不同线栓法脑缺血模型对小鼠脑区及行为的影响

目的 探讨3种线栓法模型对小鼠不同脑区缺血及小鼠行为学差异的影响。方法 将120只ICR小鼠随机分成4组:假手术组、A组(颈总动脉进线栓至颈内动脉8 mm)、B组(颈外动脉进线栓至颈内动脉10 mm)、C组(颈总动脉进线栓至颈内动脉10 mm),每组30只。脑缺血1.5 h再灌注24 h后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察小鼠脑缺血部位并计算缺血面积,通过Longa评分评估小鼠神经运动功能,通过抓力实验评估小鼠的前肢力量,通过游泳实验评估小鼠的体力,伊文思蓝染色测定血脑屏障的通透性,通过计算脑含水量评估脑水肿程度,苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理改变。结果 TTC染色结果显示3种方法造成小鼠大脑梗死的区域及面积有所不同,A、B组在梗死面积上差异无统计学意义(P>0.05),但C组梗死面积相较于A、B组差异均有统计学意义(P<0.05),假手术组未发现梗死区域。行为学实验结果显示A、B、C 3组结果相比于假手术组差异均有统计学意义(P<0.05),Longa评分中B、C组得分差异无统计学意义(P>0.05),但A组相较于B、C组差异均有统计学意义(P<0.05);前肢抓力实验中仅A、C组测试结果差异有统计学意义(P<0.05);游泳实验B、C组游泳时间差异无统计学意义(P>0.05),但A组相较于B、C组差异均有统计学意义(P<0.05)。伊文思蓝染色、脑含水量以及HE染色发现相比于A、B组,C组所造成的脑缺血对小鼠脑损伤更严重。结论 3种线栓法脑缺血模型造成小鼠大脑不同脑区的缺血,且小鼠皮质缺血更容易造成运动功能障碍。

TC指数在改良LONGA线栓法局灶性脑缺血/再灌注动物模型制备中的应用

目的观察TC指数定位血管线栓法对大鼠局灶性脑缺血模型制备的影响。方法300只雄性SD大鼠随机分为预试验组30只、原始方法组120只(按LONGA氏血管线栓法)、改良方法组150只(按动物门齿根部T点距颈总动脉分叉点C点长短而定,简称TC指数定位法)；比较两种不同造模法对血管线栓局灶性脑缺血/再灌注实验大鼠的成功率及形态学的变化。结果TC指数定位法改良的LONGA氏血管线栓再灌注制模法,比原始的LONGA氏血管线栓法大鼠脑缺血/再灌注模型成功率高,直线相关分析及统计学上均具有显著性意义；形态学表现差异无显著性。结论TC指数定位法的LONGA氏血管线栓法大鼠脑缺血/再灌注模型是一种较好的制模方法,值得实验研究中推广应用。

补阳还五汤对MCAO模型大鼠炎症因子水平的作用研究

目的:观察补阳还五汤对缺血性脑损伤炎症因子水平的作用。方法:SD大鼠按体重随机分为假手术组,模型对照组,阿托伐他汀(10mg/kg),补阳还五汤高、中、低剂量组(20、10、5g/kg),用颈内动脉线栓法建立MCAO脑缺血再灌注模型;实验第10周期末,采血,取脑组织,ELISA法测定血清及脑组织中TNF-α、IL-6、IL-8、ROS、NF-κB含量。结果:20、10g/kg补阳还五汤能显著降低模型大鼠血清及脑组织TNF-α、IL-6、NF-κB含量,降低脑组织ROS水平。结论:补阳还五汤能有效降低MCAO大鼠的炎症反应;其对缺血性脑损伤的防治作用可能与降低炎症因子水平,抑制炎症反应有关。

大川芎丸对大鼠缺血脑组织中血管内皮细胞生长因子的影响

目的研究大川芎丸对大鼠缺血脑组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将20只SD大鼠随机分成治疗组和对照组,每组各10只,分别于术后每天予以大川芎丸提取物4.13g/kg或相应剂量生理盐水灌胃给药,72h后行神经功能评分后处死,取脑组织作免疫组化染色检测VEGF蛋白表达变化。结果大川芎丸治疗组神经功能评分(1.5±0.71)低于对照组(2.3±0.82),差异有统计学意义(P=0.032);大川芎丸治疗组VEGF表达(19.13±1.52)高于对照组(14.83±0.94),差异有统计学意义(P=0.000)。结论中药大川芎丸可上调大鼠缺血脑组织中VEGF表达,并可能通过此机制起到保护作用。

丁基苯酞对大鼠缺血脑组织NGF及BDNF表达的影响

目的研究丁基苯酞对大鼠缺血脑组织中脑源性神经生长因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立永久性缺血模型,按照Zea-Longa的方法对动物的神经功能进行评分,选取1～3分的大鼠按随机数字表随机分成2组:丁基苯酞治疗组(A组),大脑中动脉永久缺血对照组(B组),每组各20只。A组于术后予以丁基苯酞,每天2次,每次25mg/kg,B组给予相应剂量食用油灌胃给药,72h后行神经功能评分,然后处死,分别取脑梗死周围、海马区和梗死区脑组织作免疫组化染色检测BDNF、NGF蛋白表达变化,原位杂交检测BDNF mRNA、NGF mRNA的表达。结果丁基苯酞治疗组神经功能评分(1.35±0.81)低于对照组(1.75±0.55),差异有统计学意义(P=0.04)。丁基苯酞治疗组BDNF和NGF蛋白BDNF mRNA和NGF mRNA在梗死区周围和海马区表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),在梗死区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论丁基苯酞可上调大鼠梗死区周围和海马区缺血脑组织中BDNF和NGF的表达,并可能通过此机制起到保护作用。

大川芎丸对大鼠脑缺血的保护作用

目的 研究大川芎丸对大鼠脑缺血的保护作用。方法 采用大鼠大脑中动脉缺血 (MCAO)模型 ,将2 0只 SD大鼠随机分成治疗组和对照组 ,每组各 10只 ,分别于术后每天予以大川芎丸提取物 4 .13g/kg或相应剂量生理盐水 ,72 h后参照 L onga法行神经功能评分后处死 ,取脑组织作石蜡切片行 HE染色 ,计算脑体梗死积比。结果 大川芎丸治疗组神经功能评分 (1.5± 0 .71)低于对照组 (2 .3± 0 .82 ) ,差异有显著性 (P=0 .0 32 )。大川芎丸治疗组梗死体积比 (10 .81± 1.6 0 )与对照组 (17.82± 1.4 8)相比较 ,脑梗塞体积比明显减少 ,差异有显著性 (P=0 .0 0 0 )。结论 中药大川芎丸对大鼠脑缺血有保护作用。

弱氦-氖激光血管内照射对缺血再灌注大鼠脑组织血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨弱氦-氖激光血管内照射对大鼠脑缺血再灌注后血管内皮生长因子表达的影响。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，选取Zea—Longa法评分为1～3分的雄性SD大鼠40只，随机分成实验组和对照组，每组各20只。再灌注后2h实验组予以弱氦-氖激光血管内照射，照射时间20min，隔日1次，3次为1疗程；对照组同样予以静脉穿刺，但无激光输出。第6d疗程结束后，行为评分后处死大鼠，脑组织包埋、切片，HE染色，测定脑梗死体积比，采用免疫组化SP法检测血管内皮生长因子表达变化。结果治疗后实验组行为评分低于对照组[（1．40±1．05） vs （2．70±1．08），P=0．OOO]；实验组脑梗死体积比低于对照组[（7．67±1．73）％ vs （11．36±1．68）％，P=0．OOO]；实验组梗死周边血管内皮生长因子表达较对照组增加[IOD值（8．18±1．29） vs （18．62±1．55），P=0．000]。结论弱氦-氖激光血管内照射能明显上调脑缺血再灌注周边区血管内皮生长因子的表达，减轻大鼠大脑中动脉缺血再灌注脑损伤和神经功能缺损。这可能是弱氮-氖激光血管内照射疗法改善急性缺血性脑卒中预后的作用机制之一。

小鼠脑梗死后脑组织HDAC9的表达及其意义

目的检测线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)后小鼠不同部位脑组织HDCA9的表达及胞内分布变化,探讨HDAC9与缺血性脑卒中的关系。方法 21只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(9只)与手术组(12只),将手术组术后Longa评分2~3分的小鼠纳入MCAO组(9只),术后3 d断头取脑,采用免疫荧光染色观察HDAC9脑组织内分布位置与胞内分布变化,采用Western免疫印迹法与实时荧光定量PCR法检测各组不同部位(梗死侧/对侧皮层/MCAO组小脑/假手术组皮层/假手术组小脑)HDAC9的表达变化。结果(1)免疫荧光染色:脑梗死后,梗死灶周围脑组织HDAC9的荧光强度较其他部位明显增强。高倍镜下与假手术组对比,梗死灶周围HDAC9胞浆内表达增多,核内表达减少;(2)蛋白与m RNA表达检测:与各组对比,梗死侧脑组织HDAC9表达显著升高,具有统计学差异(均P<0.05),蛋白与m RNA表达情况相一致。结论 HDAC9与缺血性脑卒中密切相关,可能参与其病理生理过程。

丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后caspase-8表达及凋亡活性的影响

目的研究丁苯酞(NBP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及对caspase-8表达的影响。方法180只Wistar大鼠随机分成假手术组、缺血1h再灌注组、NBP治疗组、NBP预防组、NBP预防治疗组,每组大鼠又随机分成6h、12h、24h3个亚组,各亚组12只,采用改良的ZeaLonga法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,观察NBP对大鼠脑缺血再灌注预防或治疗后的神经功能症状评分、组织形态学改变、以及对caspase-8表达的影响。结果与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠出现严重的神经功能缺失症状,皮质和海马区caspase-8表达明显增加(P<0.01);与缺血再灌注组比较,NBP治疗组及预防治疗组能显著缓解神经元凋亡的数目及皮质海马部的caspase-8表达(P<0.01),NBP预防组皮质和海马区caspase-8表达也较缺血灌注组降低(P<0.01),但较NBP治疗组较差。结论NBP能减少缺血区凋亡神经元的数目,其预防用药及早期治疗对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制可能通过下调caspase-8表达相关。