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在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库
1
作者
张凯丽
王怡
+2 位作者
李怡凡
赵雁杰
李帅
《中华生物医学工程杂志》
CAS
2023年第5期488-494,共7页
目的在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库。方法应用基于线性双链DNA的"与门"逻辑基因线路构建纳米抗体文库,首先通过PCR扩增将互补决定区(CDR)随机序列引入上、下游线性双链DNA,将其...
目的在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库。方法应用基于线性双链DNA的"与门"逻辑基因线路构建纳米抗体文库,首先通过PCR扩增将互补决定区(CDR)随机序列引入上、下游线性双链DNA,将其共转染至HEK293T细胞,转染48 h后,经RNA提取、cDNA合成、PCR扩增、高通量测序和数据处理步骤,鉴定"与门"形成的纳米抗体文库序列,对本策略进行了分析与评价。结果深度测序共测得4 173 356条序列,其中约88.18%的序列为纳米抗体文库序列。文库核酸序列最丰富的序列长度为264 bp,为理论设计长度。后续在264 bp序列中鉴定出22 172种纳米抗体序列,且CDR1~3序列中的核苷酸频率符合NNK模式。结论本研究开发了一种基于线性双链DNA"与门"逻辑基因线路在哺乳动物细胞中构建纳米抗体文库的新方法。
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关键词
纳米抗体
互补决定区
与门
线性双链dna
原文传递
题名
在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库
1
作者
张凯丽
王怡
李怡凡
赵雁杰
李帅
机构
天津医科大学肿瘤医院乳腺病理研究室、国家恶性肿瘤临床医学研究中心、天津市"肿瘤防治"重点实验室、天津市恶性肿瘤临床医学研究中心、乳腺癌防治教育部重点实验室
出处
《中华生物医学工程杂志》
CAS
2023年第5期488-494,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31870860)
天津市医学重点学科(专科)建设项目(TJYXZDXK-012A)。
文摘
目的在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库。方法应用基于线性双链DNA的"与门"逻辑基因线路构建纳米抗体文库,首先通过PCR扩增将互补决定区(CDR)随机序列引入上、下游线性双链DNA,将其共转染至HEK293T细胞,转染48 h后,经RNA提取、cDNA合成、PCR扩增、高通量测序和数据处理步骤,鉴定"与门"形成的纳米抗体文库序列,对本策略进行了分析与评价。结果深度测序共测得4 173 356条序列,其中约88.18%的序列为纳米抗体文库序列。文库核酸序列最丰富的序列长度为264 bp,为理论设计长度。后续在264 bp序列中鉴定出22 172种纳米抗体序列,且CDR1~3序列中的核苷酸频率符合NNK模式。结论本研究开发了一种基于线性双链DNA"与门"逻辑基因线路在哺乳动物细胞中构建纳米抗体文库的新方法。
关键词
纳米抗体
互补决定区
与门
线性双链dna
Keywords
Nanobody
Complementary determining region,CDR
AND gate
Linear-double-stranded
dna
Lds
dna
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库
张凯丽
王怡
李怡凡
赵雁杰
李帅
《中华生物医学工程杂志》
CAS
2023
0
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