胶原/纳米磷酸三钙复合人工骨骨膜下引导成骨实验研究

将胶原 (Co)与纳米磷酸三钙 (N- TCP)复合制成复合人工骨并植入兔颅骨的骨膜下作为实验组 ,使用显微镜测微尺测量不同时间点新骨自骨表面长入材料内的高度 ,并和羟基磷灰石 (HA)组 (对照组 )作对照 ,观察 Co/N- TCP复合人工骨引导成骨能力 ,探讨其用于萎缩性牙槽嵴重建的可行性。结果发现 :各时间点实验组新骨长入高度均优于对照组 (P<0 .0 5或 <0 .0 1)。提示 :Co/N- TCP在骨表面引导成骨能力优于 HA。

乳蛋白包覆纳米磷酸三钙的表面性质和机理研究

研究了酪蛋白(SC)和乳清分离蛋白(WPI)包覆在纳米磷酸三钙(TCP)颗粒表面的过程和作用机理。Zeta电位的测试表明SC和WPI包覆在TCP表面,使得TCP纳米颗粒表面所带负电荷增加。被不同种类的乳蛋白包覆的TCP悬浮颗粒在溶液中的稳定性都得到了提高,其中被WPI包覆的TCP颗粒的水相再分散液的稳定性得到了最为明显的改善,虽然实验结果也表明SC对TCP的包覆更容易发生。研究乳蛋白的不同组分在TCP表面的包覆过程发现,SC中αsCN上的Ser-P在对TCP颗粒表面的包裹过程中更有优势。WPI中的β-Lg对TCP的包覆会比α-La容易发生。作者还讨论了乳蛋白包覆在TCP颗粒表面的作用机理,认为乳蛋白对TCP的包覆过程和效果与两种乳蛋白和TCP颗粒的结构和表面性质有关。

纳米磷酸三钙/明胶/鹿茸多肽复合材料的制备及对人成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

探讨反相微乳液法制备的β-纳米磷酸三钙/明胶/鹿茸多肽复合材料(简称纳米复合材料)对人成骨细胞功能的影响。利用反相微乳液法制备纳米复合材料,扫描电镜观察其形态,EDX与SELDI-TOF-MS分析对复合材料进行表征。采用MTT比色法、茜素红染色法检测纳米复合材料对体外培养的人成骨细胞hFOB1.19的增殖、矿化结节形成的影响;采用全自动生化分析仪检测hFOB细胞碱性磷酸酶活性(ALP)。结果表明该纳米复合材料可促进人成骨细胞增殖,提高ALP活性并增加矿化结节形成的数量,可促进人成骨细胞的增殖、分化成熟及矿化。

纳米β-磷酸三钙在聚乳酸复合材料中的分散研究

采用化学合成方法制备β 磷酸三钙(β TCP),通过研磨获得纳米级粒子。采用机械搅拌混合、超声振荡混合、分散剂研磨后超声混合等3种方法,将纳米β TCP与聚乳酸混合制得复合材料,用扫描电镜观察。结果表明:用一缩二乙二醇作分散剂研磨后,再经超声混合,可以使纳米粒子在复合材料中分散均匀,纳米β TCP与聚乳酸基体之间结合良好,粒子大小仅为300nm左右。

纳米β-磷酸三钙/胶原复合兔骨髓间充质干细胞修复兔颌骨缺损的实验研究

目的:探讨新型纳米β-磷酸三钙/胶原支架材料与兔自体骨髓间充质干细胞联合修复兔颌骨缺损的效果。方法:取兔红骨髓,采用全骨髓培养法,获得骨髓间充质干细胞,体外确定其成骨分化能力。与支架材料体外复合后回植入下颌骨10mm×8mm大小箱状骨缺损腔内。10w取材,组织切片观察成骨情况。结果:获得大量增生活跃3-4代兔骨髓间充质细胞,经体外鉴定可向成骨方向分化。与纳米β-磷酸三钙/胶原复合后体内成骨效果优于单纯纳米β-磷酸三钙/胶原。结论:兔BMSCs与Nβ-TCP/Co结合后回植入兔颌骨人工骨缺损区后,可以良好成骨,成骨较单纯纳米β-磷酸三钙/胶原复合体好。

N,O-羧甲基壳聚糖/纳米β-磷酸三钙复合材料的制备及其物理性能测试

采用机械混合-热压成型法制备N,O-羧甲基壳聚糖(N,O-CMC)/纳米β-磷酸三钙(n-β-TCP)复合材料,并通过吸水率、显气孔率和抗压强度比较不同质量比的复合材料的物理性能及形貌差异.结果表明,随n-β-TCP粉末质量比的增大,复合材料的吸水率和显气孔率增大,抗压强度先减小后增大.激光共焦扫描显微镜表明,随着n-β-TCP粉末质量比的增大,复合材料中孔的分布逐渐均匀,孔径大小趋于一致.当m(N,O-CMC)∶m(n-β-TCP)=1时,所得复合材料中均匀分布约1～6μm的孔,且n-β-TCP较均匀地分散在N,O-CMC中.

载纳米银磷酸三钙的体外细胞毒性及兔体内毒性

背景:课题组前期研究发现,负载5%纳米银颗粒β-磷酸三钙材料具有抗菌性和良好的生物相容性。目的:10%纳米银颗粒β-磷酸三钙材料的体内外毒性。方法:(1)体外细胞毒性:分别采用含质量分数10%纳米银颗粒β-磷酸三钙材料浸提液、多孔β-磷酸三钙材料浸提液、正常组织培养液培养SD大鼠(上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供)骨髓间充质干细胞,培养1,3,5,7 d,CCK-8法检测细胞增殖;(2)动物体内毒性:取20只新西兰大白兔(上海市甲干生物科技有限公司提供),在左侧股骨外髁制作直径6 mm、深度13 mm的骨缺损,随机分2组,实验组缺损处植入含质量分数10%纳米银颗粒的β-磷酸三钙材料,对照组植入β-磷酸三钙材料。植入后12周,采用电感耦合等离子体质谱法检测血液和各组织器官内银离子浓度;苏木精-伊红染色切片观察各组织器官病理状态;Van Gieson染色切片观察材料植入区组织生长情况。结果与结论:(1)β-磷酸三钙浸提液组、正常组织培养液组、含纳米银颗β-磷酸三钙材料浸提液组培养不同时间点的细胞增殖比较无差异(P <0.05);(2)实验组和对照组兔血液、心、肝、脾、肺、肾各脏器中的银离子浓度均小于0.1×10^(-6),小于WHO规定的人体内银离子的最高浓度0.5×10^(-6);(3)实验组与对照组兔心、肝、脾、肺、肾组织切片均未见明显病理性改变;(4)实验组与对照组材料轮廓可分辨,材料周围可见被染成红色的新骨组织,材料内部多孔结构内可见大量红染的新骨组织,两组材料多孔结构内的新骨组织分布未见明显差异;(5)结果表明,含质量分数10%纳米银颗粒的β-磷酸三钙材料无明显细胞毒性与动物体内毒性,具有良好的生物相容性。

一体化层状梯度修复体用于骨软骨组织工程的实验研究

[目的]探索胶原/壳聚糖/纳米β-磷酸三钙一体化层状梯度修复体在组织工程中用作骨软骨缺损修复的可行性。[方法]以Ⅰ型胶原、壳聚糖、纳米β-磷酸三钙(β-TCP)为基本原料,采用无毒交联并通过冷冻干燥法成型;扫描电镜观察,测定支架材料的孔径、孔隙率以及交通孔情况;分离扩增兔骨髓间充质干细胞(BMSC),将BMSC接种于材料上,扫描电镜观察细胞在材料上的黏附状态,MTT法测定细胞在材料上的生长曲线;以软骨诱导液体外诱导细胞-支架复合物向软骨分化,2周后植入自体股部肌袋,6周取材,HE、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化鉴定诱导分化效果。[结果]材料疏松多孔,孔径大于100μm,孔隙率大于95%。细胞在材料上黏附状态良好,并且增殖迅速。BMSC-材料复合体经体外三维诱导后可在自体异位向软骨分化。[结论]Ⅰ型胶原/壳聚糖/纳米TCP一体化层状梯度修复体具有良好的孔隙结构和生物相容性,有望成为一种新型的组织工程支架材料用于骨软骨缺损修复。

不同质量比N,O-CMC/n-β-TCP复合材料在模拟体液中的降解性能

为评价不同质量比N,O-CMC/n-β-TCP复合材料在模拟体液中的降解性能。测定了不同降解时间模拟体液的pH值、钙、磷离子浓度、材料质量、表面结构及相成分变化以比较不同质量比复合材料的降解性能。结果表明:不同质量比复合材料降解液的pH值均在6.9以上,当二者质量比为1:1时,pH值处于7.0～7.4;复合材料的质量随降解时间呈增加趋势。XRD和FTIR分析表明,复合材料表面均有类骨羟基磷灰石生成,且以二者质比为1:1时生成量最多。

小肠黏膜下层复合材料修复兔下颌骨缺损

目的探讨猪小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)与纳米β-磷酸三钙(nano meter crystalβ-tricalciumphosphate,nmβ-TCP)结合形成的复合支架材料修复骨组织缺损的作用。方法新西兰大白兔13只,在双侧下颌骨上制备骨缺损模型,随机分为4组,分别使用SIS、nmβ-TCP及两者混合制成的复合支架材料进行修复,并设置空白对照。12周时处死动物取材,进行组织学切片及扫描电镜观察,计算骨矿化沉积率(mineralapposition rate,MiAR)、骨小梁厚度(trabecular thichness,Tb.Th)和体积分数,并作统计学处理。结果 12周时新生骨小梁占据大部分缺损区域,材料已基本降解,nmβ-TCP组残余少量材料。复合支架组新生骨小梁形态较成熟,荧光双带距离较宽,MiAR、Tb.Th以及骨小梁体积分数均明显高于其他几组(P<0.05)。结论猪SIS与nmβ-TCP混合制成的复合支架材料,具有良好的成骨特性和组织相容性,能够有效地修复下颌骨缺损。

口腔材料与器械

20062533湿法合成纳米缺钙磷灰石的实验研究；20062534，XD-1根管测量仪的临床应用研究；20062535不同纳米颗粒二氧化钛的细胞相容性研究；20062536金刚石涂膜种植材料骨界面区骨钙素mRNA表达；20062537纳米磷酸三钙复合人工骨的Ames致突变试验；20062538牙本质粘结界面纳米渗漏的激光扫描共聚焦显微观察．