崔福斋教授带领团队研发“纳米晶磷酸钙胶原基骨修复材料”获国家技术发明二等奖

历经十多年的探索与追寻，由清华材料系崔福斋教授带领的研究团队终于在人骨组织工程和修复材料领域取得了突破性的成果，不仅破译了人骨的组装“密码”，而且其研究成果在临床应用中取得了良好的治疗效果，让人类“断骨再生”梦想成真!

兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外构建组织工程骨的实验研究

目的:研究兔骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)与纳米晶胶原基骨修复材料(nano-hydroxyapatite/collagen,NHAC)体外复合培养的结合程度,以及构建组织工程骨的可行性。方法:分离兔MSCs体外培养、纯化,取第3代MSCs与NHAC体外复合培养,第5,10 d后扫描电镜(SEM)观察二者复合程度。结果:兔MSCs贴壁生长,增殖速度快,生长曲线符合Logistic生长曲线;兔MSCs与NHAC体外复合培养,在第5,10 d进行扫描电镜观察,发现10 d时粘附于NHAC上的MSCs细胞数(38.52±7.21)明显高于5 d时粘附的细胞数(21.28±4.70),P<0.01。结论:兔MSCs与NHAC体外复合培养结合程度较高,可以用来构建组织工程骨,为进一步的动物实验奠定基础。

纳米晶胶原基骨修复材料与兔骨髓间充质干细胞体外复合培养(英文)

背景:纳米晶羟基磷灰石胶原基骨修复材料具有与天然骨成分接近,结构和形貌图谱分析与天然骨相似,生物相容性好等特点,且材料多孔,孔径较大、孔隙率及孔隙交通率高,符合作为骨组织工程支架材料的要求。目的:观察兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外复合培养的结合程度。设计、时间及地点:体外观察实验,于2006-03/09在江苏大学医学院细胞实验室完成。材料:健康雄性新西兰大白兔1只,1月龄。纳米晶胶原基骨修复材料由清华大学材料系提供。方法:体外分离培养、纯化兔骨髓间充质干细胞,取第3代骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨体外复合培养。主要观察指标:①兔骨髓间充质干细胞生长形态及生长曲线。②复合培养5,10d后扫描电镜观察二者复合程度。③复合培养5,10d时纳米晶胶原基骨修复材料上结合的细胞数量。结果:兔骨髓间充质干细胞贴壁生长,增殖速度快,生长曲线符合Logistic生长曲线,兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨体外复合培养,在第5,10天进行扫描电镜观察,发现10d时黏附于纳米晶胶原基骨上的骨髓间充质干细胞数明显高于5d时黏附的细胞数,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨体外复合培养结合程度较高。

纳米晶胶原基骨材料在股骨头缺血性坏死Ficat Ⅲ期的初步临床应用

目的：探讨纳米晶胶原基骨材料治疗FicatⅢ期股骨头缺血性坏死（avascular necrosis of the femoral head，ANFH）的临床疗效。方法：3例患者，4个Ⅲ期股骨头坏死，通过股骨大转子下方穿刺钻孔，行坏死区病灶清除和纳米人工骨植入术，术后每3月复查X线平片，随访6～11月，2例术后11月CT复查。结果：2例3髋疗效好，11月后骨质修复良好，关节面无进一步塌陷；1例疗效差，因患肢术后早期负重，加重关节面塌陷。结论：纳米晶胶原基骨材料是一种优良的骨修复材料，治疗股骨头坏死效果好，植骨术后要避免过早负重。

重组人骨形态发生蛋白-2结合纳米晶胶原基骨材料植骨融合在腰椎不稳症中的临床应用

目的观察重组人骨形态发生蛋白-2﹙rhBMP-2﹚结合纳米晶胶原基骨材料﹙nHAC﹚行腰椎间融合治疗腰椎不稳症的疗效。方法 2008年1月~2010年12月23例﹙27个节段﹚腰椎不稳患者,所有患者均行腰椎椎弓根螺钉固定系统,辅助以rhBMP-2结合nHAC椎间植入融合椎体。结果全部病例获随访,手术后平均随访13.5月,按照JOA评价标准,优14例,良6例,可3例。优良率86.9%。结论 rhBMP-2结合nHAC行腰椎间融合治疗腰椎不稳症是一种比较理想的治疗方法。

腰椎后外侧纳米晶胶原基骨材料植骨融合:疼痛评分及植骨融合效果的评价

背景:纳米晶胶原基骨材料具有与天然骨十分接近的多孔结构,植入人体后,可随着时间的推移逐渐发生降解和吸收,发挥强大的引导和桥梁作用。目的:观察腰椎后外侧植骨融合中应用纳米晶胶原基骨材料的临床效果。方法:纳入58例腰椎疾病患者,其中男28例,女30例,年龄47-81岁,经后正中入路实施腰椎椎板切除减压,或者同时实施髓核摘除、腰椎后外侧横突间植骨融合,植骨材料为纳米晶胶原基骨修复材料,利用椎弓根螺钉系统进行内固定。治疗后随访18个月,观察疼痛缓解及植骨融合情况。结果与结论:58例患者均顺利完成治疗过程,切口均Ⅰ期愈合,临床症状和体征较治疗前明显改善,经随访未出现感染、螺钉移位与松动、固定节段相临椎体滑脱与移位等并发症,未发生与植骨材料相关的不良反应。纳米晶胶原基骨材料植入后1,6,12,18个月的下肢和下腰目测类比评分均低于植入前(P<0.05)。随访12个月植骨融合率为84%,18个月时植骨融合率为90%。表明腰椎后外侧植骨融合过程中应用纳米晶胶原基骨材料可缓解下肢痛及下腰痛症状,利于植骨融合。

纳米晶胶原基骨材料在腰椎后外侧植骨融合中的应用:安全性及效果

背景:腰椎后外侧植骨融合中需要进行植骨,但骨量常不够,需再取患者部分自体髂骨补充。目的:探讨纳米晶胶原基骨材料在腰椎后外侧植骨融合中的应用安全性及效果。方法:回顾性分析四川省眉山骨科医院2013年2月至2014年2月收治的52例腰椎退行性疾病患者的临床资料,均实施腰椎后外侧植骨融合治疗,术中所使用的植骨材料为患者自体骨颗粒混合纳米晶胶原基骨材料。结果与结论:52例患者中,内固定后伤口一期愈合的有51例,患者局部皮肤均未出现皮温上升以及红肿、疼痛、流液等现象。患者内固定后功能和疼痛症状均得到不同程度的改善,对患者的内固定后植骨融合情况进行分析,可得内固定后3个月完全融合率达13%,内固定后6个月达54%,内固定后12个月达84%,且未出现假关节,随访12个月,所有患者均未出现螺钉松动或者移位等现象,对固定节段相临椎体情况进行检查,均未出现滑脱或者移位等情况。表明在腰椎后外侧植骨融合中应用纳米晶胶原基骨材料可以获得良好的效果,材料具有生物相容性及一定的安全性。

重组人骨形态发生蛋白-2结合纳米晶胶原基骨材料植骨融合在腰椎不稳症中的临床应用

目的观察重组人骨形态发生蛋白-2﹙rhBMP-2﹚结合纳米晶胶原基骨材料﹙nHAC﹚行腰椎间融合治疗腰椎不稳症的疗效。方法 2008年1月－2010年12月23例﹙27个节段﹚腰椎不稳患者,所有患者均行腰椎椎弓根螺钉固定系统,辅助以rhBMP-2结合nHAC椎间植入融合椎体。结果全部病例获随访,手术后平均随访13.5月,按照JOA评价标准,优14例,良6例,可3例。优良率86.9%。结论 rhBMP-2结合nHAC行腰椎间融合治疗腰椎不稳症是一种比较理想的治疗方法。

纳米晶胶原基骨和骨髓间充质干细胞复合修复兔股骨头坏死缺损的研究

目的探讨采用纳米晶胶原基骨(nano-hydroxyapatite collagen,nHAC)和骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)复合材料修复兔股骨头坏死骨缺损的可行性. 方法 2004年6月～10月,取45只成年新西兰大白兔制成双侧股骨头内骨缺损模型,随机分为3组进行修复,A组:骨缺损不填充任何材料;B组:骨缺损填充单纯nHAC;C组:骨缺损填充nHAC与MSCs的复合材料.术后3组分别于4、8和12周对股骨头行影像学和组织学观察. 结果影像学和组织学显示C组复合材料有良好的诱导成骨能力,术后4周即有明显的成骨反应和新骨形成,12周基本修复股骨头的骨缺损区;B组材料修复能力较C组差,但B组和C组均优于A组.B组和C组对nHAC无明显异物反应. 结论 nHAC有较强的传导成骨作用,是修复兔股骨头骨缺损的良好移植材料;复合MSCs后能促进骨缺损的修复,对股骨头坏死的治疗有较大价值.

“瑞福”纳米晶胶原基骨修复材料

北京益而康生物工程开发中心是中国煤炭地质总局下属的中煤地质工程总公司于1997年7月投资创立的，是集科研、生产、销售为一体的现代化管理的高新技术企业。益而康主要从事生物医用材料和医疗器械系列产品的开发、生产和经营，产品性能优越、质量可靠，得到了社会各界同仁的认同和赞许。

重组人骨形态发生蛋白-2结合纳米晶胶原基骨材料植骨融合术治疗腰椎不稳症的护理

我科自2008年1月-2011年12月对28例腰椎不稳患者采用rhBMP．2结合nHAC骨材料植骨融合术，取得满意临床疗效，现将围手术护理报告如下。1资料与方法1．1一般资料28例患者其中男16例，女12例，年龄32～65岁，平均49.3±3岁，其中单节段23例，双节段4例，三节段1例。所有患者均有腰部疼痛，活动受限，间歇性跛行，伴有一侧或双侧下肢麻木，疼痛或伴有会阴部麻木，排尿不畅等脊髓及神经根受压症状；腰背有压痛或放射痛，直腿抬高试验阳性，加强试验阴性，

纳米晶胶原基骨加自体骨移植治疗早期股骨头坏死的临床疗效分析

目的回顾性分析经股骨头颈交界处开窗、灯泡状病灶清除、打压植骨术结合纳米晶胶原基骨和自体骨移植治疗早期股骨头坏死(osteonecrosis of femoralhead,ONFH)的临床疗效。方法2001年1月-2005年7月,收治26例35髋ONFH患者。男16例,女10例;年龄19～54岁,平均33.5岁。病程12～36个月,平均18个月。ONFH病因:激素性15例22髋,酒精性10例12髋,特发性1例1髋。ARCO分期:ⅡB期6髋,ⅡC期16髋,ⅢA期9髋,ⅢB期3髋,ⅢC期1髋。Harris评分为(62.2±7.5)分。术中采用经股骨头颈交界处开窗、灯泡状病灶清除,按1∶1比例行纳米晶胶原基骨和自体骨移植治疗。结果患者术后切口均Ⅰ期愈合。术中2例髂骨取骨伤及股外侧皮神经,术后3～6个月神经支配区麻木症状自行缓解消失;2例术后3个月出现异位骨化并发症,未行特殊处理。患者均获随访,随访时间2～7年,平均3.5年。术后3个月患者植骨愈合。术后Harris评分为(85.1±16.2)分,与术前比较差异有统计学意义(P<0.001)。其中优15髋,良11髋,可5髋,差4髋。获差的4例患者均于随访期末行全髋关节置换术。影像学检查示5髋由术前ⅡC期进展至ⅢA期;余髋关节影像学表现稳定,ONFH分期无进展。结论经股骨头颈交界处开窗、灯泡状病灶清除、打压植骨术,结合纳米晶胶原基骨和自体骨移植治疗早期ONFH临床效果满意,纳米晶胶原基骨有利于骨坏死的修复和重建,适于Ⅱ期ONFH的患者保存股骨头手术。

纳米晶胶原基骨/血管内皮生长因子缓释支架对人骨髓间充质干细胞体外粘附增殖的影响

研制纳米晶胶原基骨(nHAC)/血管内皮生长因子(VEGF)缓释支架,了解VEGF体外缓释效果及对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)成骨诱导后粘附、增殖的影响,为骨组织工程寻求一种新型复合支架材料.利用生物学方法将VEGF负载于nHAC,制备具有VEGF缓释效果的复合支架;hMSCs经体外培养、扩增、成骨诱导后种植于VEGF缓释支架上行体外增殖。分为四组:实验组A:nHAC、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、肝素(heparin,HP)和VEGF(nHAC-FN-HP-VEGF);对照组B:nHAC、FN和VEGF(nHAC-FN-VEGF);对照组C,nHAC、HP和VEGF(nHAC-HP-VEGF);对照组D:nHAC和VEGF(nHAC-VEGF)。通过检测支架材料上VEGF的释放量和持续时间,及种植细胞后细胞的黏附率、不同时间点(3、7、10、14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶活性以及扫描电镜观察细胞在材料上的生长状况,比较分析不同复合支架材料对细胞粘附、增殖的影响。人第三代MSCs经诱导培养14 d后,碱性磷酸酶细胞化学染色、I型胶原免疫荧光染色均为阳性;实验组A的VEGF缓释量最高,持续时间最长(可达14 d),细胞黏附率最高,为61.8%;各组支架中的细胞数量均随培养时间延长而增长,实验组A的细胞数增加较快,与相同时间点其他各组材料中细胞数差异有显著性(P<0.05);各时间点细胞碱性磷酸酶活性表达实验组最高,差异亦有显著性(P<0.05)。电镜扫描发现4组材料上均有细胞生长,实验组A的细胞增殖、分化状况明显好于其他组。hMSCs经诱导培养后可具有成骨细胞特性,hHAC-FN-HP-VEGF缓释支架具有较好的VEGF缓释效果,能显著提高细胞的粘附和增殖,可作为较理想的新型复合支架应用于骨组织工程。

骨髓间充质干细胞与不同基质修饰的纳米晶胶原基骨体外生物相容性研究

研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导培养后与不同基质修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)的生物相容性,为骨组织工程提供一种新型复合支架材料。SD大鼠MSCs经成骨诱导培养、扩增,进行成骨细胞表征后,种植与支架材料体外复合培养。实验分为4组:实验组A,纤维蛋白(FB)和纤维连接蛋白(FN)修饰的纳米晶胶原基骨((FB+FN)-nHAC);实验组B,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);实验组C,纤维连接蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FN-nHAC);对照组D,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3、7、10、14d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶活性以及扫描电镜观察细胞在材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。大鼠MSCs经诱导培养14d后,碱性磷酸酶细胞化学染色、I型胶原免疫荧光染色及矿化沉积茜素红染色均为阳性;细胞与支架材料黏附率A组最高为74.4%;支架材料中细胞数量均随培养时间延长而增长,且A组细胞数增加较快,与相同时相点其他各组材料中细胞数差异有显著性(P<0.05);各时相点细胞碱性磷酸酶活性表达A组最高,差异亦有显著性(P<0.05)。电镜观察发现4组材料上均有细胞生长,但A组的细胞生长状况明显好于其他组。大鼠MSCs经成骨诱导培养,可表达成骨细胞表型,(FB+FN)-nHAC在体外实验中表现出与细胞优良的生物相容性,可作为较理想的新型复合支架应用于骨组织工程。

血管内皮生长因子/纳米晶胶原基骨缓释系统与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性

背景:利用载体或缓释系统负载生长因子,既能保护生长因子的生物活性,又可以使生长因子缓慢释放,从而持续促进细胞生长及组织修复再生,是目前控制释放载体材料应用研究的方向之一。目的:观察血管内皮生长因子/纳米晶胶原基骨缓释系统的体外缓释效果及与种子细胞的生物相容性。方法:人骨髓间充质干细胞经体外诱导培养、扩增后种植于血管内皮生长因子+肝素/纤维连接蛋白+纳米晶胶原基骨支架(实验组)和单纯的纳米晶胶原基骨支架(对照组)行体外培养。测定缓释支架材料上血管内皮生长因子的释放量和持续时间;种植细胞后细胞的黏附率;培养3,7,10,14d时支架材料中细胞数、碱性磷酸酶活性以及细胞在材料上的生长状况。结果与结论:①该缓释支架具有一定的血管内皮生长因子缓释效果,持续时间可达14d。②第3代人骨髓间充质干细胞经成骨诱导培养,可表达成骨细胞表型:碱性磷酸酶细胞化学染色、I型胶原免疫荧光染色均为阳性。③体外实验显示该缓释支架与人骨髓间充质干细胞具有优良的生物相容性:相同时间点实验组的细胞黏附率、支架上细胞数量及细胞碱性磷酸酶活性均明显高于对照组;扫描电镜发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。

音猬因子修饰纳米晶胶原基骨复合骨髓间充质干细胞修复股骨缺损

背景:音猬因子作为一种Hedgehog信号蛋白,具有促使骨组织发育、生长及重构等生理功能。目的:观察音猬因子修饰的纳米晶胶原基骨复合骨髓间质干细胞修复大鼠股骨缺损的效果。方法:将48只SD大鼠随机分为4组,均建立股骨缺损模型,造模成功后14 d,实验组于骨缺损处植入音猬因子修饰的纳米晶胶原基骨-骨髓间充质干细胞复合物,支架组于骨缺损处植入纳米晶胶原基骨,细胞支架组植入纳米晶胶原基骨-骨髓间充质干细胞复合物,空白对照组不植入任何材料。修复后3,6,9,12周,进行骨缺损区X射线检查、骨密度及骨组织病理切片观察。结果与结论:(1)X射线检查:实验组修复后不同时间点的Lane-Sandhu X射线评分、骨密度值均高于其余3组(P<0.05);(2)苏木精-伊红染色:修复后12周,支架组有少量骨组织形成,无骨髓形成;细胞支架组有少量骨组织形成,无骨髓形成,可见残留支架;实验组植入物完全吸收,成熟骨组织和髓腔形成,腔内有骨髓形成;(3)扫描电镜观察:修复后12周,支架组有不规则排列的骨纤维和大量骨陷下窝;细胞支架组可见大量成骨细胞,但骨纤维仍然不规则;实验组有大量排列规则的骨小梁,可见哈佛系统;(4)结果表明:音猬因子修饰的纳米晶胶原基骨复合骨髓间质干细胞可促进骨缺损的修复。

骨髓间充质干细胞在纳米晶胶原基骨内生长以及成骨潜能

背景:纳米晶胶原基骨修复材料是根据仿生原理制备的纳米骨框架材料,其微结构和成分两方面都与天然骨有相似性,具有良好的生物相容性。目的:研究兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外复合培养的结合程度,以及构建组织工程骨的可行性。方法:分离兔骨髓间充质干细胞,体外培养、纯化,取第3代骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外复合培养,第3,7,20天后激光共聚焦和扫描电镜观察二者复合程度。结果与结论:骨髓间充质干细胞和纳米晶胶原基骨修复材料复合良好,共聚焦显微镜和环境扫描电镜观察均可见细胞生长;纳米晶胶原基骨修复材料能够作为良好的支架,它能使骨髓间充质干细胞在其内稳定生长。提示骨髓间充质干细胞在纳米晶胶原基骨修复材料内能很好的生长,并且具有成骨潜能。

骨髓间充质干细胞复合音猬因子/纳米晶胶原基骨修复骨缺损

目的:探讨骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells)复合音猬因子(sonic hedgehog,Shh)修饰的纳米晶胶原基骨(nano Hydroxyapatite/collagen,nHAC)修复大鼠股骨缺损的效果。方法:SD大鼠MSCs经成骨诱导后,种植于支架材料形成细胞支架复合物。SD大鼠30只制成股骨干5 mm节段性缺损,分为空白对照组:骨缺损处不植植入物,MSCs/nHAC组:植入MSCs/nHAC复合物,MSCs/Shh-nHAC组:植入MSCs/Shh-nHAC复合物。通过大体观察、X线放射学、组织学对比各组骨缺损修复情况。结果:SD大鼠MSCs在体外与nHAC,Shh-nHAC复合培养第7天,电镜扫描证实Shh-nHAC更有利于MSCs黏附、增殖。术后第6、12周放射学检查评价新骨生成各组间差异有统计学意义(P<0.05)。术后组织学检查各组新骨生成速度、生成量差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MSCs/Shh-nHAC复合物能够修复SD大鼠股骨缺损,修复效果明显优于MSCs/nHAC复合物。

骨形态发生蛋白-聚乙烯砒洛啉酮-纳米晶胶原基骨缓释系统与骨髓间充质干细胞的生物相容性

背景:骨形态发生蛋白在骨组织工程中很易降解,聚乙烯吡咯啉酮理论上存在与骨形态发生蛋白结合并对其缓释的作用。目的:观察聚乙稀吡咯啉酮修饰的纳米晶胶原基骨复合骨形态发生蛋白的体外缓释效果,并与成骨细胞复合培养,以期得到一种生物相容性较为理想的缓释支架系统。方法:实验分为3组,即聚乙烯吡咯啉酮修饰的骨形态发生蛋白复合纳米晶胶原基骨组、骨形态发生蛋白复合纳米晶胶原基骨组及聚乙烯吡咯啉酮修饰的骨形态发生蛋白复合大鼠松质骨组。以ELISA法检测3种复合物的骨形态发生蛋白体外释放活性。将SD大鼠骨髓间充质干细胞分离后定向诱导为成骨细胞并种于支架上,3,7,10,14d时检测支架中的细胞计数;细胞培养14d后采用扫描电镜观察细胞生长情况。结果与结论:骨形态发生蛋白体外释放曲线可见14d后实验组上清液中骨形态发生蛋白仍保持较高的浓度。培养14d后,大鼠骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原免疫荧光染色阳性,支架中脱落细胞计数均高于对照组(P<0.05)。扫描电镜结果发现实验组支架上的细胞生长情况明显好于对照组。提示聚乙烯吡咯烷酮修饰的纳米晶胶原基骨支架具有良好的缓释骨形态发生蛋白的作用,与大鼠骨髓间充质干细胞有很好的生物相容性。

应用纳米晶胶原基骨体外构建组织工程骨

目的:应用组织工程技术,建立体外诱导人骨髓间充质干细胞,与纳米晶羟基磷灰石/胶原骨共培养的人工骨模型,探求细胞与纳米晶胶原基骨结合的最佳模式。方法:实验于2005-09/2006-09在江苏大学医学技术学院中心实验室完成。①实验材料:纳米晶胶原基骨材料由清华大学材料系崔福斋等人研制。骨髓取自骨科取髂骨患者(男性,30岁,患者知情同意)。②实验干预:全骨髓法体外培养骨髓间充质干细胞并扩增,应用成骨诱导剂诱导向成骨细胞表型转化。取纳米晶胶原基骨材料经60Co照射灭菌,无水乙醇疏水化,三蒸水洗去乙醇等处理制备支架材料。细胞与支架材料复合培养。③实验分组:骨髓间充质干细胞培养至第3代后分为两组:复合材料后加成骨诱导剂组:骨髓间充质干细胞先与纳米晶胶原基骨复合培养3d后再加入成骨诱导剂;成骨细胞复合材料组:骨髓间充质干细胞在诱导成骨细胞后与纳米晶胶原基骨复合培养。④实验评估:记录第3代骨髓间充质干细胞生长曲线。将诱导后细胞分别进行碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色。扫描电镜比较两组复合物经体外孵育2周后,细胞在其中生长情况。结果:①细胞生长情况:倒置显微镜下观察原代培养的骨髓细胞增殖迅速,基本都呈形态均一成纤维样细胞,10～12d左右即可长满,并可稳定传代,传代细胞7～9d即可传代。诱导培养后的细胞呈现典型的成骨细胞形态和生物学特征。构建出骨髓间充质干细胞与骨组织共培养的模型。②体外复合后细胞生长及基质分泌情况:细胞可在纳米晶胶原基骨内表面良好贴壁,复合材料后加成骨诱导剂组,细胞贴附,但成骨细胞少见;成骨细胞复合材料组,细胞数量明显较前者多。复合培养8d,分布于支架材料上的细胞大量增殖、分泌细胞外基质。第14天,大量细胞在材料表面和孔隙中生长。细胞之间广泛存在突起连接,局部有胶原分泌,且可见成骨细胞形成。结论:证实纳米晶胶原基骨适合种子细胞的贴附、生长和增殖,经成骨诱导后的细胞较骨髓间充质干细胞更易与材料贴附、增殖。