基于中心复合设计法优化虾青素纳米脂质载体制备工艺

为提高虾青素的生物利用度,增加其稳定性,采用均质乳化-探头超声法制备虾青素纳米脂质载体(AST-NLC)。以粒径和包封率为指标,通过单因素试验和中心复合设计法优化AST-NLC的制备工艺,并对制备的AST-NLC进行X射线衍射(XRD)和傅里叶红外光谱(FT-IR)结构表征,以及4、25、50℃下的热稳定性测试。结果表明:制备AST-NLC的最佳工艺条件为甘油三硬脂酸酯与中链甘油三酯质量比1∶11(总质量0.99 g)、乳化剂用量(吐温-80+大豆卵磷脂,质量比1∶1)3.8%(以水相质量为基准)、油水比1∶34(体积比)、均质速度5000 r/min、超声时间2 min、虾青素添加量2.0 mg,在此条件下制备的AST-NLC粒径为(79.30±1.21)nm,多分散系数(PDI)为0.01±0.01,包封率为(81.36±1.84)%,Zeta电位为(-18.13±2.83)mV;结构表征结果表明,AST-NLC中的虾青素是以分子的状态包裹在脂质体中;热稳定性结果显示,4℃更有利于ASTNLC的保存。综上,成功制备了粒径小、分散均匀且包封率较高的AST-NLC。

基于乳铁蛋白介导的阿霉素纳米脂质载体的构建

目的:建立乳铁蛋白介导的阿霉素纳米脂质载体的制备方法,并对其进行表征。方法:通过对制备条件、表面活性剂种类、脂质材料及有机溶剂等单因素考察,采用乳化-溶剂挥发法制备阿霉素纳米脂质载体;用碳化二亚胺偶联法,将乳铁蛋白连接到纳米脂质载体表面,制备载阿霉素-乳铁蛋白配体纳米脂质载体;对阿霉素纳米脂质载体及乳铁蛋白介导的阿霉素纳米脂质载体形态学特性通过透射电子显微镜(TEM)检测,并采用激光散射粒径测定仪测定其粒径分布、Zeta电位和PDI。结果:根据优化工艺制备出阿霉素纳米脂质载体,并成功将乳铁蛋白偶联至该纳米脂质载体表面;外观形态良好,分散性较好,粒度较为均匀;空白纳米脂质载体粒径在194 nm左右,载药后,粒径有所增大,但变化不明显,当载药的纳米脂质载体连接上乳铁蛋白后,粒径增大到241.0 nm。结论:从TEM形态学观察和粒径的变化上均能证明乳铁蛋白的成功连接,本研究成功制备了乳铁蛋白介导的阿霉素纳米脂质载体,有望成为载阿霉素的新型肺癌靶向制剂。

乳铁蛋白介导的肺靶向纳米脂质载体的研究进展

纳米脂质载体属纳米给药体系,是在固体脂质纳米粒基础上发展起来的新型靶向给药系统,以生物相容性好的固态和液态脂质混合作为载体材料,将药物包裹于类脂核中,具有胶体载体如脂质体和纳米乳的优势,可用作抗肿瘤药物的靶向载体,同时,相比而言,纳米脂质载体雾化稳定性更好,在气道中具有良好的耐受性和理想的肺沉积率,适用于雾化吸入给药,该给药方式可使药物直达病灶,雾滴长时间滞留在肿瘤部位,发挥长效作用。为进一步提高药物的生物利用度、增强肺癌靶向性,可用乳铁蛋白对纳米脂质载体进行表面修饰。乳铁蛋白属转铁蛋白家族,正常肺组织中转铁蛋白受体呈阴性或低表达,而在非小细胞肺癌中转铁蛋白的阳性表达率远远高于正常肺组织,存在过度表达现象,可利用乳铁蛋白作为配体修饰纳米脂质载体,通过转铁蛋白介导的方式增加药物在肺癌细胞内的富集,受体介导的内吞可以进一步促进负载药物的纳米脂质载体的细胞摄取。

聚乙二醇修饰的羟基喜树碱纳米脂质载体的制备及其小鼠组织分布

本研究采用熔融乳化-高压均质法制备了聚乙二醇(PEG)修饰的羟基喜树碱(HCPT)纳米脂质载体(HCPT-PEG-NLC)及非修饰的羟基喜树碱纳米脂质载体(HCPT-NLC),并考察了其形态、粒径及包封率。测定了HCPT注射液、HCPT-PEG-NLC及HCPT-NLC 3种制剂经小鼠尾静脉注射后在血浆、心、肝、脾、肺、肾及卵巢等主要组织的浓度,评价了HCPT-PEG-NLC及HCPT-NLC在各组织的靶向性效果。透射电镜下观察,HCPT-PEG-NLC及HCPT-NLC呈球形;测得平均粒径分别为(88.6±22.5)和(127.2±43.4)nm;包封率分别为(90.51±3.29)%和(84.37±2.81)%。经小鼠尾静脉注射后,HCPT-PEG-NLC及HCPT-NLC在多数取样时间点的血药浓度较HCPT注射液有所提高,HCPT在各组织中的消除半衰期明显延长。HCPT-NLC蓄集于网状内皮系统(RES),在肝、脾的相对摄取率(Re)和峰浓度比(Ce)明显高于HCPT-PEG-NLC。HCPT-PEG-NLC延长了药物在血浆中的滞留时间,提高了生物利用度,MRT及AUC0-24 h分别为注射液的19.80和17.02倍,并且与HCPT-NLC比较显著降低了RES的吞噬作用,在肺部表现出明显的靶向作用(Re及Ce分别为14.51,41.35)。综上,HCPT-PEG-NLC可延长HCPT的体内循环时间,呈现明显的肺靶向性,有望作为HCPT肺癌治疗的理想载体。

莪术油纳米脂质载体给药系统的制备及其评价

目的研制莪术油纳米脂质载体系统。方法采用熔融超声-低温固化法制备莪术油纳米质脂载体系统,考察载药纳米粒的形态、粒径、Zeta电位等理化性质;用HPLC测定药物的包封率及体外释放特性;采用肝内隧道植入法,在小鼠H-22移植瘤模型上观察两种莪术油制剂的体内抑瘤活性。结果制得的纳米粒在透射电镜下均呈圆球形,平均粒径为(82·26±3·63)nm,Zeta电位为-(23·53±1·29)mV,制剂中吉玛酮的质量浓度为(0·972±0·021)g·L-1,包封率为(94·95±1·87)%。结论熔融超声-低温固化法应用于莪术油等挥发油类药物纳米分散给药系统的制备是可行的,对小鼠体内H-22肉瘤株有显著的抑制效果。

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察

目的:纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统,具有较高的载药量和物理稳定性。探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒(podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier,PPT-NLC)的制备方法及理化性质。方法:实验于2006-08/2007-10在南方医科大学药学部实验室完成。选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸,采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC,用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒(Solid lipid nanoparticles,SLN)纳米粒混悬液。用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT-NLC理化性质,并比较SLN与NLC的包封率和稳定性。结果:透射电镜下PPT-NLC外形呈圆形或椭圆形,平均粒径为(88.2±8.4)nm,多分散指数为0.190±0.085,Zeta电位为(-33.2±3.1)mV,包封率为86.6%。PPT-SLN分别为(75.3±16.2)nm,0.300±0.072,(-25.2±3.4)mV,包封率为76.5%。结论:PPT-NLC制备工艺简单,分布均匀,稳定性较SLN好,包封率高。

姜黄素纳米脂质载体的制备及大鼠体内药代动力学

采用熔融-乳化法制备姜黄素(Cur)纳米脂质载体(Cur-NLC),并考察其形态、粒径、Zeta电位、包封率和载药量等理化性质,同时以透析法研究制剂的体外释药特性。测定Cur-NLC和Cur原料的混悬液经大鼠灌胃后的体内药代动力学行为,并通过DAS2.0软件计算药代动力学参数。结果显示,透射电镜观察Cur-NLC呈较规则类球体,平均粒径为(187.5±4.67)nm,Zeta电位为(-23.65±2.86)mV,包封率、载药量分别为(98.33±0.40)%和(4.59±0.19)%;Cur-NLC和Cur混悬液体外释药行为分别符合一级方程和Peppas方程,Cur-NLC在HCl(pH 1)和PBS(pH 6.8)中的36 h累积释放量分别为24.3%和19.2%,Cur混悬液的36 h累积释放量分别为90.2%和84.2%,说明Cur担载于纳米脂质体后具有明显的缓释特性。经大鼠灌胃后,Cur-NLC和Cur混悬液的AUC0-∞分别为(621.14±179.92)ng.h/mL和(32.49±3.55)ng.h/mL,cmax分别为(92.81±38.52)ng/mL和(5.39±0.13)ng/mL,Cur-NLC的AUC0-∞和cmax分别提高了19.12倍和17.22倍。因此,Cur-NLC对Cur起到很好的保护作用,避免了药物的渗漏,载药量和包封率均较高,能显著增强Cur在胃肠道的吸收,提高Cur的口服生物利用度。

羟基喜树碱纳米脂质载体的制备及体外释放

采用“熔融乳化-高压均质法”制备以PEG40硬脂酸酯、PEG100硬脂酸酯修饰的纳米脂质载体PEG40-NLC和PEG100-NLC,并考察释放装置、NLC中脂质材料用量及释放介质流速对体外释放的影响。结果表明,PEG40-NLC和PEG100-NLC在桨-反向动态透析法和流通池-动态透析法中的释放曲线相似,而在转篮-动态透析法中的释放曲线与前二种装置的释放曲线均有显著性差异。随着NLC脂质材料用量增大,释放过程中药物扩散作用增强。对流通池法,释放介质流速增大,药物的释放加快。

多西他赛纳米脂质载体的制备及其性质考察

目的制备多西他赛纳米脂质载体,并考察其剂型性质及体外释药行为。方法采用薄膜超声法制备多西他赛纳米脂质载体,使用透射电镜观察粒子外观形态,光子相关光谱法测定其粒径和分布,微柱离心法测包封率,透析法测体外释药特性。结果在优化条件下制备的纳米级粒子粒径为(124±16)nm,Zeta电位为-19.57 mV,包封率为95.8%。体外释放符合Weibull释放模型。结论制备的多西他赛纳米脂质载体粒径小,药物包封率高,并可实现药物控释。

内质网应激途径在鬼臼毒素纳米脂质载体诱导VK2/E6E7细胞凋亡的机制

目的探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC,实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组,分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测各组细胞内Ca2+浓度的变化;RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比,不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度(P<0.01),各药物处理组之间比较有统计学差异(P<0.05)。PODNLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。

鬼臼毒素纳米脂质载体的靶向分布

目的观察西藏小型猪宫颈外用鬼臼毒素(POD)纳米脂质载体(POD-NLC)后POD黏膜分布情况和系统毒性作用。方法应用随机数字表将西藏小型猪分为实验组和对照组,实验组宫颈涂0.5%POD-NLC,对照组涂0.5%POD酊剂。观察24 h不同时间宫颈黏膜刺激性、POD荧光强度及血中鬼臼毒素含量。结果实验组用药后未发现局部刺激,对照组出现红肿,水疱、血疱、糜烂、破溃等严重局部刺激反应;药物分布显示对照组在涂药4 h后黏膜组织中荧光值达到最高;实验组POD荧光值上升较慢,在16 h达最大值。实验组用药6 h后POD的血药浓度达峰值(14.28±0.33 ng/m L),对照组用药4 h后即达峰值(42.46±0.32 ng/m L),在所有测试时间点,实验组的血药浓度均低于对照组(P<0.05)。对照组的浓度曲线下面积是实验组的1.38倍。结论 POD-NLC具有缓释性、在黏膜较长时间蓄积,动物实验显示无局部刺激性且系统吸收低。

美洛昔康纳米脂质载体的制备及表征

目的制备美洛昔康纳米脂质载体(MX-NLC)胶体溶液及冻干粉,并对二者理化性质和体外释放行为进行考察。方法应用高压均质法制备MX-NLC胶体溶液,并对其冷冻干燥。以外观、含量、包封率、粒径、zeta电位、释放度为评价指标,考察MX-NLC胶体溶液及冻干粉的理化性质。结果冻干前后的平均含量质量分数为99.8%和98.5%,平均包封率为73.6%和72.5%;MX-NLC冻干前后的粒径分别为137 nm和154 nm,zeta电位分别为-28.4 mV和-25.2 mV。体外释放结果表明,MX-NLC具有明显的缓释效果。结论通过高压均质法和冷冻干燥技术可以得到美洛昔康纳米脂质载体。所制得MX-NLC粒径在100～200 nm内,具有明显的缓释特征,有可能实现静脉注射给药并具备被动靶向特征。

阿德福韦酯纳米脂质载体的制备及处方优化

目的:制备阿德福韦酯纳米脂质载体(ADV-NLC),并优化其处方。方法:以硬脂酸和单硬脂酸甘油酯为固体脂质,油酸为液体脂质,双子(Gemini)表面活性剂、聚山梨酯80为乳化剂,十二烷基硫酸钠(SDS)为稳定剂,采用溶剂分散-超声法制备ADV-NLC。以粒径、多分散指数、Zeta电位和包封率为指标,单因素试验筛选Gemini表面活性剂-聚山梨酯80比例、乳化剂用量(乳化剂与水相之比)、药脂比、固-液脂质比。结果:处方为乳化剂(双子表面活性剂-聚山梨酯80比例1∶2)用量3%、药脂比4.5%,固-液脂质比6∶5。所制ADV-NLC的平均粒径为(48.83±2.65)nm,多分散指数<0.3,Zeta电位为(-28.7±1.8)m V,包封率为(77.65±0.03)%(n=3)。结论:成功制得ADV-NLC,且处方合理、可行。

新型纳米脂质载体给药系统的研究进展

纳米脂质载体（nanostructured lipid carriers,NLC）是20世纪90年代末出现的一种新型给药系统[1].纳米脂质载体是以具有生理相容性和生物可降解性的、高熔点的天然或合成固体脂质和液体脂质为骨架材料所制成的纳米尺度的载药系统,其特点在于在固体的脂质载体中引入了液体脂质,以期解决固态脂质纳米粒（SLN）载药量较低,有突释现象及纳米粒混悬体系的水分含量高的缺点[2].

RGD修饰的葫芦素B纳米脂质载体对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用

目的:制备RGD修饰的葫芦素B纳米结构脂质载体(RGD-CuB-NLC),观察RGD-CUBNLC对乳腺癌细胞的体外抑制作用和对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法:采用薄膜分散法制备得RGD-CuB-NLC,按照贴壁细胞的培养方法,制成MCF-7乳腺癌单细胞混悬液,接种于96孔培养板,建立RGD-CuB-NLC组,CuB-NLC、RGD-NLC为对照组,另设NLC空白组,计算不同条件的抑制率。建立裸小鼠移植瘤,将合格的30只移植瘤裸小鼠随机分成五组,每组6只。分别尾静脉注射CuB注射液,CuB-NLC,RGD-NLC,RGD-CuB-NLC和0.9%氯化钠溶液,每间隔24 h给药1次,共7次,记录鼠重、瘤体质量并计算抑瘤率。结果:RGD-CuB-NLC:形态为圆形,包封率>80%,粒径<150 nm,平均为(115.6±2.1)nm,多分散系数为(0.217±0.033),电位为(-12.31±0.76)mV。不同脂质体对乳腺癌细胞体外抑制率分别为:NLC组为0,CuB-NLC组为(46.3±2.21)%,RGD-NLC组为(55.7±3.22)%,RGD-CuB-NLC组为(75.6±5.67)%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。0.9%氯化钠溶液组、CuB组、CuB-NLC组、RGD-NLC组与RGD-CuB-NLC组抑瘤率比较差异均有统计学意义(P<0.05);CuB组、CuB-NLC组、RGD-NLC组、RGD-CuB-NLC组与0.9%氯化钠溶液组抑瘤率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:RGD修饰的葫芦素B纳米结构脂质载体能够抑制乳腺癌细胞的增值和肿瘤的生长。

UPLC-MS/MS法考察多西他赛纳米脂质载体的大鼠体内药代动力学研究

目的以多西他赛注射液为参比制剂,研究多西他赛纳米脂质载体在大鼠体内的药代动力学。方法采用平行对照试验法,12只大鼠随机分成2组,每组6只,分别静脉注射多西他赛纳米脂质载体和多西他赛注射液10 mg/kg,建立UPLC-MS/MS法测定血浆中不同时间多西他赛的浓度,并计算药代动力学参数。结果大鼠静脉注射多西他赛纳米脂质载体和多西他赛注射液后,t_(1/2)分别为(3.12±0.66)、(2.22±0.51)h,C_(max)为(21 731.57±2 751.01)、(7 062.30±681.62)ng/m L,Vss为(4.92±1.75)、(9.34±2.36)L/kg,CL为(1.07±0.20)、(2.91±0.39)L/(h·kg),AUC_(0-t)为(9 591.32±1 855.55)、(3 448.45±495.88)ng·h/m L,AUC_(0-∞)为(9 647.89±1 845.93)、(3 488.34±492.14)ng·h/m L,各项药动学参数比较差异均有统计学意义。结论本方法简单快速,准确可靠,与多西他赛注射液比较,多西他赛纳米脂质载体具有一定的缓释和长循环特征。

0.5%鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及理化性质考察

目的:纳米脂质载体(nanostructured lipid carrier,NLC)具有较高的载药量和物理稳定性。为提高鬼臼毒素(podophyllotoxin,POD)的治疗效果,降低毒副作用,本研究探讨了POD浓度为5 g/L(0.5%)的POD-NLC的制备方法及理化性质。方法:POD-NLC的制备采用乳化蒸发-低温固化法,设计正交实验优化POD-NLC的制备工艺及配方,用透射电镜、粒径仪、高效液相色谱法、pH计考察POD-NLC理化性质。结果:POD-NLC基本呈球状或椭球形,平均粒径(180±20)nm,多分散指数为0.165,pH值为6.20±0.04,包封率为(82.9±2)%。结论:成功制得了POD浓度为5 g/L(0.5%)的POD-NLC,其制备工艺简单,粒径分布较均匀,包封率高,稳定性较好。

HPLC法测去甲氧基姜黄素纳米脂质载体中药物的含量

目的:建立HPLC法测去甲氧基姜黄素纳米粒脂质载体(NLC)中药物含量的方法。方法:采用HPLC法测定纳米脂质载体(NLC)中药物的含量。结果表明去甲氧基姜黄素在420nm处有最大吸收,浓度在2.04至52.5mg·mL-1时与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为:Y=121.29C X-296.19,r=0.9997(n=6);平均回收率为99.19%,RSD为0.79%。结论:本方法操作简单,且稳定性、准确度和精密度均符合要求,可用于NLC制剂中去甲氧基姜黄素含量的测定。

齐墩果酸纳米脂质载体的制备及性质表征

目的:研制齐墩果酸纳米脂质载体,考察其制备的影响因素,优化处方工艺,并对其特性进行表征。方法:采用超声乳化-溶剂挥发法制备齐墩果酸纳米脂质载体(Oleanolicacid-loaded nanostructured lipid carrier,OA-NLC),以包封率、粒径和Zeta电位为指标参数,考察载体材料固态脂质与液态脂质、液态脂质比例、表面活性剂及药脂比对其制备的影响,设计正交试验优化处方。并评价其理化性质及稳定性。结果:以油酸含量10%,外水相体积200mL,泊洛沙姆188浓度0.1%,药脂比为1∶10制备的OA-NLC具有最佳包封率为(67.76±3.56)%、平均粒径(175.6±6.4)nm,多分散系数(PDI)0.194和Zeta电位(-20.76±1.37)mV;其外观呈规则的圆形或椭圆形;稳定性试验表明,在30天内包封率、粒径及Zeta电位无明显变化。结论:采用超声乳化-溶剂挥发法制备的OA-NLC具有良好的理化特性及稳定性。

奥卡西平纳米脂质载体包封率的测定

建立奥卡西平纳米脂质载体包封率的测定方法。采用葡聚糖凝胶柱层析法和高速冷冻离心法分离奥卡西平纳米脂质载体中的游离药物,以高效液相色谱法测定其含量,计算包封率。色谱条件为采用Agilent ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(含质量分数0.2%的三乙胺,用磷酸调节pH=4.5)-乙腈-甲醇(体积比为15∶45∶40),流速1.2mL/min,柱温50℃,检测波长254nm,进样量20μL。奥卡西平峰与杂质峰的分离度良好,ρ(奥卡西平)在0.16~41.6μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8)。2种方法测得奥卡西平纳米脂质载体的包封率均在95%以上。该方法经方法学验证,可用于奥卡西平纳米脂质载体中药物包封率的测定。