一种纳米粒子 ,粒径在 2 0～ 60nm之间。采用动物实验研究纳米红色元素硒对免疫功能的调节作用。结果表明 :与对照组比 ,纳米红色元素硒与亚硒酸钠各剂量组的小鼠脏器重量及其指数无明显变化 ;纳米红色元素硒中 ,高剂量组小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能和巨噬细胞吞噬功能明显升高 ,而亚硒酸钠各剂量组的上述免疫批标无明显变化。结果提示 ;纳米红色元素硒对小鼠免疫功能有明显的调节作用。

纳米红色元素硒与葡萄糖醛酸内酯联用对大鼠肝纤维化形成过程的干预及其定量分析

目的 将纳米红色元素硒 (nanoredelementalseleni um ,Nse)与葡萄糖醛酸内酯 μglucurolactone ,Glu)联用 ,观察对大鼠肝纤维化形成过程的干预作用 ,试图通过药物间的相互作用 ,增效减毒 ,从而降低硒用量。方法 根据权重配方法设计 ,设立两药不同组合的 6个用药组和 2个对照组。用CCl4 造成大鼠急性肝损伤后开始用药 ,于用药 3wk和 6wk ,观察与急慢性肝损伤的相关指标 ,包括ALT ,MDA和PCIII。结果 急性肝损伤阶段的短期用药 (3wk) ,宜用大剂量Nse ,权重配方法的理论计算提示 ,Nse 2 0 0 μg·kg-1单用即可 ;两药联合长期使用 (6wk) ,在小剂量就可获效 ,尤以Nse 10 0 μg·kg-1+Glu 5 0mg·kg-1为好 ,对大鼠实验性肝纤维化已呈现明显的防治作用 ,联用Nse和Glu作用强于单用Nse。理论计算认为 ,Nse和Glu间产生协同作用 ,优化的组合剂量为Nse 10 0 μg·kg-1+Glu 6 0mg·kg-1(ig)。 结论 Nse和Glu联合用药 ,对大鼠CCl4 所致的肝纤维化有防治作用 ,可降低Nse用量。

纳米红色元素硒对四氯化碳致大鼠肝损伤的影响

目的探讨纳米红色元素硒在CCl4诱发大鼠实验性肝损伤中的干预作用。方法将清洁级Wistar大鼠按体重随机分为阴性对照组、阳性对照组、纳米红色元素硒对照组、纳米红色元素硒高、中、低剂量组,分别灌胃给予生理盐水、生理盐水、纳米红色元素硒(0.2、0.2、0.1、0.05mg/kg)。8d后,阴性对照组和纳米红色元素硒对照组一次性腹腔注射植物油(3ml/kg),阳性对照组和纳米红色元素硒高、中、低剂量组均一次性腹腔注射5.18mol/L四氯化碳(3ml/kg)。24h后,处死大鼠,称量体重、肝脏重量,计算肝脏系数。测定大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,采用HE染色法检测肝组织病理情况,采用免疫组织化学法检测大鼠肝组织中bax、p53基因蛋白表达。结果阴性对照组和纳米红色元素硒对照组肝组织正常;阳性对照组、纳米红色元素硒高、中、低剂量组肝脏体积增大,颜色灰暗,并有腹水,肝组织小叶内出现气球样变和脂肪变,并有大量中性粒细胞浸润。纳米红色元素硒对照组与阴性对照组肝脏系数、AST、ALT活力、bax、p53基因蛋白表达的积分光密度(IOD)值和阳性面积间,差异均无统计学意义(P>0.05)。阳性对照组、纳米红色元素硒高、中、低剂量组肝脏系数、AST、ALT活力、bax、p53基因蛋白表达的IOD值和阳性面积高于阴性对照组、纳米红色元素硒对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);且纳米红色元素硒对照组<低剂量组<中剂量组<高剂量组。结论在本次实验剂量下,纳米红色元素硒对大鼠肝脏无损伤作用,对CCl4诱导的急性实验性肝损伤无明显保护作用。

纳米红色元素硒在Beagle犬的药代动力学分析

目的 :观察纳米红色元素硒 (Nse)在Beagle犬的药代动力学特点。方法 :催化荧光法测定用药前基线值和用药后不同时间血硒浓度 ,分别用血硒实测值和上升值计算药动学参数。结果 :Nse代谢符合一室模型 ,吸收较快 ,药峰值为 15 5mg·L-1(实测值 )和 135 .4mg·L-1(上升值 ) ,达峰时间约为 2h ,但消除较慢 ,清除率极低 ,t1 2 长达 34.6h(实测值 )和 2 0h(上升值 )。结论 :长时间、大剂量服用Nse可能导致药物蓄积 ;体内具有基线值时 ,计算药动学参数宜用变化值 。