阿霉素前药纳米粒/姜黄素联合递送系统的构建及其抗肿瘤研究

目的以酸敏感阿霉素前药纳米粒为基础,通过负载姜黄素构建联合递送系统,从而在提高抗肿瘤细胞增殖效果的同时降低由阿霉素引起的心肌细胞毒性。方法利用阿霉素(doxorubicin,DOX)的氨基与醛基化聚乙二醇(PEG-CHO)的醛基进行席夫碱反应得到PEG-DOX前药聚合物,通过疏水作用将疏水性抗肿瘤药物姜黄素(curcumin,Cur)负载到PEG-DOX的疏水内核中,最后通过纳米沉淀技术得到同时负载两种药物的前药纳米粒PEG-DOX/Cur NPs。通过核磁(1H-NMR)对PEG-DOX前药进行结构表征,利用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)对PEG-DOX/Cur NPs的粒径和形貌进行表征;利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)研究PEG-DOX/Cur NPs在酸性条件下的药物释放行为;利用MTT法研究PEG-DOX/Cur NPs的肿瘤细胞(H1975)增殖抑制效果以及评价PEG-DOX/Cur NPs对心肌细胞(H2C9)的毒性;通过H2C9细胞内的氧化自由基(ROS)水平检测(2',7'-二氯荧光素二乙酸盐法,DCFH-DA法)揭示PEG-DOX/Cur NPs对DOX心肌细胞毒性改善的机理。结果 PEG-DOX/Cur NPs为直径约90 nm的均一的球形结构,在酸性条件下能够同步释放DOX和Cur;MTT结果表明PEG-DOX/Cur NPs的H1975细胞增殖抑制效果优于DOX和PEG-DOX NPs(P<0.05),且PEG-DOX/Cur NPs对H2C9细胞的毒性明显低于DOX和PEG-DOX NPs(P<0.05);H2C9细胞ROS含量检测结果表明PEG-DOX/Cur NPs处理的心肌细胞具有最低的ROS水平(P<0.05),由此说明PEG-DOX/Cur NPs较低的心肌细胞毒性可能源于Cur引起的胞内ROS的降低所致。结论基于DOX前药纳米粒负载Cur构建联合递送系统在实现了理想的肿瘤细胞增殖抑制效果的同时,明显的降低了由DOX引起的心肌细胞毒性,实现了联合治疗的效益最大化。

共载阿霉素和siRNA的还原敏感型前药纳米粒的制备及体外评价

目的:构建共载阿霉素(DOX)和siRNA的还原敏感型前药纳米粒(PSCSD NPs),并对其理化性质、细胞摄取和体外细胞毒性进行考察。方法:采用核磁共振氢谱(^(1)H NMR)和傅里叶红外光谱(FT-IR)对羧甲基壳聚糖-二硫键-DOX(CMCSS-DOX)进行结构表征;超声法制备PSCSD NPs,考察其粒径、载药量、包封率、血清稳定性、溶血率和体外释药特性等;采用荧光显微镜和流式细胞术考察4T1细胞对PSCSD NPs的摄取;通过MTT实验测定PSCSD NPs的体外细胞毒性。结果:^(1)H NMR和FT-IR结果表明CMC-SS-DOX成功合成;PSCSD NPs的粒径为(155.1±4.0)nm(PDI=0.144±0.028),Zeta电位为(-29.9±1.0)mV,载药量为(8.25±0.47)%,包封率为(78.41±4.52)%;透射电镜观察PSCSD NPs为球形,且具有良好的血液相容性和血清稳定性。PSCSD NPs具有还原响应释药特性,可在肿瘤部位快速释药。细胞摄取和MTT实验结果表明PSCSD NPs可以有效共载DOX和siRNA进入肿瘤细胞内以发挥抗肿瘤作用。结论:该研究成功制备了PSCSD NPs,共载DOX和siRNA以实现化疗和免疫治疗协同增效。

海藻酸钠前药纳米粒在肿瘤光动力治疗中的应用研究

利用具有还原敏感性的胱胺将疏水性光敏剂脱镁叶绿酸盐A(Pheo A)偶联到天然多糖海藻酸钠(ALG)上,得到同时具有光敏性和还原敏感性的两亲性多糖前药(Pheo A-ALG),再通过疏水相互作用自组装形成前药纳米粒(Pheo A-ALG NPs),应用于肿瘤光动力治疗.对Pheo A-ALG NPs的理化性质进行了评价,体外考察Pheo A-ALG NPs的释药行为、细胞胞吞及胞内ROS,并重点研究了Pheo A-ALG NPs的体外细胞毒性以及体内抑瘤活性.

肿瘤氧化还原微环境响应型小分子前药纳米粒的代谢与药效研究进展

与正常组织、细胞的微环境相比,肿瘤微环境具有显著差异,如谷胱甘肽相关代谢酶和活性氧在不同亚细胞结构中高表达,造成氧化还原状态失衡。根据这种特异性的氧化还原状态,可以设计一系列通过氧化还原响应型连接臂相连的小分子前药纳米粒。常见的连接臂有二硫键、硫醚键、硒键和硫缩酮键等。不同连接臂的小分子前药纳米粒具有不同的代谢方式和体内外药效作用。本篇综述将从肿瘤细胞特异性氧化还原状态、智能响应型小分子前药纳米粒的设计、不同连接臂的小分子前药纳米粒的代谢方式及其与药效的关系等方面来总结肿瘤氧化还原微环境响应型小分子前药纳米系统的研究进展。