不同温度对小鼠卵母细胞纺锤体的影响

目的检测不同温度对卵母细胞纺锤体的影响。方法昆明系小鼠MII期卵母细胞和Balb/c系小鼠MI期和MII期卵母细胞分别置于不同温度环境各10 min,利用LC-PolScopeTM纺锤体观测系统,观察卵母细胞纺锤体变化。结果环境温度45℃对卵母细胞纺锤体有不可逆影响;经41℃再恢复到37℃后的Balb/c系小鼠MI期卵母细胞纺锤体Retardance值显著高于其他对应组别(P<0.05);25℃时的卵母细胞纺锤体Retardance值显著低于37℃于对照组(P<0.05)。结论小鼠卵母细胞纺锤体对温度变化敏感,体外操作时维持37℃环境是保持卵母细胞纺锤体正常生理功能的关键。

单层细胞共培养对猪去卵丘卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响

本试验比较观察第一极体(The first polar body,PbⅠ)、Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第2次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)卵母细胞判定结果的相关性分析,并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells,pOCCs)、猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells,pOECs)和猪卵丘颗粒细胞(porcine cumulus cells,pCCs)等3种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞(cumulus cells denuded oocytes,Dos)体外成熟(in vitro maturation,IVM)和孤雌发育的影响。结果显示:(1)Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性(R=0.973,P<0.01,N=90);(2)pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs((52.5±0.30)%vs(43.8±2.18)%,P<0.05),且这2组成熟率显著高于其余各组(P<0.05);Dos在3种单层细胞共培养体系培养后,成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高(P<0.05),pOCCs组GSH含量最高((7.1±0.32)pmol/卵);(3)成熟后的Dos经孤雌激活,pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余2组(P<0.05)。