新型纳米磷酸钙正畸粘接剂钙磷离子充电的研究

目的:合成一种可以反复进行钙磷离子充电、释放以防止釉质脱矿的正畸粘接剂,并探究钙磷离子充电持续时间和频率对于离子再释放效能的影响。方法:可反复进行钙磷离子充电的粘接剂由均苯四甲酸二甲基丙烯酸甘油酯(PMGDM)和乙氧基化双酚A二甲基丙烯酸酯(EBPADMA)组成。纳米磷酸钙(NACP)以40%的质量分数混入树脂中。离体牙粘接托槽,使用万能试验机测试釉质粘接剂的抗剪切强度;在p H为4的酸性溶液中浸泡粘接剂样本,测量钙、磷离子的初期释放;再使用p H为7的充电液对释放完离子的样本进行充电,返回到p H为4的环境中测试再释放能力。结果:这种新型正畸粘接剂的抗剪切强度与商业化的正畸粘接剂无统计学差异(P>0.1)。样本在一次充电处理后,可以连续14 d持续释放钙、磷离子,而无需再次充电。离子再释放能力不会随着再充电/再释放循环次数的增加而降低(P>0.1)。14 d时离子的再释放浓度与不同的充电方式之间的关系为:1 min 3次>3 min 2次>1 min 2次>6 min 1次>3 min 1次>1 min 1次。结论:这种含NACP的可充电正畸粘接剂可以长期释放钙磷离子,抑制正畸托槽周围牙釉质脱矿。

多孔超顺磁性纳米磷酸钙(PSMN-CaP)的制备研究

近来,磁性纳米磷酸钙,因良好的生物相容性和组织键合能力,备受研究者的关注。采用磁性纳米粒子Fe_3O_4做核,CTAB做结构导向剂制备出具有多孔结构的超顺磁性纳米磷酸钙复合物(PSMN-CaP)。通过XRD、FI-IR、N2吸附/脱附、TEM和磁性能对样品进行了分析表征。结果表明:制备出的样品PSMN-CaP具有超顺磁性多孔结构,粒径约为80 nm,饱和磁化强度为9.4 emu·g^(-1)。

纳米磷酸钙作为猪瘟多肽疫苗佐剂的研究

为了探索纳米磷酸钙(NCaP)作为猪瘟多肽疫苗佐剂的可行性,本研究利用猪瘟多肽疫苗作为抗原,制备纳米磷酸钙吸附猪瘟多肽疫苗。将制备好的疫苗免疫兔后,分别检测兔抗体水平和攻毒后体温变化情况。检测结果显示,纳米磷酸钙对猪瘟多肽吸附率达70%;免疫后纳米磷酸钙佐剂组抗体水平低于弗氏佐剂,但与游离猪瘟多肽疫苗组相比,有较大提高;除弗氏佐剂组外,所有实验兔均有体温升高现象,纳米磷酸钙佐剂组体温升高的时间与空白组相比推迟16 h。结果表明,NCaP作为佐剂相对游离猪瘟多肽可提高其免疫效果,但其诱导的抗体水平低于弗氏佐剂组。

纳米磷酸钙盐改性牙科材料防治牙体牙髓病研究进展

纳米材料通常是指直径1~100 nm的微小颗粒,往往具有独特的物理化学性质,是牙科生物材料发展的主要方向之一。纳米磷酸钙盐改性牙科材料在窝沟封闭、牙体树脂修复、牙体粘接、根管封闭等方面有广泛的应用。目前研究表明,纳米磷酸钙盐改性后的牙科材料具有更强的机械性能,还显示出钙磷离子长期释放和较好的离子再充能力,能够有效促进牙体硬组织再矿化,具有良好的应用前景。但目前研究难以准确模拟口腔内的复杂环境,因此,纳米磷酸钙盐改性牙科材料的生物相容性、细胞毒性及在临床运用的效果等仍需进一步验证。本文就近年来纳米磷酸钙盐改性牙科材料在牙体牙髓疾病防治方面研究的进展进行综述。

仿生矿化纳米磷酸钙对牙本质小管封闭性能的评价

目的 制备仿生矿化的纳米磷酸钙,并探讨其对牙本质小管的封闭性能。方法 采用DMEM仿生矿化策略制备无定形磷酸钙材料(DMEM based amorphous calcium phosphate, DACP),运用透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱扫描(FTIR)等检测观察其理化表征。选择口腔上皮角质形成细胞(HOK)和牙髓细胞(DPC)分别与材料共培养24 h后,CCK-8法评估材料的生物相容性。收集完整无龋的牙齿制备牙本质片,用DACP材料悬液均匀涂抹牙本质片,设置阳性对照NovaMin组和空白对照组,分别处理1、7 d后扫描电子显微镜(SEM)评估牙本质片的表面和截面封闭效果。结果 TEM显示DACP为均匀球形无定形纳米颗粒,随矿化时间的延长粒径有所增加。CCK-8结果显示HOK和DPC在25、50、100、200μg/mL DACP下细胞活力均较好,提示材料有较好的生物相容性。牙本质片被处理1 d后DACP组牙本质小管大部分封闭;被处理7 d后DACP组牙本质小管表面呈现完全封闭的状态,且牙本质片截面可见DACP可渗入小管内。结论 运用DMEM仿生矿化策略制备的纳米磷酸钙具有较好的生物相容性和牙本质小管封闭作用,有望成为一种新的脱敏材料。

纳米磷酸钙骨水泥根管封闭剂的实验研究

目的纳米磷酸钙骨水泥根管封闭剂是我院自行研制的一种新型的根管封闭剂。本文对该材料进行体内的生物相容性实验研究。方法皮下植入实验和骨埋植实验参照ISO 10993和GB/T16886-1997医疗器械生物学评价标准所推荐的动物实验方法,选用7只雄性日本大耳白兔,分别在其背部和肱骨植入。于术后4周、8周、12周处死动物,进行大体观察和组织病理学观察。实验结果显示,各个时间段内实验组和对照组均没有统计学意义(P>0.05),而整个实验时期内实验组和对照组的炎症反应表现出愈合的趋势(P<0.05),提示了组织反应的好转。结论纳米磷酸钙骨水泥根管充填材料表现出良好的生物相容性。

静电纺丝法制备聚乳酸/纳米磷酸钙复合纳米纤维及其表征

首先合成了纳米磷酸钙(NCP),用扫描电镜(SEM)和X射线衍射(XRD)进行了表征.再利用静电纺丝法制备了PLA/NCP复合纳米纤维,对纤维进行了TEM,SEM,XRD以及单轴拉力测试的表征.TEM和XRD测试表明,NCP已成功掺杂到聚乳酸纤维中,获得的纤维为复合纤维.SEM测试表明,NCP在溶液中浓度较小时,复合纳米纤维的形貌变化不大;NCP浓度超过PLA质量的7%后,纤维表面出现粒状物;随着浓度继续增大,粒状物逐渐增多,最后很难成纤.拉伸实验结果表明,复合纤维拉伸强度先随着NCP浓度的增加而增大,但NCP浓度超过7%后拉伸强度随着浓度的增加反而减小.

磷酸钙纳米颗粒介导干扰LMO4对皮肤鳞癌细胞增殖的影响

目的运用磷酸钙纳米颗粒包裹DNA转染皮肤鳞癌细胞,以靶向干扰LIM结构域蛋白4(LMO4)表达,探讨转录因子LMO4在皮肤鳞癌中作用和机制。方法采用逆转录-定量PCR技术(RT-qPCR)、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹技术检测目的分子表达。利用经典方法制备磷酸钙纳米颗粒,包裹含有靶向干扰LMO4的shRNA表达载体,转染人皮肤鳞癌细胞A431。采用噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖能力;运用流式细胞分析技术检测细胞周期变化。结果LMO4在皮肤鳞癌组织和A431细胞中高水平表达。磷酸钙纳米颗粒与DNA的最佳包裹比例为10∶1。此纳米颗粒包裹的DNA可以有效转染A431细胞并有效干扰LMO4表达,与脂质体转染后的干扰效率相比,差异无统计学意义(P=0.21)。在A431细胞中干扰LMO4后的24、36和48 h,细胞的增殖能力较对照组均显著降低。细胞周期分析显示:干扰组G_(0)/G_(1)期细胞为39.82%±1.86%,与对照组G_(0)/G_(1)期细胞(30.76%±1.96%)相比,差异有统计学意义(P=0.003);干扰组的S期细胞为39.56%±0.65%,与对照组的S期细胞(50.65%±0.62%)比较,差异有统计学意义(P=0.002)。干扰LMO4表达可以抑制细胞周期素蛋白E和周期素蛋白激酶2(CDK2)的表达。结论磷酸钙纳米颗粒能有效包裹DNA,并具有较高的转染效率;干扰LMO4表达可抑制细胞周期素蛋白E和CDK2的表达,抑制细胞增殖。

磷酸钙纳米生物材料的合成及烧结研究进展

纳米磷酸钙陶瓷由于其独特的纳米效应,力学性能和生物活性大幅度提升,成为生物医用材料领域研究热点。纳米磷酸钙陶瓷制备的两大难点在于纳米粉体的合成和陶瓷的烧结。对现有的纳米磷酸钙粉体合成和纳米陶瓷烧结工艺进行了全面的综述,归纳分析了不同过程工艺参数对纳米粉体和陶瓷晶粒的影响,并对今后的研究进行了展望。

新型多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架体外细胞相容性的实验研究

目的 评价新型多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架材料的体外细胞相容性。方法 SD大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)经矿化诱导培养、扩增并检测证实其已具成骨细胞表型后,分别与多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架(实验组)、普通多孔羟基磷灰石陶瓷支架(对照组)体外复合培养。扫描电镜观察BMSCs在材料上的生长及生理功能表达情况;测定细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的含量;流式细胞仪检测细胞的凋亡及周期、倍体,比较细胞的粘附能力、增殖活力及成骨活性。结果 BMSCs经体外诱导形成钙结节,Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶免疫染色结果阳性。两组材料上皆有细胞附着生长,但实验组细胞的粘附能力、增殖活力及成骨活性均强于对照组。结论 SD大鼠BM

一种新型基因传输载体-磷酸钙纳米颗粒用于肿瘤基因治疗的研究

目的研究新型非病毒载体磷酸钙纳米颗粒的生物学特性,评估其在肿瘤基因治疗中应用的前景。方法化学方法制备,氯化钙修饰纳米颗粒,用琼脂糖凝胶电泳分析磷酸钙纳米颗粒与DNA的结合效率及对DNA的保护作用,用绿色荧光蛋白基因作报告基因,将磷酸钙纳米颗粒为基因载体转染鼻咽癌(CNE-2)细胞和在动物体内转染肿瘤细胞;以及将磷酸钙纳米与自杀基因yCDglyTK结合,并在体外对鼻咽癌进行基因治疗。结果电镜观察证实磷酸钙纳米颗粒进入细胞内,磷酸钙纳米颗粒与DNA结合后,能对DNA起保护作用;磷酸钙纳米颗粒作为基因转染的载体,将绿色荧光蛋白基因导入CNE-2细胞,用荧光显微镜观察到高水平的绿色荧光蛋白表达;体内转染结果显示,纳米介导的基因在肿瘤组织中有很好的表达;以磷酸钙纳米为载体介导自杀基因yCDglyTK在体外治疗鼻咽癌的实验中显示,在加入5-FC后大量的CNE-2细胞出现死亡。结论磷酸钙纳米颗粒具有优良的生物学特性,是有应用前景的基因转染和基因治疗载体之一。

纳米双相磷酸钙陶瓷组织工程支架复合大鼠自体骨髓基质干细胞修复极量颅骨缺损

背景：传统生物陶瓷材料作为组织工程支架材料的脆性大,不易加工成形且在体内降解困难,影响新骨的长入和后期的改建,故其应用受到一定限制。目的：观察纳米双相磷酸钙陶瓷（Biphasic calcium phosphate nanocomposite,NanoBCP）用于组织工程支架修复颅骨缺损的成骨性能。设计、时间及地点：随机分组、动物对照实验,于2004-09/2005-05在四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室完成。材料：选择2月龄雄性体健SD大鼠48只,体质量180-200g,在颅骨上制成直径为8mm的颅骨全层缺损区为极量骨缺损模型。实验用孔径100-400μm,含孔率为60%-80%的NanoBCP陶瓷及SD大鼠自体骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）由四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室提供。方法：按随机数字表法将模型大鼠分为3组,NanoBCP/BMSCs组16只,BMSCs经含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的诱导液培养后与NanoBCP复合植入SD大鼠颅骨缺损区;单纯NanoBCP组16只,仅在相同部位单纯植入NanoBCP支架材料;空白对照组16只不植入任何材料。主要观察指标：植入后4,16,24周取材,通过X射线片分析、大体和组织学观察评价其成骨性能。结果：SD大鼠48只均进入结果分析。①植入后4,16周,NanoBCP/BMSCs组新生骨组织逐渐增多,Ⅰ型胶原免疫组织化学染色阳性。植入后24周,NanoBCP/BMSCs组SD大鼠颅骨缺损完全修复,单纯NanoBCP组部分修复,空白对照组未修复。②植入后4,24周,NanoBCP/BMSCs组骨缺损区X射线阻射影像密度逐渐增加,新骨充填,接近于正常骨;单纯NanoBCP组骨缺损区亦见X射线阻射影像,与颅骨邻接区的环形透光影密度逐渐增加,骨缺损中央部密度不均匀。结论：NanoBCP与BMSCs复合物能够有效地修复颅骨缺损。

兔成骨细胞与纳米氧化锆强韧化高孔隙率磷酸钙人工骨细胞支架生物相容性研究

目的 研究成骨细胞与纳米氧化锆强韧化高孔隙率磷酸钙人工骨细胞支架在体外培养条件下的生物相容性。方法 将成骨细胞株置于含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养基中培养,传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养,分为纳米支架复合细胞组和单纯细胞组,不同时间用倒置相差显微镜、HE染色光镜及扫描电镜观察。MTT法进行细胞增殖测定,并进行细胞微量蛋白含量检测和碱性磷酸酶的定量检测。结果 成骨细胞体外培养时复合或不复合纳米支架均生长良好,表现出典型的细胞形态特征和生物学特性,纳米支架利于细胞的贴附、生长与增殖,并对细胞的功能无不良影响。结论 纳米支架是较理想的骨组织工程支架材料,成骨细胞复合纳米支架用于骨缺损的修复,具有广阔的临床应用前景。

应用纳米多孔双相磷酸钙陶瓷再生的牙周组织对正畸力应答的免疫组织学研究

为了观察纳米多孔双相磷酸钙陶瓷（nano porous biphasic calciump hosphate，PBCP）再生的牙周组织对正畸力应答的组织学研究，将2只成年比格犬的上、下颌各一颗第三切牙进行牙周再生手术，术后六个月后对实验牙和对侧同名牙进行正畸牙移动，4周后处死动物，对标本常规脱钙，石蜡包埋，切片，行骨钙素免疫组化实验，镜下观察，再生的牙周组织和对照组同部位的骨钙素阳性表达情况无明显差异，结果表明，应用PBCP再生的牙周组织进行正畸牙移动是基本可行的。

可作为疫苗佐剂的云芝多糖磷酸钙纳米粒的制备与表征

我们设想通过磷酸钙药物载体与多糖的结合制备新型的疫苗佐剂,以提高疫苗传递效率,增强免疫应答。首先对云芝粗多糖进行提纯处理,随后利用高碘酸钠(Na IO4)氧化云芝多糖(PSK)得到多醛基产物,再以帕米膦酸二钠(PA)修饰,得到PSK-PA,利用红外光谱法对其产物进行鉴定。采用共沉淀法,制备功能化磷酸钙(PSK-CAP)纳米粒,利用动态光散射(DLS)粒度仪对纳米粒性能进行对比分析选取最优结果,并通过扫描电子显微镜(SEM)观察最优条件下纳米粒的形貌。随后利用载有鸡卵清蛋白(OVA)为模型抗原的纳米粒(PSKCAP-OVA)验证对细胞活性影响,同时观察RAW264.7细胞对其吞噬能力。通过一系列的表征发现,纳米粒平均粒径为100 nm左右,且分散性良好,PSK-CAP-OVA纳米粒毒性较小,并且RAW264.7细胞更倾向于吞噬装载OVA的纳米粒,可以提高胞内OVA的浓度。总之,PSK-CAP纳米粒可为后续研究佐剂类型提供参考。

共载阿霉素-碳点@磷酸钙脂质纳米粒的制备与评价

目的制备共载阿霉素-碳点@磷酸钙脂质纳米粒(Doxorubicin-carbon dots@lipid coated calcium,DOX-CDs@LCP NPs),并对其载药性能及体外释药行为进行评价。方法采用反相微乳法制备DOX-CDs@LCP NPs,考察钙/磷比值,内水相pH值及搅拌速度对纳米粒外观的影响;并对阿霉素和碳点浓度对制剂载药量的影响进行考察。通过激光散射粒径测定仪测定粒径和电位,采用透射电镜表征纳米粒形态。同时以不含碳点的纳米粒(DOX@LCP NPs)作为对照。比较两种制剂在体外释药行为上的差异。结果DOX-CDs@LCP NPs带有磷酸钙内核,外层有磷脂包裹,平均粒径为133.9 nm,zeta电位为-20 mV,包封率和载药量质量分数分别为(64.38±2.4)%、(12.22±0.53)%;在生理条件下,DOX-CDs@LCP能够延缓药物释放达29.9%;在酸性环境下,药物释放加速,累积释放量可达78%。结论DOX-CDs@LCP NPs具有较高的载药量和体外释药性能。

磷酸钙纳米颗粒药物递送系统在骨组织工程研究与应用中的优势

背景:局部给药在骨组织工程应用中具备多种优势,以磷酸钙纳米颗粒作为载体的药物递送系统因其独特的优势已被广泛研究。目的:综述磷酸钙纳米颗粒药物递送系统在骨组织工程领域的最新研究进展及应用,展望其未来发展方向。方法:在中国知网、万方数据知识服务平台、Web of Science、PubMed数据库中进行相关文献检索,中、英文检索关键词为“磷酸钙颗粒,骨,药物递送,载药;calcium phosphate particle,calcium phosphate granule,bone,drug delivery”,通过纳入、排除标准筛选后,最终纳入60篇文献进行综述。结果与结论:羟基磷灰石、β-磷酸三钙、无定形磷酸钙及双相磷酸钙为最常用于药物递送的磷酸钙纳米颗粒,它们具有以下特性:良好的生物相容性和生物降解性;可控的粒径;高比表面积;温和的制备条件;pH值响应性。多数药物通过电荷与氢键作用吸附于磷酸钙纳米颗粒上,部分药物可与钙离子形成作用力较强的离子键或螯合物。磷酸钙纳米颗粒负载抗生素、双膦酸盐、生长因子、抗炎因子及核酸分子后展现出了有效保护、缓释药物及介导其入胞的作用,在体内外研究中均取得良好的促成骨效果。

磷酸钙纳米体系用于顺铂前药的运载

纳米载药体系能促进铂类广谱抗癌药物的运输和增强药效,并保护作为前药的四价铂在到达细胞前不被还原.以磷酸钙纳米颗粒为基础建立了一种生物兼容性高、制备方法简单的四价铂前药运载体系.通过动态光散射、扫描电镜和X射线衍射对颗粒粒径和形貌进行了表征,并研究其细胞摄取效率和细胞毒性.实验结果表明,该纳米载药体系的粒径分布较窄、分散性较好、细胞摄取效率较高,并具有还原响应性,可在胞内还原剂的作用下释放出顺铂,显著提高了四价铂前药对肿瘤细胞的抑制作用.

超分子法制备包埋有机小分子的磷酸钙纳米粒

将有机功能小分子包埋于磷酸钙纳米粒里在纳米药物制备等技术中具有重要的意义,但大多数有机小分子在水中溶解度较差、结合磷酸钙的能力不强,从而增加了将其包埋在磷酸钙纳米粒里的难度。文章通过加入羧甲基-β-环糊精,使得与之结合的模型分子的溶解度与磷酸钙结合能力增强,从而解决了上述问题。结果表明亲水性的罗丹明B和疏水性的偶氮苯等模型分子能有效地包埋在磷酸钙纳米粒中。

吲哚菁绿- 磷酸钙纳米粒的制备与质量评价

目的研究吲哚菁绿-磷酸钙纳米粒(ICG-CaP/NPs)最佳制备工艺并评价其质量。方法采用共沉淀法制备ICG-CaP/NPs,以粒径、载药量和包封率为综合评价指标,通过响应面设计优化制备工艺,并以微观形态、粒径及其分布、Zeta电位、DSC、载药量和包封率、体外释放度为指标对按最优处方制备的ICG-CaP/NPs的进行质量评价。结果按最优处方制备的ICG-CaP/NPs的外观为球形或类球形,平均粒径(73.5±4.5)nm;Zeta电位(-41.0±1.8)mV;包封率和载药量分别为(64.94±1.31)%、(1.32±0.02)%;通过DSC检测,可确定ICG在纳米粒中以无定型状态存在;ICG-CaP/NPs在pH 5.5条件下的释放速率与对照品溶液释放趋势基本一致,累积释放量达59.21%,远高于pH 7.4条件下的释放速率。结论ICG-CaP/NPs制备工艺简单,粒径均匀,分散性良好,包封率较高,具有良好的pH敏感性和缓释效果。