线性聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳的迁移特性

使用线性聚丙烯酰胺作为筛分介质,对片段长度为80～584bp的标准DNA样品进行毛细管电泳,利用激光诱导荧光方法检测信号,荧光染料为溴化乙啶。改变电场强度100～375V/cm,得到的迁移率曲线与电场强度和DNA片段长度成复杂的函数关系,已有的经典理论模型:Ogston模型、Reptation无拉伸模型和Reptation拉伸模型都不能正确地描述实验观察到的迁移率随电场强度和DNA片段长度的变化情况。因此,提出一种修正的Ogston筛分理论,假定迁移的DNA分子在电场强度方向延展拉伸,如同小分子穿过凝胶筛孔。在该修正模型中,DNA的迁移率仅依赖于电场强度、筛分介质浓度和片段长度,很好地解释了实验现象。

短链线性聚丙烯酰胺-毛细管电泳分析DNA片段

合成短链线性聚丙烯酰胺 ,解决了线性聚丙烯酰胺粘度大 ,难以填充毛细管的问题。在短链线性聚丙烯酰胺浓度为 4% ,电压 10 k V条件下 ,采用激光诱导荧光检测 (λex=488nm ,λem=5 13nm ) ,PCR Markers和p BR 32 2 DNA/ Hae Markers的 2

硫代反义寡聚核苷酸在线性聚丙烯酰胺-毛细管电泳中的分离行为

通过对硫代反义寡聚核苷酸在毛细管线性聚丙烯酰胺胶 (LPA)中的电泳行为的研究 ,发现在 1 0 %浓度的LPA和 1 0 0mmol LTris borate及 7mol L尿素的缓冲溶液中 (pH =8.2 ) ,这类被分析物质有着较好的分离效果和重现性 ,能使相差一个碱基的硫代反义寡聚核苷酸片断得到基线分离。

毛细管电泳单链构象多态性分析检测质粒中基因突变

目的建立一种检测基因点突变的方法。基因的点突变在癌症的发生中起重要的作用,检测基冈点突变成为分析癌症发生的重要手段。方法采用以一对引物PCR法扩增出的pBR322和pUC19c氨苄抗性基因为点基因突变模型,建立了一种简便快速的毛细管电泳单链构象多态性分析方法,用于分离基因单点突变模型。结果以6％线性聚丙烯酰胺为分离介质,分离温度为19℃,分离电压为13 kV,可分离出模型中的4个单链DNA构象。结论建立的模型是可靠的,分析方法具有快速、灵敏度高的优点。

Bubble Formation in Non-Newtonian Fluids Using Laser Image Measurement System

A self-developed laser image measurement system was established to study the behavior of bubble for- mation at a single orifice in non-Newtonian polyacrylamide(PAAm)solutions.Images of bubbles were captured by a CCD camera and volumes of bubbles were digitally analyzed online.The effects of rheological property of PAAm solution,orifice,reservoir,and gas flowrate on bubble formation were studied experimentally.It is found that the volume of bubble increases with the concentration of PAAm solution,the diameter of the orifice,and the gas flowrate,respectively,whereas little effect of reservoir is observed in experiments.

自制试剂盒在基因突变检测中的应用

利用自制试剂盒,在ABI 310型遗传分析仪上建立了单链构象多态性分析、单链构象多态性/杂合分析及SNaPshot分析的基因突变检测方法,并将其应用于31例大肠癌病人P53基因外显子7-8和k-ras基因外显子1的突变筛查。结果表明,在各自的优化条件下,用自制试剂盒比用商品化的试剂盒分析时间更短,分离性能更好。对实际样品的检测结果表明,P53基因外显子7-8和k-ras基因外显子1在被检测人群中的突变频率分别为24％和26％,均为单点突变,其中大部分样品的突变发生在单个基因,只有一例样品同时在两个基因发生突变,这说明肿瘤的发生发展有多种途径,而且与多个基因的突变相关。