慢性高眼压大鼠视网膜线粒体复合物活性与氧化应激的动态变化研究

目的研究慢性高眼压大鼠视网膜5个线粒体呼吸链复合物(MRCCs)活性及氧化应激的动态变化,探索高眼压视网膜氧化损伤机制,为进一步阐明青光眼视神经损害的复杂分子机制提供实验数据。方法挪威鼠前房注射磁珠建立慢性高眼压模型。分别在术后0、1、2、4周,视网膜冷冻切片检测活性氧(ROS)含量;制备视网膜组织匀浆,检测5个MRCCs、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜/锌-超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)、锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量变化。使用SPSS16.0统计软件分析处理数据。结果挪威鼠前房磁珠注射后眼压较注射前及对照组均显著升高;慢性高眼压后,MRCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ活性迅速显著降低,以MRCCⅢ下降幅度最大(P<0.01);MRCCⅣ、Ⅴ的活性在第1周短暂升高后也显著降低(P<0.01);T-SOD、Cu/Zn-SOD活性在前2周升高,到4周时显著降低(P<0.05),Mn-SOD活性在眼压升高后即迅速大幅度降低(P<0.05);高眼压组视网膜MDA及ROS含量显著增加(P<0.001)。结论慢性高眼压引起视网膜MRCCs活性及抗氧化能力下降,导致线粒体功能障碍、视网膜ROS及氧化产物增加等损伤性变化。

压力作用下星形胶质细胞线粒体形态与功能异常的研究

目的研究压力对视网膜星形胶质细胞(RA)的损伤作用及可能的线粒体机制,为进一步阐明青光眼视神经损害的复杂分子机制提供实验数据。方法对体外培养的RA施加30 mm Hg(1 mm Hg=0.133kP a)压力,模拟慢性高眼压。分别在加压后不同时间点观察细胞线粒体形态及活性氧(ROS)含量变化,并收集细胞,制备细胞匀浆,采用生物化学方法检测5个线粒体呼吸链复合物(MRCC)和总超氧化物歧化酶(SOD)、Cu/Zn-SOD及Mn-SOD的活性变化。结果压力作用后,RA线粒体的分裂及ROS含量均增加;MRCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性下降,MRCCⅤ的活性随加压时间的延长逐渐升高;各型SOD活性均降低,但Mn-SOD活性下降最迅速、幅度最大。结论压力可以引起RA线粒体形态和功能异常,导致RA内活性氧增加及抗氧化能力下降等损伤性变化。