桃果实成熟过程中活性氧和线粒体呼吸代谢相关酶的变化

以"雨花三号"水蜜桃为试样,研究了桃果实活性氧和线粒体呼吸代谢相关酶的变化对果实成熟衰老进程的影响。结果表明:桃果实成熟过程中硬度下降较快,呼吸强度有明显的高峰,并且果实硬度的快速变化期要明显早于呼吸高峰期。随着桃果实成熟衰老的加剧,果实内活性氧量有累积趋势。桃果实成熟过程中线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、线粒体细胞色素氧化酶(CCO)、H+-ATPase酶和Ca2+-ATPase酶活性在成熟后期都有不同程度的降低,线粒体的钙含量却增大。活性氧代谢与线粒体内代谢联系紧密,它们是影响果实衰老的重要因素。

LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响

目的观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建LYRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B);实时定量RT-PCR验证转染情况;RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平。结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功;与空载对照组比较,LYRM1过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均<0.05)。结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢。

线粒体病基础与临床研究

线粒体病实际上是一组多系统疾病,又称为线粒体细胞病.多数由于遗传缺陷引起线粒体代谢酶的缺陷导致ATP合成障碍,能量产生不足而发病.多由母系遗传,但也可见散发病例,由基因突变引起.

实时动态法分析七味红花殊胜丸抑制肝癌细胞线粒体代谢

目的:观察七味红花殊胜丸对人肝癌SMMC-7721细胞线粒体代谢酶的影响。方法:运用实时动态法分析七味红花殊胜丸对细胞活性的影响及各给药组不同时间IC50值的变化情况。采用MTT法检测七味红花殊胜丸对SMMC-7721细胞的抑制率;ELISA法检测七味红花殊胜丸对SMMC-7721细胞线粒体代谢和凋亡的影响,Western Blot法检测凋亡蛋白的表达状况。结果:实时动态检测结果提示,七味红花殊胜丸5 mg·mL^(-1)作用48 h对SMMC-7721细胞的抑制率最高(P<0.01);ELISA检测结果提示,七味红花殊胜丸能降低SMMC-7721细胞内ATP、ATPase、线粒体呼吸链复合物Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ酶的表达量,影响细胞的能量代谢;升高促凋亡蛋白Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达量,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量,诱导细胞凋亡。结论:七味红花殊胜丸可通过影响细胞的能量代谢,诱导SMMC-7721细胞凋亡。

低温预贮对冷藏桃果实冷害及能量水平的影响

研究了低温预贮对桃果冷害和能量水平的影响。桃果实先在12℃预贮6d,随后于0℃贮藏30d,每隔5d测定果实褐变指数、硬度和出汁率等冷害指标、H+-ATPase、Ca2+-ATP ase、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶等线粒体呼吸代谢相关酶活性及能量相关物质ATP、ADP、AMP含量和能荷变化。结果表明:低温预贮处理可有效抑制果实H+-ATPase、和Ca2+-ATPase活性的下降,保持较高的琥珀酸脱氢酶和细胞色素氧化酶活性,使得ATP、ADP的含量及能荷保持较高水平,减少膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的积累和细胞膜透性增加,延缓果实出汁率下降,抑制果实褐变指数的升高。结果表明:低温预贮处理通过调节线粒体呼吸代谢酶活性,维持果实较高的能量水平,从而延缓膜脂过氧化进程,减轻果实冷害的发生。