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同时检测贝类派琴虫和包纳米虫的双重LAMP方法的建立 被引量:13
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作者 王彩霞 冯春燕 +4 位作者 王巧黎 袁向芬 邓俊花 吕继洲 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期1935-1942,共8页
为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18SrRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同... 为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18SrRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同时还进行了特异性检测和敏感性检测,并通过对扩增产物进行限制性内切酶酶切检验双重LAMP方法的准确性。结果表明本研究建立的贝类寄生虫双重LAMP方法具有较好的特异性,检测派琴虫时的最低检测限为10拷贝/μL质粒DNA,检测包纳米虫时的最低检测限为100拷贝/μL质粒DNA,同时酶切试验也验证了双重LAMP检测结果的准确性。对随机采自东海和黄海的20份菲律宾蛤仔和10份美国进口牡蛎的检测结果显示,该双重LAMP方法在口岸检疫工作中可以作为派琴虫和包纳米虫的快速检测方法。 展开更多
关键词 贝类寄生 环介导等温扩增反应(LAMP) 检测 派琴 纳米虫
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贝类包纳米虫病焦磷酸测序检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 王彩霞 吴绍强 +3 位作者 林祥梅 王素华 冯春燕 徐赓 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期53-58,共6页
以焦磷酸测序技术为检测平台,在研究包纳米虫基因特性的基础上,选择包纳米虫(Bonamiaspp.)DNA序列的保守区域,利用焦磷酸测序软件设计专用引物。以OIE推荐的PCR方法构建的阳性质粒作为模板,建立了包纳米虫的PCR-焦磷酸测序检测方法,确... 以焦磷酸测序技术为检测平台,在研究包纳米虫基因特性的基础上,选择包纳米虫(Bonamiaspp.)DNA序列的保守区域,利用焦磷酸测序软件设计专用引物。以OIE推荐的PCR方法构建的阳性质粒作为模板,建立了包纳米虫的PCR-焦磷酸测序检测方法,确定测得序列为包纳米虫序列,经酶切位点分析可鉴别感染种类。以建立的包纳米虫PCR-焦磷酸测序方法对进口牡蛎(Ostrea gigas thunberg)样品进行检测,同时以OIE推荐的PCR-RFLP方法进行对照检测,检测结果表明,本研究建立的PCR-焦磷酸测序检测方法可以在基因序列水平上准确鉴定样品是否为包纳米虫感染以及感染种类,检测结果与OIE推荐方法的检测结果一致。研究结果表明,本研究建立的检测方法可应用于口岸包纳米虫感染情况的检测鉴定。 展开更多
关键词 牡蛎 纳米虫 聚合酶链式反应 焦磷酸测序 检测 鉴定
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同时检测海洋贝类包纳米虫和派琴虫的双重TaqMan MGB探针实时荧光PCR方法 被引量:1
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作者 郭书林 陈信忠 +3 位作者 肖懿哲 朱苏琴 龚艳清 杨俊萍 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 2014年第2期284-289,共6页
根据包纳米虫(Bonamia sp.)SSU rDNA和派琴虫(Perkinsus sp.)ITS rDNA的保守区序列,设计特异性引物和Taqman MGB探针,建立了同时检测上述两种贝类原虫的双重实时荧光PCR方法.该方法可检测到包纳米虫基因的446拷贝质粒,以及派琴虫基因的... 根据包纳米虫(Bonamia sp.)SSU rDNA和派琴虫(Perkinsus sp.)ITS rDNA的保守区序列,设计特异性引物和Taqman MGB探针,建立了同时检测上述两种贝类原虫的双重实时荧光PCR方法.该方法可检测到包纳米虫基因的446拷贝质粒,以及派琴虫基因的171拷贝质粒,具有较高的灵敏度.以10倍系列稀释的包纳米虫阳性标准品质粒和派琴虫阳性标准品质粒为模板,测得该方法的定量标准曲线相关系数分别为0.999和1.000,显示出很好的扩增效率.同时该方法与尼氏单孢子虫(Haplosporidium nelsoni)、沿岸单孢子虫(H.costale)等其他贝类原虫,以及副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)等海水养殖常见致病菌之间无交叉反应,表现出较高的特异性.福建莆田的湄州湾、平海湾、兴化湾等地采集的296份贝类临床样本的检测证明,该方法是一种有效的快速检测鉴定上述2种贝类原虫的方法,具有良好的灵敏度和特异性,可广泛应用于海洋贝类原虫感染情况调查,以及贝类疫病检疫监控等领域. 展开更多
关键词 海洋生物学 纳米虫 派琴 TAQMAN MGB探针 双重实时荧光PCR
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牡蛎包纳米虫体外培养及鉴定
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作者 王飞 冯春燕 +1 位作者 杨莲茹 吴绍强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期189-191,共3页
近几十年来,牡蛎包纳米虫病在欧洲等地频发,引起牡蛎大范围的死亡,对牡蛎养殖业危害极大。目前包纳米虫的研究处于初级阶段,病原的体外培养技术是深入研究包纳米虫的致病机理、与宿主的相互作用及疫病防控的基础。本研究以经PCR初步鉴... 近几十年来,牡蛎包纳米虫病在欧洲等地频发,引起牡蛎大范围的死亡,对牡蛎养殖业危害极大。目前包纳米虫的研究处于初级阶段,病原的体外培养技术是深入研究包纳米虫的致病机理、与宿主的相互作用及疫病防控的基础。本研究以经PCR初步鉴定阳性的牡蛎全组织作为培养基,体外培养1个月后,采用原位杂交方法再次鉴定牡蛎包纳米虫。2次鉴定结果一致,且在包纳米虫培养1个月之后,虫体均能被原位杂交方法检测到。研究结果表明,本研究成功建立了一种简单可行的牡蛎包纳米虫培养方法。 展开更多
关键词 纳米虫 牡蛎 体外培养 鉴定 原位杂交
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纳米虫螨腈和甲氧·茚虫威防治草地贪夜蛾的田间药效试验 被引量:2
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作者 孙明明 《湖北植保》 2020年第2期19-20,共2页
作者开展了纳米虫螨腈和甲氧·茚虫威两种药剂对晚播夏玉米田草地贪夜蛾的药效试验,结果显示,40%甲氧·茚虫威悬浮剂20mL/667m^2、10%纳米虫螨腈悬浮剂40mL/667m^2对草地贪夜蛾的防效在施药10d后可以分别达到97.2%和98.9%,有较... 作者开展了纳米虫螨腈和甲氧·茚虫威两种药剂对晚播夏玉米田草地贪夜蛾的药效试验,结果显示,40%甲氧·茚虫威悬浮剂20mL/667m^2、10%纳米虫螨腈悬浮剂40mL/667m^2对草地贪夜蛾的防效在施药10d后可以分别达到97.2%和98.9%,有较好的速效性和持效性。推荐1龄~2龄幼虫期防治,施药时间选择在傍晚和清晨,加足水量,喷匀打透,对准心叶重点喷雾。建议针对重点为害区域,用人工进行二次点杀点治。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 甲氧·茚 纳米虫螨腈 玉米
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以脲醛树脂为载体的农药茚虫威纳米制剂研究 被引量:1
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作者 熊齐鹏 陈勇 +1 位作者 王琳琳 黄燕敏 《南宁师范大学学报(自然科学版)》 2023年第1期141-147,共7页
通过高速乳化和超声分散的技术,以脲醛树脂(UF)为载体,氯化铵为催化剂,包封农药茚虫威(IN),制备得到一种茚虫威-脲醛树脂纳米制剂(IN-UF)。通过红外光谱、粒径、叶面接触角、存储稳定性和透射电镜分析对纳米制剂进行了结构和形态表征。... 通过高速乳化和超声分散的技术,以脲醛树脂(UF)为载体,氯化铵为催化剂,包封农药茚虫威(IN),制备得到一种茚虫威-脲醛树脂纳米制剂(IN-UF)。通过红外光谱、粒径、叶面接触角、存储稳定性和透射电镜分析对纳米制剂进行了结构和形态表征。进一步分析了IN-UF纳米制剂的抗光解能力和在50%甲醇水中的释放能力,结果表明IN-UF纳米制剂比对照普通茚虫威悬浮剂(IN-SC)具有更好的抗光解能力和缓慢释放能力。最后,以斜纹夜蛾作为测试靶标,对IN-SC纳米制剂进行杀虫毒性和杀虫持效性测定,结果表明IN-UF纳米制剂在保持IN杀虫毒性的同时,比普通IN-SC制剂具有更好的杀虫持效性。 展开更多
关键词 纳米制剂 脲醛树脂 威脲醛树脂纳米制剂 活性
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潜在外来入侵动物疫病——包纳米虫病
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作者 王素华 吴绍强 +1 位作者 余招峰 吴淑英 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 北大核心 2017年第5期123-125,共3页
随着国内养殖业的迅猛发展,进口的水生动物种苗数量不断增加。人们生活和消费水平的提高,促进了贝类等水生动物及其产品进出境数量与批次逐年增多,外来动物疫病传入我国的风险与日俱增[1]。外来入侵动物疫病能对我国经济和农牧渔业造成... 随着国内养殖业的迅猛发展,进口的水生动物种苗数量不断增加。人们生活和消费水平的提高,促进了贝类等水生动物及其产品进出境数量与批次逐年增多,外来动物疫病传入我国的风险与日俱增[1]。外来入侵动物疫病能对我国经济和农牧渔业造成巨大的影响,主要包括:1)严重威胁我国畜牧业生产及公共卫生安全;2)对外来入侵动物疫病的根除和防治非常困难,投入巨大,收效甚微; 展开更多
关键词 外来入侵 纳米虫 畜牧业生产 消费水平 公共卫生安全 牡蛎科 隔离检疫 ostrea 认可委员会 卫生法典
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仿纳米布沙漠甲壳虫的绿色环保型水收集材料 被引量:2
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作者 陶先露 杨玉明 +2 位作者 黎明 彭姣 金士威 《武汉工程大学学报》 CAS 2022年第2期174-179,共6页
受纳米布沙漠甲壳虫水收集机制的启发,开发超亲水-超疏水相间的图案化绿色环保型仿生水收集材料。以大自然中的荷叶为Cassie超疏水基底,利用有机溶剂环己烷溶液预润湿超疏水荷叶的方法,将二氧化钛纳米颗粒和良性胶的混合物黏附在其表面... 受纳米布沙漠甲壳虫水收集机制的启发,开发超亲水-超疏水相间的图案化绿色环保型仿生水收集材料。以大自然中的荷叶为Cassie超疏水基底,利用有机溶剂环己烷溶液预润湿超疏水荷叶的方法,将二氧化钛纳米颗粒和良性胶的混合物黏附在其表面上构建超亲水位点。研究了超亲水位点的数量对水收集效率的影响及最佳水收集效率,并具体分析了水雾收集过程。结果表明:当样品的超亲水面积占比为4.2%(9个超亲水位点),此仿生水收集材料具有最佳的水收集效率为(28.02±0.1)mg·min^(-1)·cm^(-2)。该方法成功制备绿色环保型仿生水收集材料,为解决全球水资源短缺问题提供了新的思路,有望大范围应用于现实生产中。 展开更多
关键词 纳米布沙漠甲壳 预润湿 环保 荷叶 水收集 材料
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纳米科技的神奇畅想
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作者 张轩硕 《科技风》 2019年第4期244-244,共1页
纳米技术已经取得了举世瞩目的成绩,在21世纪充满了活力,如今纳米技术已经渗透到各个领域,并且影响着人们的生活方式,本文主要介绍它的应用前景。
关键词 纳米科技 纳米虫 纳米 纳米污染物
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Highly Sensitive Silver Nanorod Arrays for Rapid Surface Enhanced Raman Scattering Detection of Acetamiprid Pesticides 被引量:1
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作者 Cai-qin Han Yue Yao +10 位作者 Wen Wang Liu-qian Tao Wen-xin Zhang Whitney Marvella Ingram Kang-zhen Tian Ying Liu Ai-xia Lu Ying Wu Chang-chun Yan Lu-Lu Qu Hai-tao Li 《Chinese Journal of Chemical Physics》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期152-158,245,共8页
The determination of pesticide residue on agricultural products is increasingly important. Exposure to pesticides can cause severe acute reactions in humans, including aplastic anemia and leukemia. In this work, we de... The determination of pesticide residue on agricultural products is increasingly important. Exposure to pesticides can cause severe acute reactions in humans, including aplastic anemia and leukemia. In this work, we developed a rapid and sensitive method to detect acetamiprid pesticide residue based on surface-enhanced Raman scattering. Silver nanorod (AgNR) arrays were fabricated by oblique angle deposition technology and were used as SERS substrates. Prior to detection, the AgNR arrays were cleaned with nitric acid solution or a mixture of methanol and acetone. Compared to the unwashed AgNR arrays, the AgNR arrays washed with methanol and acetone shows a signal enhancement 1000 times greater than the unwashed AgNR array due to the effective removal of the impurities on its surface. The limit of detection of acetamiprid was determined to be 0.05 mg/L. In addition, the molecular structure of acetamiprid was simulated and the corresponding vibration modes of the characteristic bands of acetamiprid were calculated by density function theory. To demonstrate its practical application, the AgNRs array substrates were applied successfully to the rapid identification of acetamiprid residue on a cucumber's surface. These results confirmed possibility of utilizing the AgNRs SERS substrates as a new method for highly sensitive pesticide residue detection. 展开更多
关键词 Surface-enhanced Rarnan spectroscopy Acetarniprid Silver nanorod array Substrate cleaning
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Light and temperature dual responsive pesticide release system based on mesoporous silica nanoparticles modified by dopamine
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作者 XUWen-shuang YANG Zhou-xiao-shuang +1 位作者 ZHANG Guang-yang LIU Hui 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2022年第2期397-409,共13页
A light and temperature dual responsive copolymer,poly(7-(4-vinylbenzy-loxyl)-4-methylcoumarin-co-N vinyl caprolactam-co-tri(ethylene glycol)methyl ether methacrylate)(PVNM),was grafted on the surface of dopamine base... A light and temperature dual responsive copolymer,poly(7-(4-vinylbenzy-loxyl)-4-methylcoumarin-co-N vinyl caprolactam-co-tri(ethylene glycol)methyl ether methacrylate)(PVNM),was grafted on the surface of dopamine based mesoporous silica nanoparticles(MSNs).The resulting polymer brush,MSNs-g-PVNM,was characterized by FT-IR,TEM,TGA and XPS.The dual responsive behaviors of MSNs-g-PVNM were systematically studied.With imidacloprid as the model guest pesticide,the loading percentage and loading efficiency of the polymer brush were determined as 9.2%and 40.6%,respectively.The release efficiency of imidacloprid in MSNs-g-PVNM was the lowest value of 5.4%at 20℃ and 365 nm,and it reached the highest value of 52.4%at 50℃ and 254 nm.The loss percentage of imidacloprid on the leaves contained imidacloprid-loaded MSNs-g-PVNM(8.4%)was much less than that contained only imidacloprid(25.2%)after three rinses.It was confirmed that the release process of imidacloprid was well regulated through changing external conditions such as light and temperature. 展开更多
关键词 N-VINYLCAPROLACTAM controlled release system STIMULI-RESPONSIVE mesoporous silica nanoparticles IMIDACLOPRID
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Triple lines gold nanoparticle-based lateral flow assay for enhanced and simultaneous detection of Leishmania DNA and endogenous control 被引量:3
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作者 Lourdes Rivas Alfredo de la Escosura-Muniz +4 位作者 Lorena Serrano Laura Altet Olga Francino ArmandSanchez Arben Merkoci 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第11期3704-3714,共11页
A novel triple lines lateral-flow assay (LFA) with enhanced sensitivity for the detection of Leishmania infantum DNA in dog blood samples was designed and successfully applied. The enhanced LFA methodology takes adv... A novel triple lines lateral-flow assay (LFA) with enhanced sensitivity for the detection of Leishmania infantum DNA in dog blood samples was designed and successfully applied. The enhanced LFA methodology takes advantage of the gold nanoparticle tags (AuNPs) conjugated to polyclonal secondary antibodies, which recognize anti-FITC antibodies. The polyclonal nature of the secondary antibodies allows for multiple binding to primary antibodies, leading to enhanced AuNP plasmonics signal. Furthermore, endogenous control consisting of the amplified dog 18S rRNA gene was introduced to avoid false negatives. Using this strategy, 0.038 spiked Leishmania parasites per DNA amplification reaction (1 parasite/100 μL of DNA sample) were detected. Detection limit of LFA was found to be lower than that of the conventional techniques. In summary, our novel LFA design is a universal and simple sensing altemative that can be extended to several other biosensing scenarios. 展开更多
关键词 lateral-flow assay gold nanoparficles secondary antibodies Leishmania DNA endogenous control
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