“氨基酸纸层析分离方法”实验教学设计

讨论了"氨基酸纸层析分离方法"实验教学的改革问题,调整实验步骤以节约教学时间;增加实验内容以增强实验的研究性、定量分析的可靠性;设置不同的药品成分,通过实验教学培养学生认真、诚实的科学研究精神。

近红外光谱和纸层析法分析单粒油菜籽脂肪酸的研究

油菜脂肪酸组分含量的高低受胚基因型控制,而不受母本基因型控制,因此对性状优良的油菜育种材料进行早期低芥酸的单粒选择意义深远。我们通过试剂及试剂浓度等的优化研究,建立了高效实用的分析半粒油菜籽芥酸的纸层析技术。研究表明,单粒油菜籽芥酸与油酸+亚油酸的相关系数高达-0．9693,选择低芥单粒油菜可以达到同时科学有效地选择高的油酸和亚油酸的育种目的。同时,通过对扫描次数、分辨率和光谱数据预处理等的系统研究,对照气相色谱法,建立了单粒油菜籽芥酸品质的NIRS分析技术。单粒油菜籽芥酸(扫描次数128,分辨率4 cm1)模型是最佳工作曲线,其决定系数R2为0．79,均方差RMSECV为4．81。半粒纸层析技术结果准确,但操作繁琐,又损伤种子,不利于出苗;而NIRS为无损伤检测方法,快速高效,无污染较准确。两者都能科学有效地应用于品质育种中间材料和早世代材料的选择。

纸层析法定量测定米胚芽中的γ-氨基丁酸

通过对点样量、展开体系、显色方法等研究,解决了利用纸层析法定量测定γ 氨基丁酸误差大、重现性差的问题,从而建立了以纸层析法定量测定γ 氨基丁酸的方法.结果表明,此法定量测定γ 氨基丁酸简单易行,耗费低廉,可作为食品中γ 氨基丁酸分析测定的手段.

改良纸层析法测定发酶液中异亮氨酸的含量

传统的氨基酸纸层析法是以特制的滤纸为支持物,用特殊配方的溶剂混合液作展层剂,然后喷刷显色剂茚三酮,烘烤显色,展层与显色分开操作,给实验带来不便。本文对把显色剂直接加到展层剂中进行了研究,用该方法定量测定了发酵液中的异亮氨酸含量。实验表明:改良后的纸层析法简化了操作,节约试剂,测定L-异亮氨酸含量具有较高的准确度和精密度,适合在L-异亮氨酸生产中应用。

对氨基酸纸层析实验的改进

目的对传统的"氨基酸纸层析"实验进行改进,力求寻找一种无毒的展层剂,且操作更简便的实验方法。方法利用不同浓度的乙醇溶液对混合氨基酸进行分离,与水饱和苯酚的分离效果进行比较。结果 3种不同浓度的乙醇展层剂均可将混合氨基酸分离,但75%的乙醇分离混合氨基酸效果最好;且将茚三酮溶于展层剂中显色比先展开再显色的效果更好。结论通过实验改进,不仅实验效果满意,简化了实验步骤,缩短了实验时间,而且对人体没有任何毒性和腐蚀性,达到了预期的效果。

L-鸟氨酸纸层析定量测定法的研究

本文建立了一种纸层析定量测定L—鸟氨酸的新方法,用苯酚:氨水:水=5:1:1为展开剂能将L—鸟氨酸从发酵液中分开;确定了采用茚三酮为显色剂,90℃～100℃显色5min,硫酸铜:乙醇洗脱液洗脱10min后比色等测定条件,并发现滤纸上L—鸟氨酸含量为5～40μg比较合适;绘制了L—鸟氨酸标准曲线,并推出发酵液中L—鸟氨酸含量的计算公式为:X=38.46×A×n/V。

纸层析-分光光度法测定发酵液中L-丝氨酸和甘氨酸的含量

应用“纸层析 分光光度法”对发酵液中的L 丝氨酸和甘氨酸进行了定性分析和定量测定,确立了L 丝氨酸和甘氨酸定量测定条件。研究结果表明,该法对测定L 丝氨酸和甘氨酸含量具有较高的准确度和精密度。而且该法操作简单、易于掌握,非常适合在L 丝氨酸产生菌筛选中应用。

纸层析分离洗脱法定量测定海藻糖

通过点样量、展开体系、洗脱体系的确定,解决了利用纸层析法定量测定海藻糖误差大、重现性差的问题,从而建立了以纸层析分离洗脱法定量测定海藻糖的方法。结果表明,此法定量测定海藻糖简单易行,可作为海藻糖分析测定的常规手段。

氨基酸纸层析实验的进一步探讨

针对展层与染色分两步操作带来的种种弊端,研究了氨基酸纸层析实验中展层与染色两步合一的实验条件,筛选出一种由70 g苯酚、30 g水和0.14g茚三酮组成的新展层剂,该展层剂分离效果良好,可以长期保存且背景无异常现象。同时还发现茚三酮可以抑制苯酚的氧化,解决了苯酚作为展层剂易氧化变红的难题。

纸层析-分光光度法测定发酵液中L-异亮氨酸

鉴于在菌种选育工作中必须准确测定菌株产酸水平,要求有可行的测定方法,对简单易行的纸层析 分光光度法测定发酵液中L 异亮氨酸质量进行了系统的研究,研究发现:选用合适的显色剂、层析溶剂及洗脱剂的同时选择最佳吸收波长、最佳洗脱时间及适宜的点样量,可以提高该测定方法的准确度和精密度,从而在菌种筛选过程中准确地测定发酵液中L 异亮氨酸质量.

氨基酸在纸层析中的分离

通过实验对展开剂的配比进行了广泛的选择，得出展开剂的最佳配比为４∶１∶５，并在此条件下对赖氨酸、苯丙氨酸和脯氨酸等混合物进行了分离和鉴定。

极性大、难挥发和热不稳定的多组份体系的简易分析方法──快原子轰击质谱与纸层析和薄层层析的联用

本文介绍两种简便的分析方法──快原子轰击质谱与纸层析、薄层层析的联用，并举例说明了这两种方法在极性大、难挥发、热不稳定的多组份体系的分析中的应用。结果表明，方法操作简便、快速、经济实用，可作为传统的色质联用（GC／MS和LC／MS）的补充。

盐藻中β－胡萝卜素的分离与测定──纸层析法

盐藻中含有多种营养物质，其中蛋白质、甘油、叶绿素及β－胡萝卜素具有开发价值．利用β－胡萝卜素极性最小，易溶于石油醚的特点，用丙酮－石油醚提取盐藻中的β－胡罗卜素，纸层析分离，分光光度法于４５０ｎｍ波长处测定，可定量测定出盐藻中的β－胡萝卜素含量。本文利用此法对多个盐藻样品进行了测定，精密度Ｓ＝０．００４２。回收率在８４．１％－１１２．０％之间。

小纸层析法快速测定^（99m）Tc—HMPAO放射化学纯度

采用小纸层析系统和１：１的氯仿／四氢呋喃展开剂分析９９ｍＴｃ－ＨＭＰＡＯ的放射化学纯度，并与两个薄层层析系统和一个纸层析系统的方法作比较，配对ｔ检验结果表明两种方法测定的放射化学纯度无显著差异（Ｐ＞０．０５）；放射化学纯度在７４．２％－９６．４％（ｎ＝３０），小纸层析法与薄层／纸层析法紧密相关（ｒ＝０．９７，Ｐ＜０．００１），回归公式ｙ＝１．００６ｘ－０．３２３．

氨基移换实验中纸层析方法的改进研究

由于传统氨基移换实验中的展层剂水饱和苯酚是有毒物质,寻找低毒或无毒的展层剂是十分必要的。文章通过对展层剂的种类、配比、展层时间及染色方法的研究,确定了以正丁醇∶甲酸(88)∶水为15∶3∶2的展层剂,展层时间为1.5h,以展层剂为溶剂的0.3茚三酮为染色液,并使展层与染色同步进行。

纸层析法定量检测麦芽糖基β-环状糊精

建立了以纸层析法定量检测麦芽糖基β–环状糊精含量的方法.通过实验确定了适宜的展开剂,组成为V(正丙醇):V(正丁醇):V(水)=5:3:4;适宜洗脱剂为0.1 mol/L的盐酸溶液. 洗脱时间为14 h.回收实验表明当点样量在150～250 μg时测定结果准确可靠.重复性实验的变异系数为3.58%.纸层析法与HPLC法相比较,测定结果的相对误差为-3.99%.实验证明,纸层析法可作为测定麦芽糖基β–环状糊精的常规方法.

纸层析法分离鉴定氨基酸实验的改进

纸层析法分离鉴定氨基酸是制药工程专业本科必修实验课,文献实验方法存在实验时间过长、溶剂毒性大等缺点。通过实验对展开剂进行选择,得出展开剂的最佳配比,并在此条件下对赖氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、亮氨酸和脯氨酸等进行了分离和鉴定,取得了较好的分离结果。该方法与文献相比,简化操作步骤,节约仪器试剂,节省实验时间,使用毒性较小的溶剂,符合绿色化学的要求。

纸层析-分光光度法测定生物转化体系中的L-丝氨酸

利用纸层析-分光光度法测定转化体系中丝氨酸含量,确定了可以很好分离生物转化体系中丝氨酸和甘氨酸的展开剂和测量条件。分离组分经洗脱液洗脱,丝氨酸在512nm处有最大吸光值,且吸光值与丝氨酸和甘氨酸的含量呈一次线性关系。结果表明,丝氨酸在0～20g.L-1范围内呈良好的线性关系(R2=0.9975),平均加样回收率为100.48%,RSD为1.74%。将测量结果与氨基酸测试仪测量结果做比较,两种方法的相符率达到99.6%～100.4%。