纺锤体与动粒相关蛋白-1在肝细胞癌中的预后分析

目的探讨纺锤体与动粒相关蛋白-1(SKA1)在肝细胞癌(HCC)中的表达以及其对患者预后的影响。方法收集88对HCC癌组织和对应的癌旁组织,采用免疫组化的方法对这些组织中SKA1的表达水平进行了检测,分析其表达水平与HCC患者临床病理参数的关系,并采用Kaplan-Meier法、单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析SKA1的表达水平对HCC患者预后的影响。结果与癌旁组织相比,SKA1在HCC癌组织中显著高表达(P<0.001)。SKA1的表达水平与瘤体大小密切相关(P<0.002)。Kaplan-Meier法表明SKA1高表达组的5年总生存率和无瘤生存率分别为27.03%、35.14%,而低表达组的5年总生存率和无瘤生存率分别为60.78%、50.98%(P<0.05)。亚组分析表明,高表达的SKA1能预测血浆高水平谷丙转氨酶(ALT)患者的总生存率和无瘤生存率(P<0.05),而在血浆低水平ALT患者中差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Cox比例风险回归模型表明SKA1是HCC总生存率的独立危险因素(HR=2.879,P=0.001),但不是无瘤生存率的独立危险因素(HR=1.718,P=0.075)。结论SKA1参与了HCC的发生发展,可以作为HCC患者总生存率的预后指标。

纺锤体动粒相关复合体-1(SKA1)促进葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的分子机制研究

目的研究纺锤体动粒相关复合体-1(SKA1)促进葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞增殖的分子机制。方法利用SKA1敲减及空载体慢病毒感染MUM-2B细胞分别作为SKA1敲减组和对照组,再以MTT法、流式细胞术及Caspase-3/7法检测各组细胞增殖、凋亡表型的变化;利用基因表达谱芯片筛选差异基因,KEGG富集分析探寻SKA1促进UM发生发展的潜在信号通路,再以Western blot检测信号通路中关键蛋白的表达变化;利用TCGA数据库UM样本RNA测序及随访数据,分析SKA1表达与预后的关系。结果与对照组相比,SKA1敲减组细胞培养3 d、4 d、5 d的光密度均显著降低(均为P<0.01),而凋亡细胞比例及Caspase-3/7活性均显著增加(均为P<0.01)。KEGG富集分析显示,差异基因富集于P53信号通路。Western blot检测结果证实,SKA1敲减后,P53通路中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP3)的表达显著下降(P<0.05)。SKA1高表达患者总生存率下降(P=0.021,HR=2.55,95%CI0.92~7.05)。结论SKA1通过P53/IGFBP3信号通路促进UM细胞增殖,而且SKA1高表达是影响UM患者预后的危险因素。

血清LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C及sLOX-1水平与老年急性脑梗死的相关性研究

目的分析血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、残粒脂蛋白胆固醇(RLP-C)及可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)水平与老年急性脑梗死(ACI)的相关性。方法选取2022年1月—2023年8月收治的230例老年ACI作为研究组,另选择同期、同年龄段115例健康体检者作为对照组。比较2组LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C及sLOX-1水平,比较研究组不同斑块稳定性、神经功能缺损程度[采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估]、颈动脉内中膜厚度(IMT)患者上述指标水平,偏回归分析上述指标与老年ACI的关系,并分析上述指标与斑块稳定性、IMT、NIHSS评分的相关性。结果研究组LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C、sLOX-1水平高于对照组(P<0.01)。老年ACI患者LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C及sLOX-1水平,无斑块患者<稳定斑块患者<不稳定斑块患者,轻度神经功能缺损患者<中度神经功能缺损患者<重度神经功能缺损患者,IMT正常患者<IMT增厚患者<斑块形成患者(P<0.05)。LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C、sLOX-1水平与老年ACI密切相关(P<0.01)。研究组LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C及sLOX-1水平分别与斑块稳定性、IMT、NIHSS评分呈正相关(P<0.01)。结论老年ACI患者LDL-C/HDL-C、non-HDL-C、RLP-C、sLOX-1水平明显升高,且与神经功能缺损程度及颈动脉粥样硬化斑块密切相关。

circ-SKA3通过miR-1303调控TLR4轴在动脉粥样硬化中的作用

[目的]探究环状RNA纺锤体与动粒相关蛋白3(circ-SKA3)通过miR-1303调控Toll样受体4(TLR4)轴在动脉粥样硬化(As)中的作用。[方法]收集2019年4月—2022年4月收治的30例As患者经颈动脉内膜剥脱术切除的颈动脉斑块及病变血管组织、对应斑块旁正常组织与静脉血,另收集30例健康对照者静脉血。微阵列分析、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、荧光原位杂交(FISH)实验检测circ-SKA3在As患者斑块组织和对照样本、血浆外泌体、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、As模型小鼠主动脉组织中的表达和定位。通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀等方法验证circ-SKA3、miR-1303、TLR4之间的相互关系。通过CCK-8、细胞划痕实验、Transwell实验、血管形成实验检测HUVEC增殖、迁移、血管形成能力,蛋白质印迹法检测TLR4轴相关蛋白表达。油红O染色、HE染色、Masson染色观察As模型小鼠主动脉组织病变情况,免疫组织化学、免疫荧光检测As模型小鼠主动脉组织TLR4的表达情况。[结果]As患者斑块组织、血浆外泌体、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉组织中circ-SKA3、TLR4的表达水平上调(P<0.05),miR-1303的表达水平下调(P<0.05)。功能分析表明,circ-SKA3在体外实验中促进HUVEC损伤,在体内实验中促进As进展。机制分析表明,circ-SKA3可通过海绵吸附miR-1303促进TLR4表达,抑制circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可抑制As病变形成。[结论]circ-SKA3在As患者颈动脉斑块、血浆外泌体、ox-LDL处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉中的表达显著增高,circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可促进体内外As模型发展。

食管癌组织miR-758-3p、NUSAP1表达变化及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨食管癌组织微小核糖核酸-758-3p(miR-758-3p)、核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选择食管癌患者97例,取手术切除的食管癌组织及其癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-758-3p、NUSAP1 mRNA表达。通过TargetScan数据库预测miR-758-3p与NUSAP1的结合位点,分析食管癌组织miR-758-3p表达与NUSAP1 mRNA表达的关系以及二者表达与临床病理特征和预后的关系。结果与癌旁正常组织比较,食管癌组织miR-758-3p相对表达量降低,NUSAP1 mRNA相对表达量升高(t分别为23.037、25.253,P均<0.05)。经TargetScan数据库预测,NUSAP1基因3′非翻译区583~589位点处存在miR-758-3p的结合位点。Pearson相关分析显示,食管癌组织miR-758-3p表达与NUSAP1 mRNA表达呈负相关(r=-0.732,P<0.01)。食管癌组织miR-758-3p、NUSAP1 mRNA表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、病理类型、吸烟史、饮酒史、肿瘤最大径无关(P均>0.05)。以食管癌组织miR-758-3p、NUSAP1 mRNA相对表达量的均数为临界值,将患者分为miR-758-3p高表达者(≥0.64,47例)与miR-758-3p低表达者(<0.64,50例)、NUSAP1 mRNA高表达者(≥3.19,43例)与NUSAP1 mRNA低表达者(<3.19,54例)。生存分析发现,miR-758-3p高表达者3年累积生存率高于其低表达者,NUSAP1 mRNA高表达者3年累积生存率低于其低表达者(Log-rankχ^(2)分别为5.682、6.918,P均<0.05)。结论食管癌组织miR-758-3p低表达、NUSAP1 mRNA高表达,二者表达变化与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及患者预后密切相关。

进行气管插管的颅脑外伤患者血清GM-CSF和HMGB1水平及其与并发肺部感染的关系

目的探讨血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染的关系。方法选取2020年12月至2022年12月华北医疗健康集团峰峰总医院收治的156例进行气管插管的颅脑外伤患者作为颅脑外伤组,根据是否出现肺部感染将进行气管插管的颅脑外伤患者分为感染组和未感染组,另根据临床肺部感染评分(CPIS)将进行气管插管的颅脑外伤并发肺部感染患者分为重度感染组和轻度感染组,并选取同期在华北医疗健康集团峰峰总医院体检的体检健康者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定所有研究对象血清GM-CSF、HMGB1水平;分析进行气管插管的颅脑外伤并发肺部感染患者血清GM-CSF、HMGB1水平与CPIS的关系;采用多因素Logistic回归分析进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GM-CSF、HMGB1对进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染的预测价值。结果与对照组相比,颅脑外伤组患者血清GM-CSF、HMGB1水平均明显升高(P<0.05)。感染组患者血清GM-CSF、HMGB1水平显著高于未感染组(P<0.05)。重度感染组21例,轻度感染组45例。与轻度感染组患者相比,重度感染组患者血清GM-CSF、HMGB1水平及CPIS均显著升高(P<0.05)。相关分析结果显示,感染组患者血清GM-CSF、HMGB1水平与CPIS均呈正相关(r=0.408、0.435,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、入院时GCS评分≥6分、合并糖尿病、GM-CSF水平升高、HMGB1水平升高均是进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,GM-CSF、HMGB1联合预测进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染的曲线下面积(AUC)为0.912(95%CI:0.860~0.963),明显大于GM-CSF、HMGB1单项预测的AUC[0.826(95%CI:0.756~0.895)、0.819(95%CI:0.743~0.896)],差异均有统计学意义(Z=1.972,P=0.049;Z=1.984,P=0.047)。结论血清GM-CSF、HMGB1水平在进行气管插管的颅脑外伤并发肺部感染的患者中升高,是进行气管插管的颅脑外伤患者发生肺部感染的危险因素,2项指标联合检测对进行气管插管的颅脑外伤患者并发肺部感染具有良好的预测价值。

八聚体结合转录因子4、纺锤体和动粒相关蛋白2在肝癌癌变过程中的表达及其临床意义

目的探讨八聚体结合转录因子4(OCT4)、纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)在原发性肝癌(PLC)组织中的表达,及其与PLC临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测2018年1月至2022年11月大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院病理确诊的27例正常肝组织、44例肝硬化组织、87例PLC组织中OCT4和SKA2表达,结合临床资料、采用χ^(2)检验分析两者的表达与PLC患者临床病理特征和预后的关系。结果OCT4在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为11.11%(3/27)、36.36%(16/44)、67.82%(59/87),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=11.811、5.444、26.708,P<0.05)。SKA2在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为14.82%(4/27)、43.19%(19/44)、73.56%(64/87),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=11.618、29.547、6.148,P<0.05)。OCT4表达水平与PLC患者TNM分期(TNMstage)、癌细胞分化程度、血管浸润明显相关(χ^(2)=8.182、7.205、6.321,P<0.05),OCT4表达水平与PLC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理类型无相关(χ^(2)=0.001、0.049、0.037、0.057,P>0.05)。SKA2表达水平与PLC患者肿瘤大小、TNM分期、血管浸润明显相关(χ^(2)=7.325、5.539、5.256,P<0.05),SKA2表达水平与PLC患者性别、年龄、癌细胞分化程度、病理类型无相关(χ^(2)=0.044、0.003、0.836、0.028,P>0.05)。结论PLC组织中OCT4和SKA2表达水平升高,OCT4表达水平与PLC患者癌细胞分化程度、TNM分期、血管浸润明显相关,SKA2表达水平与PLC患者血管浸润、TNM分期、肿瘤大小明显相关,两者均为PLC患者预后不良的影响因素。

SKA1及MMP-9在唾液腺腺样囊性癌组织中的表达及意义

目的:分析SKA1及MMP-9在唾液腺腺样囊性癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学染色法检测42例腺样囊性癌组织及20例癌旁正常组织中SKA1及MMP-9的表达情况。结果:SKA1及MMP-9在唾液腺腺样囊性癌中的阳性表达率分别为78. 6%和66. 7%,明显高于其在癌旁正常组织中的表达(15%和25%)(P <0. 05)。SKA1及MMP-9的表达与临床分期及腺样囊性癌的组织病理类型关系密切(P <0. 05)。此外,MMP-9的表达尚与神经侵袭及生存时间关系密切(P <0. 05)。结论:SKA1及MMP-9在唾液腺腺样囊性癌组织中高表达可能成为SACC预后评估指标及潜在的治疗靶点。

miR-758-3p通过靶向核仁纺锤体相关蛋白1抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭

目的探讨miR-758-3p在非小细胞肺癌(NSCLC)中的生物学功能及其作用机制。方法采用脂质体法转染miR-758-3p模拟物(miR-758-3p模拟物组)、miRNA对照(对照组)、核仁纺锤体相关蛋白1(NUSAP1)过表达质粒(NUSAP1过表达组)、miR-758-3p模拟物+NUSAP1(miR-758-3p模拟物+NUSAP1组)至人NSCLC细胞系A549细胞中。采用CCK-8法和Transwell小室法检测A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,结合生物信息学预测网站和双荧光素酶报告基因实验验证miR-758-3p及其靶基因的靶向关系。结果转染24 h后,miR-758-3p模拟物组和对照组A549细胞中miR-758-3p基因的相对表达水平分别为3.02±0.16和1.00±0.08,NUSAP1基因的相对表达水平分别为0.04±0.02和1.00±0.03,差异均有统计学意义(均P<0.05)。转染72 h后,miR-758-3p模拟物组和对照组细胞的吸光度值分别为0.78±0.06和1.15±0.06,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-758-3p模拟物组细胞的迁移数和侵袭数分别为[(119.04±11.49)个]和[(71.33±5.36)个],均低于对照组[分别为(271.38±19.05)个和(164.30±8.11)个;均P<0.05]。miR-758-3p模拟物转染野生型NUSAP1报告基因的荧光素酶活性(0.37±0.04)低于对照组(1.00±0.03,P<0.05)。突变型NUSAP1报告基因和对照组的荧光素酶活性分别为0.96±0.02和0.95±0.02,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-758-3p通过调控NUSAP1基因的表达抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。

慢病毒干扰SKA1对前列腺癌PC-3细胞增殖及CDK4和cyclin D1表达的影响

目的探究慢病毒介导纺锤体和动粒相关蛋白1(SKA1)沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平的影响。方法构建慢病毒表达载体Lv-shSKA1,转染PC-3细胞。实验分为空白组、Lv-shCon组和Lv-shSKA1组。用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测细胞SKA1mRNA表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞周期,用蛋白质印迹(Western blot)技术检测SKA1、CDK4及cyclin D1蛋白表达。结果 (1)与LvshCon组比较,Lv-shSKA1组细胞中SKA1mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05)。(2)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组细胞增殖速率显著较慢(P<0.05)。(3)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组G0/G1期细胞数显著减少(P<0.05),S期细胞数显著增加(P<0.05)。(4)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组细胞CDK4、cyclin D1蛋白表达水平均显著下调(P<0.05)。结论慢病毒介导的SKA1沉默可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,且细胞增殖相关蛋白CDK4、cyclin D1表达显著下调,提示SKA1可能是前列腺癌基因治疗的新靶点。

KLF4在肾透明细胞癌侵袭和迁移中的作用及其与SKA1的靶向调控关系探讨

目的探讨肾透明细胞癌(ccRCC)组织中锌指转录调节因子4(KLF4)的表达变化,及其调控纺锤体和动粒相关复合体亚基1(SKA1)促进ccRCC细胞侵袭、迁移的作用。方法从癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库下载440例ccRCC原位癌组织和80例伴有远处转移的ccRCC组织的转录组测序数据,分析KLF4在原位癌组织和伴有远处转移癌组织中的表达差异。取人肾癌细胞786-O、ACHN,分为KLF4过表达组、空载体组、共表达KLF4/SKA1组,采用慢病毒载体技术,分别转染pCMV-KLF4、pCMV、pCMV-KLF4和pCMV-SKA1质粒;采用Transwell小室实验观察各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。取786-0、ACHN细胞,分为KLF4干扰组及干扰对照组、KLF4过表达组及空载体组,KLF4干扰组和干扰对照组分别转染siKLF4和siNC,KLF4过表达组和空载体组分别转染pCMV-KLF4、pCMV质粒;采用实时荧光定量PCR法检测细胞SKA1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞SKA1蛋白表达;利用Jaspar和ConTra V3在线工具分析预测KLF4在SKA1启动子区的结合位点,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。结果KLF4在伴有远处转移的ccRCC组织中的表达低于ccRCC原位癌组织(P<0.01)。在786-O和ACHN细胞中,与空载体组相比,过表达KLF4组细胞侵袭和迁移能力降低(P均<0.01);与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组细胞侵袭和迁移能力增加(P均<0.01)。与空载体组相比,过表达KLF4组E-cadherin蛋白表达水平升高、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低;与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组E-cadherin蛋白表达水平降低、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P均<0.05)。与siNC组相比,siKLF4组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均升高;与pCMV空载体组相比,pKLF4过表达组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均下降(P均<0.01)。SKA1转录起始位点上游850~900 bp启动子序列中存在KLF4的结合位点。双荧光素酶报告实验结果显示,与pSKA1-MUT+pKLF4/pCMV、pSKA1-WT+pCMV组比较,pSKA1-WT+pKLF4组荧光素酶活性降低(P均<0.01)。结论KLF4表达下调与ccRCC恶性进展相关,KLF4可通过结合SKA1启动子区特定序列负向调控SKA1表达,从而抑制ccRCC细胞的侵袭和迁移。

纺锤体和动粒相关蛋白2以及细胞分裂周期蛋白20在乳腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)和细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集2015年5月至2021年3月临沂市人民医院107例乳腺癌组织和癌旁组织标本,应用免疫组织化学方法检测以上组织中SKA2和CDC20的表达,采用χ^(2)检验行相关分析。结果乳腺癌组织中SKA2表达率为67.29%(72/107),明显高于癌旁组织中SKA2表达率15.89%(17/107),两者差异有统计学意义(χ^(2)=62.928,P<0.01)。SKA2表达水平与乳腺癌TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=6.889、6.348、5.752,P<0.05),差异有统计学意义。SKA2表达水平与乳腺癌年龄、组织学分型、组织学分级无相关(χ^(2)=0.015、0.008、0.157,P>0.05),差异无统计学意义。乳腺癌组织中CDC20表达率为47.66%(51/107),明显高于癌旁组织中CDC20表达率12.15%(13/107),两者差异有统计学意义(χ^(2)=32.189,P<0.01)。CDC20表达水平与乳腺癌TNM分期、组织学分级、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=7.330、5.888、4.275,P<0.05),差异有统计学意义。CDC20表达水平与乳腺癌年龄、肿瘤大小、组织学分型无相关(χ^(2)=0.002、0.205、0.094,P>0.05),差异无统计学意义。结论SKA2和CDC20在乳腺癌中表达异常增高、并与乳腺癌患者的不良预后密切相关,提示SKA2和CDC20可能是乳腺癌患者预后的重要生物标志物。

乳腺癌组织中SKA2 mRNA和蛋白的表达水平及其与临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌组织中纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。方法收集新鲜乳腺癌及癌旁冷冻组织标本40对,采用实时荧光定量PCR法检测SKA2 mRNA表达水平;选取乳腺癌石蜡包埋标本160例,采用免疫组化染色法检测SKA2蛋白表达水平,并分析SKA2蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、病理分型、分子分型及淋巴结转移状况等临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中SK2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。SKA2 mRNA在乳腺癌中的高表达率为70.0%。SKA2蛋白表达与患者TNM分期和淋巴结是否转移均有关(均P<0.01),而与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、病理分型、分子分型均无关(均P>0.05)。结论SKA2蛋白在乳腺癌中的高表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关;SKA2可作为反映乳腺癌转移的一个重要指标。

AEG-1和SKA3在甲状腺微小乳头状癌组织中的表达及临床意义

目的探讨星形细胞上调基因-1(AEG-1)和纺锤体与着丝粒相关蛋白3(SKA3)的表达与甲状腺微小乳头状癌(PTMC)临床病理特征和预后的关系。方法收集2015年5月至2016年8月经病理学检查确诊的92例PTMC患者的癌组织及对应癌旁组织石蜡标本。采用免疫组化SP法检测组织标本中AEG-1和SKA3的表达,并分析其表达与PTMC临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析AEG-1、SKA3表达与患者无复发生存时间(RFS)的关系,采用Cox比例风险模型分析影响PTMC患者RFS的因素。结果AEG-1在癌旁组织和PTMC组织中的阳性表达率分别为17.4%(16/92)和72.8%(67/92),差异有统计学意义(P=0.000);SKA3在癌旁组织中的阳性表达率为15.2%(14/92),在PTMC组织中为66.3%(61/92),差异有统计学意义(P=0.000)。AEG-1蛋白表达与临床分期、淋巴结转移和腺外侵犯有关(P<0.05);SKA3蛋白表达与临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示,PTMC组织中AEG-1和SKA3蛋白表达呈正相关(r=0.489,P=0.025)。Kaplan-Meier生存分析显示,AEG-1阳性表达者的1、3、5年无复发生存率分别为98.5%、92.5%、83.6%,低于AEG-1阴性表达者的100.0%、96.0%和92.0%,两组比较差异有统计学意义(P=0.046)。SKA3阳性表达者的1、3、5年无复发生存率为98.4%、90.2%、80.3%,低于SKA3阴性表达者的100.0%、96.8%、96.8%,两组比较差异有统计学意义(P=0.032)。Cox多因素分析结果显示,临床分期、淋巴结转移、AEG-1和SKA3表达是影响PTMC患者RFS的独立因素(P<0.05)。结论PTMC组织中AEG-1、SKA3表达水平升高,AEG-1表达与临床分期、淋巴结转移和腺外侵犯有关,SKA3表达与临床分期和淋巴结转移有关,二者均为PTMC患者预后不良的影响因素。

SKA1与恶性肿瘤相关性及机制的研究进展

纺锤体和动粒关联蛋白-1(SKA1)参与有丝分裂过程中动粒与微管之间的稳定结合,维持染色体的稳定性;抑制纺锤体组装检查点(SAC)的活性,促进有丝分裂中后期转化。SKA1功能失调或表达异常,影响细胞有丝分裂或细胞周期转化,与多种恶性肿瘤发生发展密切相关。本文就SKA1结构、功能及其在恶性肿瘤发生发展中的作用及机制进行综述。

长链非编码肌动纤维相关蛋白1-反义RNA1影响肺癌A549细胞迁移的机制

目的探讨长链非编码RNA分子肌动纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对肺癌细胞迁移能力的影响及其机制,为开发肺腺癌新的治疗方法提供依据。方法体外培养A549细胞,分为无干预组、无关小干扰RNA(siRNA)组、靶向AFAP1-AS1基因的siRNA (si-AA1)处理组和LY294002处理组。无干预组加入Lip2000;无关siRNA组采用Lip2000转染无关siRNA(100 nmol/L);si-AA1处理组采用Lip2000转染si-AA1(100 nmol/L),细胞转染后继续培养24 h;LY294002处理组加入LY294002,培养24 h。用Western blot法检测Akt、pAkt和E-钙粘素(E-cadherin)含量;用qRTPCR法检测mRNA含量;采用划痕实验检测细胞迁移能力。采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析和Dunnett’s T3检验。结果与无干预组和无关siRNA组比较,si-AA1处理组和LY294002处理组的E-cadherin蛋白相对水平(0.68±0.11、0.86±0.10)显著增多,差异均有统计学意义(P<0.01);si-AA1组的Akt蛋白和pAkt蛋白水平未见改变,差异无统计学意义(P>0.05)。si-AA1处理组、LY294002处理组的E-cadherin基因转录条件相对水平分别为1.52±0.10和1.65±0.13,均明显高于无关siRNA组(0.96±0.14)和无干预组(1.00±0.12),差异均有统计学意义(P<0.01)。si-AA1组和LY294002组的细胞迁移率分别为26.2%±8.7%和24.1%±7.5%,低于无关siRNA组(37.5%±10.1%)和无干预组(38.1%±9.2%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论长链非编码RNA分子AFAP1-AS1的表达影响肺癌细胞迁移能力;当其表达受到抑制后,Akt信号通路未发生活化,E-cadherin基因转录和蛋白表达发生上调,造成细胞迁移能力减弱。

IL-1β介导的ERK通路对大鼠髁突软骨细胞外基质的作用

目的探讨白介素-1β(IL-1β)介导下细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路对大鼠棘突软骨细胞外基质的作用。方徐对Wistar大鼠殊突软骨细胞进行培养和鉴定。采用不同浓度的IL-1β处理舉突软骨细胞.检测ERK、Sry相关高速泳动族框因子9(Sox-9)、Ⅱ型胶原(COL2)的mRNA表达,检测ERK、磷酸化ERK(P-ERK)、Sox-9、COL2的蛋白表达,并由此确定诱导细胞致炎且能激活ERK通路的最小IL-1β浓度;根据筛选的IL-1β浓度,将髒突软骨细胞随机分为3组:对照组IL-1β组、IL-1β+ERK抑制剂组。检测各组ERK、Sox-9、COL2的mRNA表达及ERK、P-ERK、Sox-9和COL2的蛋白表达。结果培养传代的细胞形态与原代细胞相同,经免疫组化分析为舉突软骨细胞;用10ng/mL的IL-1β处理髒突软骨细胞,P-ERK的表达升高(P<0.05),Sox-9和COL2的表达降低(P均<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+抑制剂组的P-ERK表达被抑制(P<0.05),Sox-9和COL2表达升高(P均<0.05)。结论IL-1β能够通过激活ERK通路来抑制大鼠課突软骨细胞Sox-9和COL2的表达。

SKA2调控肾透明细胞癌增殖和转移的分子机制研究

目的探讨纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)在肾透明细胞癌中的表达情况,分析SKA2在肾癌细胞增殖和转移过程中的分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)比较肾透明细胞癌组织及癌旁正常组织的SKA2 mRNA表达差异;使用qRT-PCR法和Western blot试验分别测定SKA2 mRNA和SKA2蛋白在人肾癌细胞株及人肾小管上皮细胞株中的表达差异;构建SKA2表达缺陷肾癌细胞,使用流式细胞法、划痕试验和Western blot试验观察其在细胞分裂周期、细胞转移能力和相关蛋白表达方面的变化。结果 SKA2在肾癌组织及肾癌细胞株的表达显著高于正常组织或细胞株(P<0.05),减少SKA2表达可将肾癌细胞分裂周期阻滞于G2/M期,延缓肾癌细胞增殖。SKA2表达缺陷肾癌细胞的转移能力较对照组增强(P<0.05)。结论 SKA2在肾癌组织及细胞系中高表达,通过影响肾癌细胞分裂周期促进细胞增殖,同时对肾癌细胞的转移能力有抑制效应。

胃癌组织中Nusap1表达水平及其临床价值

目的探析胃癌组织中核仁纺锤体相关蛋白1(Nusap1)的表达水平及临床意义。方法选取2009年3月至2014年3月接受胃癌根治术患者100例,并选取同期入选体检健康者100例为正常组,选取胃组织,制作石蜡病理切片,应用免疫组织化学法检测胃癌组织及正常胃组织中的Nusap1及胃癌患者与正常患者血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19-9(CA19-9)的表达水平;术后对患者进行定期随访,比较Nusap1高表达组、Nusap1低表达组术后6、12、18、24个月肿瘤复发情况。结果胃癌组织中的Nusap1阳性表达水平显著高于正常胃组织,胃癌组血清CEA、CA19-9阳性表达水平显著高于正常组,差异均有统计学意义(P均<0.01);Nusap1高表达组术后6、12、18、24个月肿瘤复发率显著高于Nusap1低表达组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论胃癌组织中Nusap1高表达与胃癌患者的复发情况密切相关。