维生素C/白藜芦醇纳米复合脂质体制备及其抗氧化性研究

本文以具有亲疏水特点的磷脂分子为基质材料,采用薄膜水化法制备了一种同时包载脂溶性白藜芦醇(Res)和水溶性维生素C(VC)的纳米复合脂质体(Lip@Res/VC),并将其用于细胞抗氧化研究。在Lip@Res/VC的制备过程中,以Res和VC的包封率以及脂质体的粒径、多分散指数和电位为指标,考察了Res和VC的最佳投入量。研究结果表明,分别选择Res为4.0 mg和VC为3.5 mg的投入量,制备的Lip@Res/VC的水合粒径为(92.29±5.41)nm,Res和VC的包封率分别为(85.13±5.37)%和(64.73±5.51)%。体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸二胺盐(ABTS)自由基清除试验结果显示,Lip@Res/VC的抗氧化活性较只包载了Res的单一脂质体Lip@Res或只包载了VC的单一脂质体Lip@VC均显著提高。通过选择正常肝细胞(L02细胞)为模式细胞,研究了Lip@Res/VC的细胞内抗氧化效果,结果显示,Lip@Res/VC具有清除细胞内活性氧(ROS)的能力,对过氧化氢诱导的L02细胞氧化损伤具有保护作用。

体外实验观察微泡-阳离子纳米脂质体复合物促进HGF基因转染

目的通过生物素-亲和素的特异结合,制备一种高效载肝细胞生长因子(HGF)基因的脂质微泡(LMB)-阳离子纳米脂质体复合物(LMB-CNLP),观察转染情况,探讨其对对数生长期的肝星状细胞株HSC-T6活性的影响。方法将HSC-T6细胞分为载HGF基因的LMB组、LMB-CNLP组和对照组(单纯质粒),超声辐照各组进行HGF转染。以荧光显微镜及流式细胞仪观测转染情况,ELISA试剂盒检测HGF蛋白表达情况,流式细胞仪检测HSC-T6细胞凋亡。结果 LMB-CNLP组HGF基因的转染率为41.29%,明显高于其他2组。转染后的细胞能持续表达HGF,且随着HGF蛋白增多,HSC-T6细胞凋亡率增高。结论超声辐照LMB-CNLP复合物能提高HGF基因在体外培养的HSC-T6细胞中的转染情况,促进HSC-T6凋亡,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。

两性霉素B复合磷脂纳米脂质体Beagle犬体内药动学研究

目的采用LC-MS/MS测定Beagle犬血浆中两性霉素B的含量,研究受试物两性霉素B复合磷脂纳米脂质体(liposomal amphotericin B,L-AmB)和参比药物AmBisome在Beagle犬体内的药动学行为。方法选取成年健康Beagle犬12只,♀♂各半。采用双交叉试验设计,周期间洗脱期为2周。经前肢静脉注射给药(6 mg·kg^(−1),1.0 mg·mL^(−1)),采集给药前以及给药后各时间点血浆样品,应用经验证的LC-MS/MS方法测定血浆中两性霉素B浓度,DAS 2.1.1中求算药动学参数。结果Beagle犬静脉注射给予6 mg·kg^(−1)的受试物和参比药物后,动物体内两性霉素B的AUC_((0-t))分别为(705520±178252),(677310±166326)μg·h·L^(−1);C_(max)分别为(142683±29823),(121992±37983)ng·mL^(−1);t_(1/2)分别为(8.9±1.5),(9.7±0.6)h。结论L-AmB及参比制剂AmBisome在Beagle犬体内的药动学参数差异无统计学意义。