八聚体结合转录因子4、纺锤体和动粒相关蛋白2在肝癌癌变过程中的表达及其临床意义

目的探讨八聚体结合转录因子4(OCT4)、纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)在原发性肝癌(PLC)组织中的表达,及其与PLC临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测2018年1月至2022年11月大庆龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院病理确诊的27例正常肝组织、44例肝硬化组织、87例PLC组织中OCT4和SKA2表达,结合临床资料、采用χ^(2)检验分析两者的表达与PLC患者临床病理特征和预后的关系。结果OCT4在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为11.11%(3/27)、36.36%(16/44)、67.82%(59/87),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=11.811、5.444、26.708,P<0.05)。SKA2在正常肝组织、肝硬化组织与PLC组织中阳性表达率分别为14.82%(4/27)、43.19%(19/44)、73.56%(64/87),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=11.618、29.547、6.148,P<0.05)。OCT4表达水平与PLC患者TNM分期(TNMstage)、癌细胞分化程度、血管浸润明显相关(χ^(2)=8.182、7.205、6.321,P<0.05),OCT4表达水平与PLC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理类型无相关(χ^(2)=0.001、0.049、0.037、0.057,P>0.05)。SKA2表达水平与PLC患者肿瘤大小、TNM分期、血管浸润明显相关(χ^(2)=7.325、5.539、5.256,P<0.05),SKA2表达水平与PLC患者性别、年龄、癌细胞分化程度、病理类型无相关(χ^(2)=0.044、0.003、0.836、0.028,P>0.05)。结论PLC组织中OCT4和SKA2表达水平升高,OCT4表达水平与PLC患者癌细胞分化程度、TNM分期、血管浸润明显相关,SKA2表达水平与PLC患者血管浸润、TNM分期、肿瘤大小明显相关,两者均为PLC患者预后不良的影响因素。

纺锤体和动粒相关蛋白2以及细胞分裂周期蛋白20在乳腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)和细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集2015年5月至2021年3月临沂市人民医院107例乳腺癌组织和癌旁组织标本,应用免疫组织化学方法检测以上组织中SKA2和CDC20的表达,采用χ^(2)检验行相关分析。结果乳腺癌组织中SKA2表达率为67.29%(72/107),明显高于癌旁组织中SKA2表达率15.89%(17/107),两者差异有统计学意义(χ^(2)=62.928,P<0.01)。SKA2表达水平与乳腺癌TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=6.889、6.348、5.752,P<0.05),差异有统计学意义。SKA2表达水平与乳腺癌年龄、组织学分型、组织学分级无相关(χ^(2)=0.015、0.008、0.157,P>0.05),差异无统计学意义。乳腺癌组织中CDC20表达率为47.66%(51/107),明显高于癌旁组织中CDC20表达率12.15%(13/107),两者差异有统计学意义(χ^(2)=32.189,P<0.01)。CDC20表达水平与乳腺癌TNM分期、组织学分级、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=7.330、5.888、4.275,P<0.05),差异有统计学意义。CDC20表达水平与乳腺癌年龄、肿瘤大小、组织学分型无相关(χ^(2)=0.002、0.205、0.094,P>0.05),差异无统计学意义。结论SKA2和CDC20在乳腺癌中表达异常增高、并与乳腺癌患者的不良预后密切相关,提示SKA2和CDC20可能是乳腺癌患者预后的重要生物标志物。

纺锤体和动粒相关复合物亚基2与抑郁障碍自杀风险的研究进展

抑郁障碍自杀风险的病因复杂,对其生物学机制的了解有限。研究发现纺锤体和动粒相关复合物亚基2(SKA2)与其存在相关性。本文从SKA2与抑郁障碍自杀风险关系的研究进展进行综述,为早期识别及干预抑郁障碍患者自杀风险提供理论基础。

纺锤体与动粒相关蛋白-1在肝细胞癌中的预后分析

目的探讨纺锤体与动粒相关蛋白-1(SKA1)在肝细胞癌(HCC)中的表达以及其对患者预后的影响。方法收集88对HCC癌组织和对应的癌旁组织,采用免疫组化的方法对这些组织中SKA1的表达水平进行了检测,分析其表达水平与HCC患者临床病理参数的关系,并采用Kaplan-Meier法、单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析SKA1的表达水平对HCC患者预后的影响。结果与癌旁组织相比,SKA1在HCC癌组织中显著高表达(P<0.001)。SKA1的表达水平与瘤体大小密切相关(P<0.002)。Kaplan-Meier法表明SKA1高表达组的5年总生存率和无瘤生存率分别为27.03%、35.14%,而低表达组的5年总生存率和无瘤生存率分别为60.78%、50.98%(P<0.05)。亚组分析表明,高表达的SKA1能预测血浆高水平谷丙转氨酶(ALT)患者的总生存率和无瘤生存率(P<0.05),而在血浆低水平ALT患者中差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Cox比例风险回归模型表明SKA1是HCC总生存率的独立危险因素(HR=2.879,P=0.001),但不是无瘤生存率的独立危险因素(HR=1.718,P=0.075)。结论SKA1参与了HCC的发生发展,可以作为HCC患者总生存率的预后指标。

纺锤体动粒相关复合体-1(SKA1)促进葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的分子机制研究

目的研究纺锤体动粒相关复合体-1(SKA1)促进葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞增殖的分子机制。方法利用SKA1敲减及空载体慢病毒感染MUM-2B细胞分别作为SKA1敲减组和对照组,再以MTT法、流式细胞术及Caspase-3/7法检测各组细胞增殖、凋亡表型的变化;利用基因表达谱芯片筛选差异基因,KEGG富集分析探寻SKA1促进UM发生发展的潜在信号通路,再以Western blot检测信号通路中关键蛋白的表达变化;利用TCGA数据库UM样本RNA测序及随访数据,分析SKA1表达与预后的关系。结果与对照组相比,SKA1敲减组细胞培养3 d、4 d、5 d的光密度均显著降低(均为P<0.01),而凋亡细胞比例及Caspase-3/7活性均显著增加(均为P<0.01)。KEGG富集分析显示,差异基因富集于P53信号通路。Western blot检测结果证实,SKA1敲减后,P53通路中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP3)的表达显著下降(P<0.05)。SKA1高表达患者总生存率下降(P=0.021,HR=2.55,95%CI0.92~7.05)。结论SKA1通过P53/IGFBP3信号通路促进UM细胞增殖,而且SKA1高表达是影响UM患者预后的危险因素。

老年冠心病合并2型糖尿病病人血清脂蛋白残粒胆固醇、HDL颗粒及ApoCⅢ与冠状动脉病变的关系

目的探讨血清脂蛋白残粒胆固醇(RLP-C)、高密度脂蛋白(HDL)颗粒及载脂蛋白CⅢ(ApoCⅢ)与老年冠心病合并2型糖尿病(T2DM)病人冠状动脉病变的关系。方法选取我院2018年4月—2019年4月收治的140例老年冠心病病人,根据是否合并T2DM分为T2DM组(78例)与N-T2DM组(62例),测定血清RLP-C、HDL颗粒、ApoCⅢ水平,并检查冠状动脉病变支数,使用Gensini积分判断冠状动脉病变程度,比较T2DM组与N-T2DM组和不同冠状动脉病变支数组血清RLP-C、HDL颗粒、ApoCⅢ水平及Gensini积分。采用Pearson相关性分析法分析血清RLP-C、HDL颗粒、ApoCⅢ与Gensini积分的相关性,多元线性回归分析法分析Gensini积分的影响因素。结果T2DM组ApoCⅢ水平、Gensini积分及3支病变发生率明显高于N-T2DM组,HDL颗粒及单支病变发生率明显小于N-T2DM组(P<0.05);随着冠状动脉病变支数的增加,血清RLP-C、ApoCⅢ水平及Gensini积分明显升高(P<0.05),HDL颗粒明显变小(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清RLP-C和ApoCⅢ水平与Gensini积分呈正相关,HDL颗粒与Gensini积分呈负相关(P<0.05);RLP-C、ApoCⅢ水平高为Gensini积分的独立危险因素,HDL颗粒大为Gensini积分的保护因素。结论老年冠心病合并T2DM病人血清RLP-C和ApoCⅢ水平明显升高,HDL颗粒变小,与冠状动脉病变程度有密切关系,早期进行干预可延缓冠状动脉病变程度。

乳腺癌组织中SKA2 mRNA和蛋白的表达水平及其与临床病理特征的相关性

目的探讨乳腺癌组织中纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。方法收集新鲜乳腺癌及癌旁冷冻组织标本40对,采用实时荧光定量PCR法检测SKA2 mRNA表达水平;选取乳腺癌石蜡包埋标本160例,采用免疫组化染色法检测SKA2蛋白表达水平,并分析SKA2蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、病理分型、分子分型及淋巴结转移状况等临床病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中SK2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。SKA2 mRNA在乳腺癌中的高表达率为70.0%。SKA2蛋白表达与患者TNM分期和淋巴结是否转移均有关(均P<0.01),而与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、病理分型、分子分型均无关(均P>0.05)。结论SKA2蛋白在乳腺癌中的高表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关;SKA2可作为反映乳腺癌转移的一个重要指标。

癌症高表达蛋白——Hec1在纺锤体组装检查点中的作用

细胞增殖依赖于细胞分裂前染色体的复制及随后的姐妹染色单体分离到达两极。纺锤体组装检查点具有确保染色体信息传递保真性的作用,检查点的缺失可能导致染色体的分离异常和肿瘤形成。癌症高表达蛋白(Hec1)通过与调控G2/M期的蛋白间的相互作用而在染色体的分离中发挥重要作用。Hec1与Nuf2的复合物,在G2/M期与动粒相结合,Hec1的缺失将导致严重的染色体分离错误。Hec1具有召集Mps1和Mad1/Mad2复合物结合到动粒上的作用,这种结合可以激活纺锤体组装检查点途径中非常重要的APCCdc20途径。但是Hec1、Mps1、Mad1三者之间的相互作用仍未明了。Hec1还可以通过与26S蛋白酶复合物的不同亚基结合调控其功能。Hec1是一种丝氨酸磷酸化蛋白,其磷酸化是由Nek2在G2/M期完成的。

子宫内膜样腺癌组织NuSAP1、MFN2表达与临床病理特征和预后的关系

目的探讨子宫内膜样腺癌(EA)组织核仁纺锤体相关蛋白1(NuSAP1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选取2019年3月至2020年10月南阳市第一人民医院收治的121例EA患者作为研究对象,应用免疫组织化学染色法检测患者癌组织及其对应癌旁组织NuSAP1、MFN2阳性表达率,分析癌组织NuSAP1、MFN2阳性表达率与患者临床病理特征的关系。出院后随访3年,完成随访112例,应用Kaplan-Meier生存曲线分析NuSAP1、MFN2阳性表达组和阴性表达组的预后差异,应用多因素COX回归分析EA患者预后的影响因素。结果EA癌组织NuSAP1阳性表达率为72.37%,明显高于癌旁组织的35.54%,MFN2阳性表达率为38.02%,明显低于癌旁组织的80.17%,差异均有统计学意义(P<0.05);国际妇产科联盟(FIGO)临床分期Ⅱ~Ⅲ期、中低分化、有淋巴结转移、深肌层浸润癌组织中NuSAP1阳性表达率分别为88.68%、83.54%、96.15%、90.63%,明显高于FIGO临床分期Ⅰ期的60.29%、高分化的57.14%、无淋巴结转移的55.79%、浅肌层浸润癌组织的66.29%,差异均有统计学意义(P<0.05);FIGO临床分期Ⅱ~Ⅲ期、中低分化、有淋巴结转移、深肌层浸润癌组织中MFN2阳性表达率分别为18.87%、30.38%、7.69%、15.63%,明显低于FIGO临床分期Ⅰ期的52.94%、高分化的52.38%、无淋巴结转移的46.32%、浅肌层浸润癌组织的46.07%,差异均有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier法分析结果显示,NuSAP1阴性表达组和MFN2阳性表达组患者的3年生存率分别为90.00%和87.80%,明显高于NuSAP1阳性表达组的69.51%和MFN2阴性表达组的67.61%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EA患者组织中NuSAP1阳性表达率升高,MFN2阳性表达率降低,NuSAP1、MFN2表达水平与患者肿瘤分化、FIGO临床分期、淋巴结转移及深肌层浸润有关,且是患者死亡的危险因素,提示NuSAP1、MFN2可能参与了EA患者的疾病进展。

BAIAP2 mRNA在注意缺陷多动障碍患儿中的表达及临床意义

目的:分析脑特异性血管发生抑制剂1相关蛋白2(BAIAP2)mRNA在注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿中的表达及临床意义,并基于动物模型探讨BAIAP2 mRNA调控自发性高血压大鼠(SHR)模型行为的潜在作用机制。方法:纳入60例ADHD患儿和40名健康志愿者,检测所有研究对象血液BAIAP2 mRNA表达水平。采用韦氏幼儿智力量表第4版(WISC-Ⅳ)评估研究对象认知水平,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估BAIAP2 mRNA预测ADHD的临床价值。基于SHR模型,分析前额叶中BAIAP2 mRNA表达水平和突触结构变化,并分析BAIAP2 mRNA表达水平和突触结构的相关性。结果:ADHD患儿血液BAIAP2 mRNA表达低于健康志愿者,并与WISC-Ⅳ量表中的各个子指标得分均呈正相关,且BAIAP2 mRNA的ROC曲线下面积(AUC)为0.879 4,灵敏度为77.1%,特异度为80.0%。动物实验结果显示:SHR组大鼠前额叶中BAIAP2 mRNA表达水平降低;盐酸哌甲酯治疗后,BAIAP2 mRNA升高。透射电镜结果显示:SHR模型突触后致密物减少,突触间隙增宽,突触曲面率增高,且BAIAP2 mRNA表达与突触结构相关指标存在相关性。结论:临床队列发现ADHD患儿血液BAIAP2 mRNA降低,具有诊断ADHD的临床价值;BAIAP2 mRNA介导的突触结构可塑性是参与SHR行为学症状改变的重要机制。

非小细胞肺癌患者癌组织和血清中SKA3、G3BP2、PROX1表达与临床治疗的关系

目的探讨非小细胞肺癌患者癌组织和血清中癌基因纺锤体与着丝粒相关蛋白(SKA)3、TP酶激活蛋白SH3结合蛋白(G3BP)2和Prospero相关同源异形盒蛋白(PROX)1的表达与术后治疗的临床关系。方法选择内蒙古民族大学附属医院微创手术的非小细胞肺癌患者102例为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测非小细胞肺癌患者手术前后血清中SKA3、G3BP2、PROX1蛋白含量;采用免疫组织化学染色法检测非小细胞肺癌患者癌组织、癌旁组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度,分析癌组织中各指标与肿瘤临床病理特征的关系。结果与术前比较,术后非小细胞肺癌患者血清中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白含量均明显降低(P<0.05);非小细胞肺癌患者癌组织中SKA3、G3BP2、PROX1的蛋白阳性表达强度明显高于癌旁组织(P<0.05);不同组织学分型的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1的表达差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分型、临床分期、有无淋巴结转移的非小细胞肺癌患者SKA3、G3BP2、PROX1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者血清中SKA3、G3BP2、PROX1与患者临床病理特征密切相关,提示其可能成为非小细胞肺癌治疗的靶点及预测预后和复发的指标。

在乳腺癌中应用CRISPR/Cas9筛选发现一种动粒-微管依赖的Aurora-A抑制剂耐药机制

背景与目的 Aurora-A(AURKA)在乳腺癌中过表达,并且与乳腺癌患者的不良预后相关。最近,选择性Aurora-A抑制剂alisertib(MLN8237)被证实在多种癌症的单药治疗中表现出令人鼓舞的抗肿瘤活性,但Ⅲ期临床试验却报道了失败的治疗结果,MLN8237未能明显延长患者的生存时间。因此,发现能够增强MLN8237活性的潜在分子,可为获得更好的治疗效果提供合理的联合用药方案。方法本研究中,我们在乳腺癌细胞中用MLN8237对507个激酶进行了系统的合成致死性CRISPR/Cas9筛选,鉴定出了一组与MLN8237具有合成致死活性相互作用、可作为药物靶标的激酶。随后,我们用竞争性生长分析、克隆形成实验、细胞活性分析、凋亡分析和异种移植瘤小鼠模型,评价了Haspin(GSG2)缺失或抑制与MLN8237的协同治疗效果。在机制研究方面,用免疫荧光法检测了微管状态及Aurora-B和有丝分裂着丝粒相关驱动蛋白(mitotic centromere-associated kinesin,MCAK)的定位。结果我们发现,Haspin缺失或抑制可轻微抑制癌细胞生长,却明显增强了MLN8237的细胞杀伤活性。机制研究表明,Aurora-A抑制剂与Haspin抑制剂共同给药,阻碍了Aurora-B与MCAK被招募到着丝粒,这与过度的微管解聚作用、动粒–微管(kinetochoremicrotubule,KT-MT)连接失败及严重的有丝分裂灾难相关。我们进一步发现,MLN8237与Haspin抑制剂CHR-6494联合给药,在降低乳腺癌细胞的活力方面发挥了协同作用,并显著抑制了体外和体内实验中的肿瘤生长。结论以上结果表明,Haspin可作为一个合成致死靶点,CHR-6494可作为一种潜在的联合用药,改善MLN8237对乳腺癌的疗效。

SKA2及其相关的miRNAs在肿瘤发生发展中的作用

纺锤体与动粒相关复合物2(spindle and kinetochore associated 2,SKA2)是参与维持有丝分裂中期赤道板的稳定和适时关闭纺锤体检测点的重要蛋白质。早期研究发现,SKA2不仅调控细胞周期的进程而影响细胞增殖,还能通过其他分子机制参于肿瘤的发生。微小RNA(microRNA,miRNA)作为原癌基因或抑癌基因影响肿瘤细胞的增殖和迁移。新近研究显示,SKA2在其内含子区域miRNA的调节下,在一些肿瘤组织和细胞中异常高表达。由此可见,SKA2和miRNA之间存在密切联系。本文结合目前的研究成果,对SKA2与相关的miRNA在肿瘤发生发展中的作用及其分子机制作一综述。

circ-SKA3通过miR-1303调控TLR4轴在动脉粥样硬化中的作用

[目的]探究环状RNA纺锤体与动粒相关蛋白3(circ-SKA3)通过miR-1303调控Toll样受体4(TLR4)轴在动脉粥样硬化(As)中的作用。[方法]收集2019年4月—2022年4月收治的30例As患者经颈动脉内膜剥脱术切除的颈动脉斑块及病变血管组织、对应斑块旁正常组织与静脉血,另收集30例健康对照者静脉血。微阵列分析、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、荧光原位杂交(FISH)实验检测circ-SKA3在As患者斑块组织和对照样本、血浆外泌体、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、As模型小鼠主动脉组织中的表达和定位。通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀等方法验证circ-SKA3、miR-1303、TLR4之间的相互关系。通过CCK-8、细胞划痕实验、Transwell实验、血管形成实验检测HUVEC增殖、迁移、血管形成能力,蛋白质印迹法检测TLR4轴相关蛋白表达。油红O染色、HE染色、Masson染色观察As模型小鼠主动脉组织病变情况,免疫组织化学、免疫荧光检测As模型小鼠主动脉组织TLR4的表达情况。[结果]As患者斑块组织、血浆外泌体、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉组织中circ-SKA3、TLR4的表达水平上调(P<0.05),miR-1303的表达水平下调(P<0.05)。功能分析表明,circ-SKA3在体外实验中促进HUVEC损伤,在体内实验中促进As进展。机制分析表明,circ-SKA3可通过海绵吸附miR-1303促进TLR4表达,抑制circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可抑制As病变形成。[结论]circ-SKA3在As患者颈动脉斑块、血浆外泌体、ox-LDL处理的HUVEC和As模型小鼠主动脉中的表达显著增高,circ-SKA3/miR-1303/TLR4轴可促进体内外As模型发展。

血清RLP-C、β_(2)-MG表达与糖尿病肾病血透患者预后的相关性

目的:探讨血清脂蛋白残粒胆固醇(remnant lipoprotein cholesterol,RLP-C)、β_(2)-微球蛋白(β2-microglobulin,β_(2)-MG)表达与糖尿病肾病(DN)血透患者预后的相关性。方法:选取2017年1月-2020年1月笔者所在医院肾脏内科收治的100例DN血透患者为研究对象,根据预后情况将其分为预后良好组(73例)与预后较差组(23例)。比较两组血清RLP-C、β_(2)-MG水平。分析DN血透患者血清RLP-C、β_(2)-MG表达与预后的相关性。结果:预后良好组血清RLP-C、β_(2)-MG水平均显著低于预后较差组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,血清RLP-C、β_(2)-MG高表达均是导致DN血透患者预后较差的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论:DN血透患者预后较差与其血清RLP-C、β_(2)-MG水平高表达有关,临床可考虑通过检测DN血透患者血清RLP-C、β_(2)-MG水平以预测预后较差风险,对改善预后有积极意义。

着丝粒蛋白E的研究进展

1980年，学者们偶然从硬皮病（自身免疫病）患者血清中发脱了一系列的抗着丝粒的抗体，通过它们克隆出一类蛋白，称着丝粒蛋白（centromericproteins，CENPs），随着研究进行至今，

基于多药耐药相关蛋白2(Abcc2/Mrp2)在大鼠肾脏表达性别差异的氧氟沙星药动学变化(英文)

本研究旨在探讨基于多药耐药相关蛋白2(Abcc2/Mrp2)在大鼠肾脏表达性别差异的氧氟沙星的药代动力学变化。采用高效液相色谱法(HPLC)分别测定经尾静脉注射给予氧氟沙星(30 mg.kg1)后大鼠血浆和尿液中氧氟沙星的浓度;通过免疫组化法和流式细胞术分别对雄性和雌性大鼠肾脏Mrp2的表达进行定性和定量分析。结果表明在雄性大鼠体内,氧氟沙星药时曲线下面积(AUC)明显小于雌性大鼠,而尿排总量明显大于雌性大鼠;Mrp2在雄性大鼠肾脏中的表达显著高于雌性大鼠。因此,氧氟沙星药动学性别差异可能是由Mrp2在雄性和雌性大鼠肾脏中的表达差异所引起的。

SKA2调控肾透明细胞癌增殖和转移的分子机制研究

目的探讨纺锤体和动粒相关蛋白2(SKA2)在肾透明细胞癌中的表达情况,分析SKA2在肾癌细胞增殖和转移过程中的分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)比较肾透明细胞癌组织及癌旁正常组织的SKA2 mRNA表达差异;使用qRT-PCR法和Western blot试验分别测定SKA2 mRNA和SKA2蛋白在人肾癌细胞株及人肾小管上皮细胞株中的表达差异;构建SKA2表达缺陷肾癌细胞,使用流式细胞法、划痕试验和Western blot试验观察其在细胞分裂周期、细胞转移能力和相关蛋白表达方面的变化。结果 SKA2在肾癌组织及肾癌细胞株的表达显著高于正常组织或细胞株(P<0.05),减少SKA2表达可将肾癌细胞分裂周期阻滞于G2/M期,延缓肾癌细胞增殖。SKA2表达缺陷肾癌细胞的转移能力较对照组增强(P<0.05)。结论 SKA2在肾癌组织及细胞系中高表达,通过影响肾癌细胞分裂周期促进细胞增殖,同时对肾癌细胞的转移能力有抑制效应。

PRR11和SKA2在食管鳞癌中的表达及与临床预后的关系

目的:观察脯氨酸蛋白11(proline-richprotein11,PRR11)和动粒相关蛋白2(spindleand kinetochore associated 2,SKA2)在食管鳞癌组织中的表达,并分析与食管鳞癌临床病理参数、预后间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测PRR11和SKA2在100例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织标本中的表达,统计学分析二者与食管鳞癌临床病理参数、预后间的关系。结果:PRR11在食管鳞癌组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为60.00%(60/100)和17.00%(17/100),SKA2在食管鳞癌组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为70.00%(70/100)和37.00%(37/100),食管鳞癌组织中PRR11和SKA2阳性表达率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);PRR11和SKA2蛋白在不同TNM分期、组织分化程度及淋巴结是否转移中的表达差异均有统计学意义(P<0.05);在不同性别、年龄、肿瘤直径、不同肌层浸润、脉管浸润中表达差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析结果显示PRR11和SKA2蛋白在食管鳞癌组织中呈明显正相关(r=0.725,P<0.001);患者的无进展生存期(progression-freesur v ival,PFS)和总生存期(overallsur vival,OS)在PRR11和SKA2阳性表达与阴性表达之间差异均具有统计学意义(P<0.05);Cox多因素回归分析结果显示TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移、PRR11和SKA2表达是影响食管鳞癌预后的风险因素(均P<0.05)。结论:PRR11和SKA2过表达可促进食管鳞癌的发生发展,降低食管鳞癌患者的生存期,联合监测PRR11和SKA2的表达对食管鳞癌预后的判断具有一定的临床价值。

多药耐药相关蛋白2对汉黄芩素及其主要Ⅱ相代谢产物药动学特征的影响

目的 研究多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)对汉黄芩素及其主要Ⅱ相代谢产物药动学特征的影响。方法 FVB野生型和MRP2-/-小鼠ig汉黄芩素β-环糊精包合物后,于不同时间点眼眶取血。采用超高效液相色谱-质谱联用技术检测汉黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素-7-O-硫酸酯的血药浓度,采用DAS 2.0软件以非房室模型计算药动学参数。结果 3个成分的线性关系良好,准确度、精密度、稳定性、回收率等符合要求。汉黄芩素主要以Ⅱ相代谢产物汉黄芩苷和汉黄芩素-7-O-硫酸酯存在,均在30 min内达到最大血药浓度。汉黄芩苷的达峰浓度(Cmax)和药时曲线下面积(AUC0~t)最高,汉黄芩素-7-O-硫酸酯次之,汉黄芩素最低。与FVB野生型组比较,MRP22-/-组汉黄芩苷和汉黄芩素-7-O-硫酸酯的Cmax和AUC0~t显著增加(P<0.05、0.01)。结论 MRP2介导了汉黄芩苷和汉黄芩素-7-O-硫酸酯的外排过程,显著影响汉黄芩素的体内处置过程。