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纳米磁球固定化木瓜蛋白酶的制备及酶学性质研究
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作者 梁杰 林国荣 +6 位作者 周凤超 杨磊 邹汉勋 刘涛 章丽 郭天章 蔡力锋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期161-168,共8页
为实现木瓜蛋白酶(papain,PAP)的固定化,通过悬浮聚合法在磁性微球Fe_(3)O_(4)表面均匀包覆聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA),制备核-壳结构的磁性纳米粒子Fe_(3)O_(4)@PMMA,进一步使PMMA微球表面酯解形成羧基,接枝聚乙... 为实现木瓜蛋白酶(papain,PAP)的固定化,通过悬浮聚合法在磁性微球Fe_(3)O_(4)表面均匀包覆聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA),制备核-壳结构的磁性纳米粒子Fe_(3)O_(4)@PMMA,进一步使PMMA微球表面酯解形成羧基,接枝聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI),将PAP物理吸附在PEI—1800长链上,通过交联剂戊二醛(glutaraldehyde,GA)对PEI进行交联封装,构筑具有磁响应且表面富含氨基的亲水性三维立体结构的载体Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800,实现PAP在纳米磁球表面的封装固定。对载体的形貌特征和理化性质表征分析,评价固定化酶Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP的酶学性质。结果表明,Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800比表面积为151.30 m^(2)/g,孔容为0.27 cm^(3)/g。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP最适温度为60℃,最适pH为6.0,在40~80℃维持80%以上的相对酶活力,在90℃时依然能保持66.84%以上的相对酶活力。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP热稳定性良好,在60℃下温育2 h后能保留80%以上的酶活力,在90℃温育2 h后仍能保留36.63%酶活力。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP在pH 5.0~pH 9.0均能维持80%以上相对酶活力。经过7次重复使用与洗脱之后,Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP酶活力依然保留在70%以上。 展开更多
关键词 纳米磁球 固定化 木瓜蛋白酶 接枝 聚乙烯亚胺 交联封装 酶学性质
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氨基纳米磁球免疫电化学法检测甲胎蛋白的研究 被引量:5
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作者 程琼 彭图治 +1 位作者 刘爱丽 何亮 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1068-1072,共5页
提出了一种利用纳米磁球免疫分离,进行酶催化电化学检测甲胎蛋白的新方法.在自制含有活性氨基的纳米磁球表面,用戊二醛固化甲胎蛋白(AFP)抗体,利用免疫夹心反应原理,捕获溶液中的AFP抗原和标记有辣根过氧化物酶的AFP抗体.在外加磁场的... 提出了一种利用纳米磁球免疫分离,进行酶催化电化学检测甲胎蛋白的新方法.在自制含有活性氨基的纳米磁球表面,用戊二醛固化甲胎蛋白(AFP)抗体,利用免疫夹心反应原理,捕获溶液中的AFP抗原和标记有辣根过氧化物酶的AFP抗体.在外加磁场的作用下,抗体-抗原结合物从样品溶液中分离,在含有邻氨基苯酚和过氧化氢的底液中,生成具有电活性的化合物3-氨基吩呃嗪,用灵敏的示差脉冲伏安法测定.响应电流与AFP抗原浓度分别在1~5和 5~400 μg/L范围内呈线性关系, 检出限达0.5 μg/L.实验表明,该方法具有分离效率高、测定时间短、抗干扰性强等优点,尤其适用于分析复杂生物样品.应用此法于人血清样品中AFP的检测,灵敏度显著高于酶联免疫吸附法. 展开更多
关键词 氨基纳米磁球 免疫电化学 检测 甲胎蛋白 抗体
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纳米磁球偶联重组p53蛋白检测p53自身抗体的新颖方法
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作者 王国玉 倪晶 《放射免疫学杂志》 CAS 2013年第5期598-601,共4页
目的:采用磁检测方法检测血清p53抗体浓度。方法:制备含有抗人p53抗体的试纸条,固定纳米磁球捕获的血清p53抗体,然后滴加到试纸条上,通过磁检测试纸条的磁信号,分析p53抗体的含量。结果:偶联重组p53蛋白的纳米磁球能有效富集患者血清p5... 目的:采用磁检测方法检测血清p53抗体浓度。方法:制备含有抗人p53抗体的试纸条,固定纳米磁球捕获的血清p53抗体,然后滴加到试纸条上,通过磁检测试纸条的磁信号,分析p53抗体的含量。结果:偶联重组p53蛋白的纳米磁球能有效富集患者血清p53抗体,p53抗体与偶联有纳米磁球的重组p53结合后,通过磁检测p53抗体的最低浓度可达pmol。结论:偶联重组p53蛋白的纳米磁球,可提高p53自身抗体的检测便捷性和灵敏性。 展开更多
关键词 P53抗体 纳米磁球 检测
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金磁复合纳米球的制备及其在检测肌红蛋白中的应用 被引量:2
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作者 孙宏浩 王甜甜 +5 位作者 廖天作 王怡 柯鹏 周凤珍 孙红梅 郭惠玲 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2017年第1期8-12,共5页
以粒径约为120 nm的Fe_3O_4磁性纳米球为内核,经过SiO_2包埋,BSA修饰并吸附金纳米球三步后得到一种组装型金磁复合纳米球MNP@SiO_2@BSA@AuNPs,并以此纳米球为载体,建立了检测心梗标志物之一的肌红蛋白的新方法.金磁复合纳米球偶联肌红... 以粒径约为120 nm的Fe_3O_4磁性纳米球为内核,经过SiO_2包埋,BSA修饰并吸附金纳米球三步后得到一种组装型金磁复合纳米球MNP@SiO_2@BSA@AuNPs,并以此纳米球为载体,建立了检测心梗标志物之一的肌红蛋白的新方法.金磁复合纳米球偶联肌红蛋白抗体4E2后,可快速分离和富集样品中的肌红蛋白,加入偶联有肌红蛋白抗体7C3的荧光硅纳米球后形成三明治夹心结构,通过检测荧光强度实现了对肌红蛋白的定量检测.结果表明:该检测方法在肌红蛋白浓度为0~250 ng·m L^(-1)的范围内荧光强度与肌红蛋白浓度具有良好的线性关系(R^2=0.993),选择性高,重复性好,快速检测肌红蛋白时间不超过30 min. 展开更多
关键词 纳米 肌红蛋白 荧光硅纳米 POCT技术
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基于纳米探针和石墨烯电极技术的ATP生物发光检测系统 被引量:3
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作者 徐元达 王春兴 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第1期62-68,共7页
由细菌引起的食品安全问题越来越受到人们的重视,使得快速细菌检测技术成为一个重要课题.设计了一种基于纳米探针技术、石墨烯透明电极(GTE)技术和三磷酸腺苷(ATP)发光技术的生物检测系统,能够快速准确地检测食品中的细菌.实验结果表明... 由细菌引起的食品安全问题越来越受到人们的重视,使得快速细菌检测技术成为一个重要课题.设计了一种基于纳米探针技术、石墨烯透明电极(GTE)技术和三磷酸腺苷(ATP)发光技术的生物检测系统,能够快速准确地检测食品中的细菌.实验结果表明该方法与传统检测方法具有很好的相关性,线性相关度可达0.972,检测时间控制在20min内.检测范围在102-106 CFU/mL.此外通过检测不同污染物测得该系统具有令人满意的性能.可以满足现场快速检测的要求. 展开更多
关键词 纳米磁球 石墨烯透明电极 ATP荧光 快速检测
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高血压病中医肝胆湿热证患者血清蛋白质组学研究 被引量:13
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作者 褚瑜光 石洁 +6 位作者 胡元会 吴华琴 刘贵建 王阶 李宜 张妍 朱紫嫣 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期37-41,共5页
目的对高血压病(hypertensive disease,HD)肝胆湿热证患者血清蛋白质组学进行研究,试图寻找与肝胆湿热证相关的特异蛋白质。方法选择HD患者60例,其中高血压病肝胆湿热组40例;高血压病非肝胆湿热组20例。另选择健康者39名作为对照。采用... 目的对高血压病(hypertensive disease,HD)肝胆湿热证患者血清蛋白质组学进行研究,试图寻找与肝胆湿热证相关的特异蛋白质。方法选择HD患者60例,其中高血压病肝胆湿热组40例;高血压病非肝胆湿热组20例。另选择健康者39名作为对照。采用弱阳离子纳米磁性微球捕获血清中的蛋白质,ProteinChip PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读仪检测绘制成蛋白质质谱(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS)。所有蛋白质质谱采用Biomarker Wizard 3.1分析之后用Biomarker Patterns Software 5.0识别肝胆湿热证特异表达的蛋白质,并建立证候决策模型。结果HD肝胆湿热证与健康组之间共检测出差异有统计学意义的蛋白质峰182个(P<0.05);肝胆湿热组与非肝胆湿热组之间共检测出差异有统计学意义蛋白质峰132个(P<0.05)。经筛选以质荷比为2 761.555(表达增高),6 624.362(表达降低),2 487.192(表达增高),2 461.610(表达增高),2744.318(表达降低)的5个蛋白峰组成的证候决策模型能很好地将肝胆湿热区分出来,该模型的敏感性为96.55%、特异性为90.00%、假阳性率10.00%、假阴性率3.45%。进一步对此决策模型进行盲法检验(前瞻性考核),结果其敏感性为81.82%、特异性为89.66%、假阳性率10.34%、假阴性率18.18%。结论差异表达的蛋白质是HD肝胆湿热证的物质基础,以此建立分子生物学证候决策模型。 展开更多
关键词 蛋白质组学 弱阳离子纳米磁球 证候模型 高血压病 肝胆湿热证
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抗γ-精浆蛋白特异性单链抗体的RTS表达及其生物学活性的检测 被引量:3
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作者 韩月东 邓敬兰 +3 位作者 宦怡 高峰 潘碧峰 崔大祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第2期135-139,共5页
目的:制备人精浆蛋白特异性单链抗体,并检测其生物活性与靶向性。方法:应用快速翻译系统(RTS)表达γ-精浆蛋白特异性单链抗体,制备E4B7ScFv肽段和纳米颗粒偶联物,应用免疫沉淀反应、Western Blotting法、免疫荧光染色分析和细胞实验,... 目的:制备人精浆蛋白特异性单链抗体,并检测其生物活性与靶向性。方法:应用快速翻译系统(RTS)表达γ-精浆蛋白特异性单链抗体,制备E4B7ScFv肽段和纳米颗粒偶联物,应用免疫沉淀反应、Western Blotting法、免疫荧光染色分析和细胞实验,研究该抗体进入前列腺癌细胞的活性。结果:成功地制备了抗γ-精浆蛋白特异性单链抗体纳米颗粒偶联物。该抗体可与前列腺癌细胞特异性结合,并可在15 min内将纳米磁珠带入前列腺癌细胞内,进入癌细胞的磁球数量随着细胞培养时间的延长而增多,对照实验显示该偶联物不能进入其它组织肿瘤细胞。结论:制备的抗γ-精浆蛋白特异性单链抗体生物活性与靶向性均较好,在前列腺癌的早期核磁共振显像诊断与靶向治疗上具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 γ-精浆蛋白 单链抗体 纳米磁球 前列腺癌 靶向成像
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仿酶催化剂制备及催化降解PAEs类污染物 被引量:3
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作者 闫绍轩 王何圆 +1 位作者 靳松 李乃瑄 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期65-68,135,共5页
采用超声辅助反向共沉淀法制得磁纳米Fe3O4颗粒,然后以磁纳米Fe3O4颗粒为种子采用种子乳液聚合法制得羟基功能化的磁纳米复合物微球,再以三聚氯氰为桥联剂键合氯化血红素制得仿酶催化剂。利用傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、配置积分... 采用超声辅助反向共沉淀法制得磁纳米Fe3O4颗粒,然后以磁纳米Fe3O4颗粒为种子采用种子乳液聚合法制得羟基功能化的磁纳米复合物微球,再以三聚氯氰为桥联剂键合氯化血红素制得仿酶催化剂。利用傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、配置积分球的紫外-可见(UV-Vis)分光光度计、透射电子显微镜(TEM)、热重分析仪(TGA)和振动样品磁强计(VSM)对催化剂进行了表征。结果表明,催化剂粒径大小为10~12 nm,粒度均一,分散性好,在300 K下具有一定顺磁性,饱和磁化强度为21.61 emu/g,磁性物质含量为52.50 wt%。催化剂在紫外光照和H2O2存在下对水中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)有较高的氧化降解活性,且重复使用效果较好,因此对其反应机理进行了探讨。 展开更多
关键词 纳米复合物微 氯化血红素 紫外光 双氧水 邻苯二甲酸二甲酯
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磁微球负载氯化血红素仿酶催化剂制备及催化降解DMP 被引量:3
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作者 闫绍轩 王何圆 +1 位作者 靳松 李乃瑄 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期560-565,共6页
采用超声辅助反向共沉淀法制得磁纳米Fe3O4颗粒,然后以磁纳米Fe3O4颗粒为种子采用种子乳液聚合法制得羟基功能化的磁纳米复合物微球,再以三聚氯氰为桥联剂键合氯化血红素制得磁微球负载氯化血红素仿酶催化剂.利用傅里叶变换红外光谱仪(F... 采用超声辅助反向共沉淀法制得磁纳米Fe3O4颗粒,然后以磁纳米Fe3O4颗粒为种子采用种子乳液聚合法制得羟基功能化的磁纳米复合物微球,再以三聚氯氰为桥联剂键合氯化血红素制得磁微球负载氯化血红素仿酶催化剂.利用傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、配置积分球的紫外-可见(UV-Vis)分光光度计、透射电子显微镜(TEM)、热重分析仪(TGA)和振动样品磁强计(VSM)对催化剂进行了表征.结果表明,催化剂粒径大小为10~12 nm,粒度均一,分散性好,在300 K下具有一定顺磁性,饱和磁化强度为21.61 emu/g,磁性物质含量为52.50%.催化剂在紫外光照和H2O2存在下对水中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)有较高的氧化降解活性,且重复使用效果较好. 展开更多
关键词 纳米复合物微 氯化血红素 紫外光 双氧水 邻苯二甲酸二甲酯
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Fabrication and magnetic transformation from paramagnetic to ferrimagnetic of ZnFe2O4 hollow spheres 被引量:3
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作者 Yi-cheng GE Zhi-long WANG +1 位作者 Mao-zhong YI Li-ping RAN 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2019年第7期1503-1509,共7页
ZnFe2O4 hollow spheres (ZFHs) with sizes of 200-302 nm were synthesized by simple impregnating method using the as-prepared phenolic formaldehyde (PF) spheres as templates and subsequent annealing at 500-700 ℃. The p... ZnFe2O4 hollow spheres (ZFHs) with sizes of 200-302 nm were synthesized by simple impregnating method using the as-prepared phenolic formaldehyde (PF) spheres as templates and subsequent annealing at 500-700 ℃. The prepared ZFHs are assembled by a large number of small nanoparticles with sizes of 15-20 nm, and many mesopores exist among these nanoparticles. The samples annealed at 500-550℃ exhibit a single cubic spinel structure, while higher annealing temperature leads to the formation of hexagonal ZnO and rhombohedral α-Fe2O3 secondary phases. The size of the assembled nanoparticles increases with the increase in annealing temperature. Novel magnetic transformation from paramagnetic to ferrimagnetic is induced by the reduction of annealing temperature and the saturation magnetization significantly increases from 2.3 to 13.5 A·m^2/kg. The effect of the formation of hollow sphere structure on the redistribution of Fe^3+ and Zn^2+ in the spinel structure was studied. 展开更多
关键词 ZnFe2O4 hollow spheres nanoparticles magnetic properties magnetic transformation
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Magnetic yolk-shell structured anatase-based microspheres loaded with Au nanoparticles for heterogeneous catalysis 被引量:7
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作者 Chun Wang Junchen Chen +8 位作者 Xinran Zhou Wei Li Yong Liu Qin Yue Zhaoteng Xue Yuhui Li Ahmed A. Elzatahry Yonghui Deng Dongyuan Zhao 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第1期238-245,共8页
Magnetic yolk-shell structured anatase-based microspheres were fabricated through successive and facile sol-gel coating on magnetite particles, followed by annealing treatments. Upon loading with gold nanoparticles, t... Magnetic yolk-shell structured anatase-based microspheres were fabricated through successive and facile sol-gel coating on magnetite particles, followed by annealing treatments. Upon loading with gold nanoparticles, the obtained functional magnetic microspheres as heterogeneous catalysts showed superior performance in catalyzing the epoxidation of styrene with extraordinary high conversion (89.5%) and selectivity (90.8%) towards styrene oxide. It is believed that the construction process of these fascinating materials features many implications for creating other functional nanocomposites. 展开更多
关键词 magnetic microspheres TITANIA yolk-shell structure gold nanoparticles heterogeneous catalysis
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