环孢素A纳米粒滴眼液制备及眼的刺激性

背景:环孢素A可有效抑制角膜移植后的免疫排斥反应,但因难溶于水,不能配制成水溶性制剂用于眼局部。目的:制备1%环孢素A纳米粒滴眼液,并观察其眼刺激性。方法:采用聚乙二醇-聚乳酸共聚物对环孢素A药物进行包裹,制备浓度为1%的环孢素A纳米粒滴眼液,以透射电镜、激光粒度仪对制备的纳米粒子进行表征;通过家兔单次、多次给药眼刺激性实验观察环孢素A纳米粒滴眼液的眼刺激性。结果与结论:环孢素A纳米粒滴眼液包封率为85.10%,载药量为21.3%;纳米粒子为球形粒子,分散均匀;载药纳米粒子粒径分布较窄,粒径大小为(296.9±32.06)nm;体外释放曲线显示,环孢素A从纳米粒子中缓慢释放,20d左右释放量达总环孢素的91.3%。环孢素A纳米粒滴眼液单次、多次给药期间,家兔双眼结膜、角膜、虹膜的眼刺激性反应分值和综合评分均为0,说明其对眼无刺激性。

0.05%环孢素A纳米粒滴眼液治疗干眼症的实验研究

目的观察0.05%环孢素A纳米粒滴眼液对干眼症的治疗效果。方法将新西兰兔24只随机分为4组,空白组、阴性对照组、0.05%环孢素A滴眼液组、0.05%环孢素A纳米粒滴眼液组,每组6只。利用东莨菪碱诱导干眼模型,造模成功后开始实验干预:阴性对照组不予处理;0.05%环孢素A滴眼液组及0.05%环孢素A纳米粒滴眼液组分别给与相应滴眼液,3次/天,共持续28天。在干预第1、2、3、4周分别进行Schirmer I(SIT)试验、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(CFS)检测。并于干预结束后光镜下观察结膜组织的病理学改变。结果与空白组相比,造模后各干预组泪液分泌量明显减少、泪膜破裂时间显著缩短(P<0.05)。与阴性对照组相比,干预后同时段0.05%环孢素A滴眼液组及0.05%环孢素A纳米粒滴眼液组泪液分泌量增加、泪膜破裂时间延长,干预第1周改善效果最为明显,且0.05%环孢素A纳米粒滴眼液组效果更为显著(P<0.05)。造模后结膜上皮结构紊乱,杯状细胞反应性增多、胞浆丰富,固有层炎性细胞浸润增多。0.05%环孢素A滴眼液组及0.05%环孢素A纳米粒滴眼液组干预4周后,结膜上皮形态排列结构趋于规则,杯状细胞数量减少、胞浆丰富,固有层炎性细胞浸润减少,且0.05%环孢素A纳米粒滴眼液干预效果更为显著。结论0.05%环孢素A纳米粒滴眼液能够有效改善干眼症状,且效果优于传统的0.05%环孢素A滴眼液。

环孢素A纳米粒滴眼液抗大鼠角膜移植术后排斥反应的实验研究

目的探讨环孢素A纳米粒滴眼液对大鼠同种异体角膜移植术后角膜排斥反应的抑制作用。设计实验研究。研究对象Lewis大鼠50只,F344大鼠25只。方法 Lewis大鼠作为穿透性角膜移植受体分5组各10只,A组为阴性对照组,给予环孢素A纳米粒滴眼液基质点眼,B组为普通环孢素滴眼液组,C、D、E组分别为0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组。F344大鼠为供体。术后各组滴用相应的滴眼剂,每日3次。术后14天内每日、14天后每2日拍摄角膜照片,观察至术后28天。术后14天取大鼠角膜组织行组织病理学检查。主要指标角膜植片存活时间、角膜排斥反应指数(RI)、角膜组织病理改变。结果 A、B、C、D、E组角膜植片存活时间分别为8.1±1.37天、12.5±4.72天、12.11±4.46天、13.11±4.65天和13.56±3.88天(F=2.916,P=0.032)。普通环孢素滴眼液组,0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组与基质组相比,差异具有统计学意义(P均<0.05)。普通环孢素滴眼液组与0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组相比,差异无统计学意义(P均>0.05)。A、B、C、D、E组RI分别为7.3±0.67、5.5±1.35、6.11±1.45、5.22±1.48和4.77±1.20(,F=5.782,P=0.001)。普通环孢素滴眼液组、0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组与基质组相比,RI有统计学意义(P均<0.05。普通环孢素滴眼液组与0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。2%环孢素A纳米粒滴眼液组与0.5%环孢素A纳米粒滴眼液组比较差异具有统计学意义(P=0.03)。结论环孢素A纳米粒滴眼液与普通环孢素滴眼液具有相似的抑制角膜移植术后排斥反应的作用,2%环孢素A纳米粒滴眼液组效果优于0.5%浓度组。

环孢素A纳米粒滴眼液抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的探讨环孢素A纳米粒滴眼液对大鼠高危角膜移植术后排斥反应的抑制作用。设计实验研究。研究对象Lewis大鼠50只为受体,F344大鼠25只为供体。方法 50只Lewis大鼠右眼采用缝线法诱导角膜新生血管形成,第7天新生血管到达角膜中周部时,全部行穿透性角膜移植术。因术后滴眼液不同将大鼠随机分为5组(A到E组,每组10只大鼠),A组为对照组,给予环孢素A纳米粒滴眼液的基质点药,B组为普通环孢素A滴眼液组,C组、D组、E组分别为0.5%、1%、2%环孢素A纳米粒滴眼液组。术后各组滴用相应的滴眼液,每日3次。拍摄大鼠角膜照片每日1次至14天,以后每2日拍摄角膜照片1次至28天。以角膜植片水肿、混浊、新生血管评分之和为角膜排斥反应指数(RI),记录角膜存活时间(从角膜移植开始到RI=6的时间),术后第14天每组取2只大鼠眼球,以光镜进行角膜病理学观察。主要指标角膜植片存活时间、角膜排斥反应指数(RI),角膜的病理学改变。结果 A到E组角膜存活时间分别为(7.20±2.93)天、(10.89±3.62)天、(10.50±3.40)天、(11.13±3.94)天和(12.80±4.07)天,各组间比较差异有统计学意义(F=3.20,P=0.022)。B、C、D、E组与A组相比,角膜存活时间明显延长,差异均有统计学意义(P=0.031、0.047、0.027、0.001)。B组与C、D、E组之间比较差异均无统计学意义(P=0.815、0.853、0.255),C组与D、E组之间差异均无统计学意义(P=0.716、0.161),D组与E组之间差异无统计学意义(P=0.333)。A到E组RI分别为7.80±1.48、5.67±1.80、6.10±1.66、5.25±1.75和4.80±1.23,组间比较差异具有统计学意义(F=5.202,P=0.002)。B、C、D、E组与A组相比,RI明显减小,差异有统计学意义(P=0.005、0.021、0.002、0.000)。B组与C、D、E组比较差异均无统计学意义(P=0.555、0.592、0.241)。C组与D、E组比较差异无统计学意义(P=0.265、0.074)。D组与E组之间差异无统计学意义(P=0.553)。A组角膜植片明显水肿、增厚,基质层可见大量细胞浸润,细胞排列紊乱。B^E组角膜基质层浸润程度较A组明显减轻。结论普通环孢素滴眼液组及高、中、低浓度的环孢素A纳米粒滴眼液均能有效地抑制高危角膜移植术后的排斥反应。