转化异丁香酚生成香草醛纺锤芽孢杆菌的筛选

以底物异丁香酚为唯一碳源从土壤中筛选获得了一株能高效转化异丁香酚生成香草醛的芽孢杆菌。根据生理生化特性及16S rRNA序列分析鉴定其属于纺锤芽孢杆菌(Bacil-lus fusiform is),初步试验表明该菌能转化2%异丁香酚生成4.20 g/L香草醛。

纺锤形赖氨酸芽孢杆菌P-3产胞外多糖发酵工艺参数优化

利用响应面法对纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)P-3产胞外多糖(EPS)发酵工艺参数进行了优化。通过单因素试验筛选到显著因素,对显著因素进行Box-Behnken中心组合试验设计优化,建立EPS产量与各因素的多元回归方程;最终确定最佳发酵工艺参数为接种量3%、初始pH 7、发酵温度34℃、发酵时间32 h和转速161 r/min。在此优化条件下,EPS平均产量为2.92 g/L。

纺锤芽孢杆菌CGMCC1347发酵生产异丁香酚单加氧酶的条件优化

对从土壤中筛选获得的纺锤芽孢杆菌CGMCC1347生产异丁香酚单加氧酶的发酵条件进行了单因素考察及正交实验优化,确定了最适的发酵摇瓶培养基组成和培养条件。在发酵培养基组成为尿素1 g/L,玉米浆55 g/L,K_2HPO_4 2 g/L,MgSO_4·7H_2O 1 g/L,初始pH 7.5,发酵温度37℃,摇床转速180 r/min的条件下培养16 h获得的细胞,能转化2%的异丁香酚生成2.49 g/L香兰素,异丁香酚单加氧酶酶活达3.79 U/L。

纺锤芽孢杆菌降解水中萘的特性研究

从处理石油废水的曝气池污泥中筛选、分离到一株能有效降解萘的菌株,经鉴定为纺锤芽孢杆菌(BFN),研究了其对水中萘的降解特性。结果表明:在温度为30℃、自然pH(6.68～6.76)、接种量为0.2%、(NH4)2SO4浓度为0.15g/L的最适降解条件下,BFN对萘(初始浓度为50mg/L)的降解率在96h内达到99.8%;BFN还具有较好的耐盐度,对高浓度的萘也有较好的耐受性。BFN对萘的降解过程符合一级反应动力学。通过检测不同底物水样的吸光度、pH和底物浓度的变化,发现BFN还能降解苯甲酸、水杨酸、邻苯二甲酸、甲苯、苯酚以及1-萘酚。

纺锤芽孢杆菌产微生物絮凝剂的培养条件优化

通过对能够产微生物絮凝剂(具有处理制革废水的能力)的纺锤芽孢杆菌进行培养条件优化,以期提高该纺锤芽孢杆菌所产微生物絮凝剂的絮凝活性。以絮凝率的大小为指标,首先采用单因素实验确定了纺锤芽孢杆菌产微生物絮凝剂的最适培养温度为31℃,最佳接种量为6%,最适pH为5和6,最佳培养时间为48 h。然后,采用L9(34)正交实验,确定了纺锤芽孢杆菌产微生物絮凝剂的最适培养温度为33℃,最佳接种量为6%,最适pH为5,最佳培养时间为54 h。与初始培养条件相比,在优化培养条件下制得微生物絮凝剂的絮凝率从46.9%提高到了62.1%,增长幅度为32.4%。通过对纺锤芽孢杆菌产微生物絮凝剂的培养条件进行优化,为该纺锤芽孢杆菌所产微生物絮凝剂在制革废水处理应用提供了参考。

纺锤形芽孢杆菌L13对蓝莓生长及根际土壤生物学特性的影响

以八年生蓝莓品种"蓝丰"为供试植株,通过田间试验研究添加纺锤形芽孢杆菌L13在单一菌剂和复合微生物肥料中对植株生长及根际土壤的影响.试验设4个处理,其中单一菌剂即L13(P),以不施肥处理作为对照(CK);以灭菌后的腐熟鸡粪作为吸附载体接种酵母菌DY3和乳酸菌DY4作为普通生物肥(OF),在此基础上进一步接种L13作为复合微生物肥料(PF),以OF作为对照,分别研究单一菌剂和复合微生物肥料对蓝莓叶片酶活、果实品质、植株养分、根际土壤酶活和理化性质以及细菌群落结构的影响.结果表明:含L13的两种肥料都显著降低了果实中可滴定酸含量,提高了植株全氮、全钾含量以及土壤碱解氮、全氮、有机质含量,促进了蓝莓生长;L13在单一菌剂中的作用更为明显,和对照相比,叶片中丙二醛含量降低61.9%,果实中花青苷含量提高21.68%,可滴定酸含量降低13.61%,植株全氮、全磷、全钾分别提高4.12%、10.27%、8.63%,土壤蔗糖酶、酸性磷酸酶活性分别提高107.59%、21.36%,土壤碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、有机质含量分别提高了49.66%、31.28%、21.95%、63.83%、84.54%,土壤p H降低,并且两个处理间各指标都达到了显著性差异.运用Illumina Miseq高通量测序分析根际土壤细菌群落结构发现,L13作为单一菌剂显著降低了土壤细菌菌群丰度和多样性,而在复合微生物肥料中菌群丰度和多样性增加;单一菌剂和复合微生物肥料都增加了变形菌门和厚壁菌门的比例,单一菌剂还增加了放线菌门的比例,复合微生物肥料增加了拟杆菌门的比例;放线菌目、芽孢杆菌目等的比例也有所增加;L13在单一菌剂中对蓝莓根际细菌群落结构的影响最为明显,厚壁菌门的改变是造成结构差异的主要因素.综上,纺锤形芽孢杆菌L13在两种微生物肥料中都能发挥其促生作用,在单一菌剂中作用更显著,土壤细菌群落结构的改变同蓝莓生长、土壤肥力状况存在一定的相关性,这为PGPR与植物根际的相互作用研究以及微生物肥料的研制提供了理论基础.

纺锤芽孢杆菌(Bacillus fusiformis)降解萘的特性及动力学

在前期研究中发现,纺锤芽孢杆菌(Bacillus fusiformis,BFN)可以用于降解水溶液的萘,为了解其降解过程,发现BFN菌生长量随着溶液中的萘的含量增加而提高。其中,萘的含量分别是30、50、100和200 mg/L时,BFN的生物量OD600值分别为0.057、0.081、0.126和0.193;降解培养基溶液COD的去除率分别为59.4%、65.3%、69.2%和70.6%,说明BFN菌在生长的过程中利用萘作为碳源。同时,动力学拟合发现,对不同含量萘的降解过程都符合一级降解动力学方程,且BFN菌的生长过程满足逻辑斯蒂方程。扫描电镜图表明,BFN菌在萘的存在下生长得更好。紫外光谱显示波长为276 nm的萘的吸收峰在降解后下降很多。红外光谱数据则表明,降解液中有2组新的吸收峰出现:一组出现在2 878、2 930和2 968 cm-1处,说明在萘的降解过程中有新的羧酸类生成;另一组出现在3 438、3 667和3 731 cm-1处有新的酚类物质生成。

溶胶凝胶壳聚糖膜促进纺锤形赖氨酸芽孢杆菌转化异丁香酚生成香草醛的研究（英文）

通过溶胶凝胶冷冻干燥法制备的壳聚糖膜用于结合纺锤形赖氨酸芽孢杆菌CGMCC1347生物转化异丁香酚中的产物香草醛。壳聚糖与香草醛能形成希夫碱。本研究优化了其结合条件及洗脱条件。研究结果表明,在pH7.0、37℃、200r/min、48h,1g壳聚糖可结合0.125g香草醛。壳聚糖膜上所结合的香草醛以6.17%(w/w)HCl溶液室温下放置10h可完全洗脱。在此生物转化过程中添加壳聚糖膜可有效避免产物抑制。优化后的转化条件为装液量10mL/50mL锥形瓶、异丁香酚2%(v/v)、湿细胞0.48g、壳聚糖膜0.1g、磷酸缓冲液(pH8.0)50mmol/L、37℃、180r/min转化60h,香草醛最高浓度达1.71g/L。

两相体系中微生物法转化异丁香酚生成香草醛的研究

从土壤中筛选获得一株能耐受高浓度异丁香酚并高效转化生成香草醛的纺锤芽孢杆菌Bacillus fusiformis菌株CGMCC1347,研究了微生物细胞在异丁香酚-水两相体系中转化异丁香酚制备香草醛的过程。在异丁香酚体积分数60%,初始pH 4.0,温度37℃,转速180 r/min的条件下,转化72 h,湿细胞质量浓度达60 g/L时,香草醛质量浓度高达46.10 g/L。

小麦内生溶藻细菌ZB1的分离鉴定及其溶藻特性

【目的】为蓝藻水华的生物防治提供依据。【方法】以小麦中分离到1株内生细菌ZB1为研究对象,通过混菌法、平板溶藻法及液体溶藻法,考察了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻活性。【结果】经形态学特征、生理生化特性及16S r DNA同源性序列分析,鉴定菌株ZB1为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。菌株ZB1对铜绿微囊藻具有强烈的溶藻作用,且溶藻活性随菌液浓度的升高和作用时间的延长而增加;菌株ZB1的发酵原菌液、无菌上清液和高温处理液对铜绿微囊藻均具有溶藻作用,但菌体重悬液无溶藻作用;藻液中加入10%的无菌上清液,受试藻的叶绿素a含量由3.85 mg/L降至0.29 mg/L,除藻率为92.5%;溶藻物质具有热稳定性。【结论】菌株ZB1在蓝藻水华防治方面具有一定的应用价值。

产果胶酶菌株的筛选鉴定及产酶条件初步优化

试验以果胶为唯一碳源,从高效酒饼粉中筛选得到一株产果胶酶菌株JYJ,以来源丰富的百香果皮为发酵原材料进行单因素试验和正交试验进行培养条件优化。结果显示,经过形态学观察和16S rDNA序列比对,鉴定其为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。最优的发酵产酶条件组合为:接种量6%、发酵时间72 h、发酵培养温度30℃、发酵培养基初始pH值6.5。研究表明,该条件所测得的果胶酶活为121.46 U/mL,比初始发酵酶活81.43 U/mL提高了1.49倍。

一株溶磷解钾菌的分离筛选与鉴定

为获得具有高效溶磷解钾能力的菌株,采用选择性培养基从柑橘根部土壤中分离筛选具有溶磷解钾作用的菌株,通过液体培养法进一步比较筛选菌株的溶磷解钾能力,选择溶磷解钾能力强的菌株进行形态特征、生理生化特征、16SrDNA及gyrB基因同源性分析。结果表明,LW-1、LW-2、LW-3和LW-4这4株菌株具有解磷解钾作用;其中,LW-3的解磷解钾能力最强,其溶解无机磷量为19.06μg/mL,相对增加38.64%,氨酸芽孢杆菌LW-3,是理想的菌肥生产用菌株溶解有机磷量为17.06μg/mL,相对增加28.57%,溶解钾量为33.59μg/mL,相对增加15.96%;经鉴定确定菌株LW-3为纺锤形赖。

耐硒菌株 Lysinibacillus fusiformis D1的鉴定及清除自由基能力研究

硒污染土壤对生态环境和人体健康存在危害,国内利用微生物修复高硒土壤污染研究较少。从江汉平原土壤中以耐硒能力筛选出1株高耐硒菌株,对该菌株进行鉴定、生长动力学分析和纳米硒表征,并对其清除自由基活性进行评价。结果表明,该菌株为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌,对亚硒酸钠最高耐受性为35 mg/mL。纳米硒粒径为(306.20±1.64)nm。菌株次生代谢产物有一定DPPH自由基清除能力[(66.38±0.67)%]和较强ABTS阳离子自由基清除能力[(99.94±0.08)%],该菌株制备纳米硒有一定羟自由基清除能力[(59.81±5.09)%]。该菌株可为富硒土壤污染的生物修复提供参考,其次生代谢产物中清除自由基物质发掘有待深入研究。

一株产胞外多糖的山药内生细菌Lysinibacillus fusiformis S-1的分离和鉴定

微生物的胞外多糖是重要的生物资源,为获得新型的具有药用价值的胞外多糖产生菌,从山药、地瓜、马铃薯和胡萝卜的根茎组织中分离、筛选到11株能产胞外多糖的植物内生菌,利用苯酚–硫酸法对这11株菌的多糖产量进行了定量分析.对多糖产量最高的S-1菌株,检测其在发酵过程中菌体生长、胞外多糖生成以及发酵过程的pH变化,绘制其胞外多糖发酵代谢曲线.通过形态观察、培养特性观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析对该菌株进行了鉴定.结果显示,S-1菌株在产糖培养基中可以产生1.50 g/L的胞外多糖,在11株菌中产量最高.16S rDNA序列分析显示该菌属于赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus),且与纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(L.fusiformis)亲缘最近.综合其形态特征、培养特性和生理生化实验结果,将S-1菌株鉴定为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌.该菌在胞外多糖产生菌中少有报道,为胞外多糖的进一步研究提供了菌种资源.

不同pH下纳米铁镍颗粒对生物降解苯酚的影响

研究不同pH(8.0、6.0和3.0)下金属纳米颗粒(Fe和Fe/Ni)对纺锤芽孢杆菌(BFN)降解苯酚的影响.实验结果发现pH在8.0和6.0时投加2种金属纳米颗粒(Fe和Fe/Ni)对BFN降解苯酚有促进作用,其原因主要是纳米颗粒在水中持续腐蚀产生H2,为BFN降解苯酚提供电子,促进BFN的生长.但在pH=3.0时,只有BFN-纳米Fe耦合体系才使苯酚得到部分降解,主要是因为纳米Fe颗粒与水反应产生OH-,使pH值有所升高,更适宜BFN的生长,同时提供电子供体H2促进BFN对苯酚的利用.扫描电镜(SEM)和能谱分析(EDS)数据证实金属纳米颗粒(Fe和Fe/Ni)在反应后附着在微生物表面,但微生物的表面形态并未发生显著改变.因此,纳米金属颗粒虽然通过附着影响微生物的活性,但其在腐蚀过程中产生的H2将作为电子供体而被BFN所利用,综合作用的结果是有利于BFN的生长进而提高苯酚的降解速率.

基于16S核糖体序列分析对无菌药品检出菌溯源的分析

目的:采用基于16S核糖体的序列分析,对无菌检查药品检出菌进行溯源,确保无菌检查结果的准确可靠。方法:采用ABI 3730测序仪和基质辅助激光解离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS),对本实验室无菌检查区收集的42株环境菌及无菌检查不合格样品中分离纯化的1株检出菌进行鉴定分型,建立系统进化树;在实验环境符合要求的条件下对不合格样品严格按照标准操作规程(SOP)进行再分析,并对再分析阳性培养物中阳性菌分离鉴定。结果:本实验室无菌检查区内共分离环境菌42株,以革兰阳性球菌(29株,占69.4%)和革兰阴性杆菌(8株,占19.0%)为主,其中表皮葡萄球菌8株(19.0%),沃氏葡萄球菌7株(16.7%),藤黄微球菌5株(11.9%),奥斯陆莫拉菌、解脲葡萄球菌及蜡状芽胞杆菌各3株(均占7.1%)。无菌检查样品中检出菌鉴定为1株纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis),在无菌保障条件都符合要求的情况下,不合格样品再分析检出该菌而本实验室洁净环境菌中未发现该菌。结论:无菌样品检出的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌来自样品本身而非环境带入。