非特异性过氧合酶GmaUPO的重组表达及生化表征

非特异性过氧合酶(Unspecific Peroxygenase,UPO)因在催化有机底物时具有独特的立体选择性和对映选择性而在工业生产中具有广阔的应用前景。本研究从纹缘盔孢伞(Galerina marginata)的基因组中发现了一个假定的非特异性过氧合酶基因(以下简称GmaUPO),通过全基因合成技术获得了GmaUPO的基因序列,并构建了GmaUPO诱导型表达的毕赤酵母X-33基因工程菌。在最佳的发酵条件下,发酵液酶活力达到6 U/L,重组GmaUPO分子质量约为40 ku,其最适反应条件为35℃、pH 9.0。重组GmaUPO可在温和条件下利用H_(2)O_(2)高效催化芳环类物质中的惰性C—H键羟化,合成芳环类含氧化合物,在香精香料等领域具有巨大的应用潜力。