利用荧光探针直接测定线粒体活性氧的形成

目的与方法 :根据荧光探针 还原型二氯荧光素 (2 ',7' dichlorodihydrofluorescin ,DCFH)可与活性氧 (reactiveoxygenspecies ,ROS)反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素 (2 ',7' dichlorofluorecin ,DCF)的原理 ,设计了利用荧光分光光度计直接定量检测线粒体活性氧生成并可观察在各种实验条件下线粒体活性氧产生动态变化的方法。结果与结论 :线粒体在态 4呼吸状态下 ,DCF的荧光强度随时间呈线性增加 ,表明活性氧以恒定速率产生。将荧光强度随时间变化的数据点拟合 ,线性回归直线斜率与活性氧产生的速率呈正比 ,测定中加入叠氮钠和丙二酸可分别使线粒体活性氧产生增加和减少。DCF荧光强度增加速率与线粒体浓度在一定范围内呈线性关系。复管实验表明重复性良好。

线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用

目的:探讨线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用。方法:培养原代小鼠心肌成纤维细胞,细胞分为对照组(正常培养组),使用脂多糖刺激的引发组,使用脂多糖加三磷酸腺苷的激活组,以及再加用mito-TEMPO的干预组。通过MitoSOX染色检测各组细胞线粒体活性氧水平;通过蛋白质印迹法检测细胞内NLRP3、凋亡相关微粒样蛋白(ASC)、Pro-caspase-1、Pro-IL-1β及上清液中caspase-1 p20、IL-1β蛋白水平;用酶联免疫吸附法检测上清液中IL-1β蛋白的含量;使用免疫共沉淀法观察ASC与NLRP3蛋白的结合情况。结果:激活组细胞胞内线粒体活性氧水平较对照组明显增加(P<0.05),而干预组线粒体活性氧水平较激活组明显下降(P<0.05);心肌成纤维细胞经脂多糖刺激后,细胞内NLRP3和Pro-IL-1β蛋白较对照组明显升高(P<0.05),干预组中Pro-IL-1β较激活组明显升高(P<0.05)。激活组上清液中caspase-1 p20和IL-1β较对照组明显升高(P<0.05),干预组caspase-1 p20和IL-1β较激活组明显减少(P<0.05)。激活组NLRP3-ASC连接形成复合体,干预组NLRP3和ASC的结合减少。结论:心肌成纤维细胞中线粒体活性氧通过促进NLRP3蛋白和ASC蛋白的结合,使NLRP3炎症小体激活。

体外受精-胚胎移植妇女体内颗粒细胞线粒体活性和左旋肉碱水平的关系

目的探讨行IVF-ET妇女体内颗粒细胞线粒体活性与血浆、卵泡液左旋肉碱水平三者的关系,及其与年龄、优胚率、受精率及妊娠结局等的关系。方法应用流式细胞仪法测定颗粒细胞线粒体活性,柱前衍生-高效液相色谱法测定游离左旋肉碱水平。结果妊娠组颗粒细胞线粒体活性高于未妊娠组(P<0.05)。颗粒细胞线粒体活性与年龄呈负相关,与受精率、正常受精率、优胚率呈正相关(P<0.05)。妊娠组卵泡液左旋肉碱水平低于未妊娠组(P<0.05),血浆左旋肉碱水平与年龄呈正相关(P<0.05),血浆左旋肉碱水平与颗粒细胞线粒体活性呈负相关(P<0.05)。结论颗粒细胞线粒体活性的降低可能与年长妇女IVF-ET受精率低、胚胎质量差、妊娠结局差有关。妇女体内颗粒细胞线粒体活性下降时,血浆左旋肉碱水平可能代偿性增加。

百草枯诱导AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用

目的：探讨百草枯诱导小鼠肝细胞系AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用。方法：AML12细胞分别给予0、25、50、100、200、300μmol/L的百草枯处理。采用四甲基噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力;AnnexinV/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针经流式细胞仪测定细胞内活性氧水平;MitoSOX荧光探针检测线粒体活性氧变化;激光共聚焦测定JC-1探针荧光强度以检测线粒体膜电位变化。结果：与对照组比较,25~300μmol/L的百草枯处理后可以诱导AML12细胞活力下降,且具有剂量效应关系（r=-0.94,P〈0.01）;300μmol/L的百草枯作用24 h可明显诱导AML12细胞发生凋亡（P〈0.05）;25~300μmol/L百草枯处理24 h后细胞内活性氧依次增加（P〈0.05）,25~100μmol/L百草枯作用24 h时线粒体活性氧增加且呈剂量效应关系（r=0.98,P〈0.05）,而200和300μmol/L的百草枯作用24 h时线粒体活性氧水平降低（P〈0.05）。细胞活力下降与细胞内活性氧升高呈负相关（r=-0.90,P〈0.05）;晚期凋亡细胞的比例与细胞内活性氧呈正相关（r=0.96,P〈0.01）;JC-1检测线粒体膜电位结果显示,与对照组相比,300μmol/L的百草枯处理24 h时线粒体膜电位显著降低（P〈0.05）。结论：百草枯诱导AML12细胞凋亡过程主要由细胞整体水平的活性氧介导,提示线粒体活性氧并未直接参与百草枯诱导的肝损伤过程。

葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧的影响

目的观察不同浓度葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧(ROS)的影响。方法体外培养人腹膜间皮细胞株第5至10代(HMr SV5,DMEM/F12培养基含10%胎牛血清)用于实验研究。MTT检测细胞活力,实验分为7组:对照组、1.5%Dextrose组、2.5%Dextrose组、4.25%Dextrose组、线粒体呼吸链复合酶Ⅰ抑制剂Rotenone组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅱ抑制剂Thenoyltrifluoroacetone(TTFA)组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅲ抑制剂Antimycin A组(100μg/ml),应用流式细胞仪检测总线粒体、呼吸线粒体、超氧化线粒体。结果各组作用12h,1.5%Dextrose、2.5%Dextrose、4.25%Dextrose、Rotenone、Antimycin A组总线粒体、超氧化线粒体明显增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),TTFA组与对照组比较无明显差异。结论葡萄糖腹膜透析液作用下人腹膜间皮细胞线粒体活性氧产生增加。

温度对甜菜种子萌发速率和线粒体活性的影响

试验研究了不同温度和热处理时间对甜菜种子萌发速率和线粒体内CCO(细胞色素C氧化酶)和MDH(苹果酸脱氢酶)活性的影响及线粒体内可溶性蛋白的变化情况,旨在为为甜菜栽培提供科学依据。

芪参补气药茶清除线粒体活性氧研究

以黄芪和党参为原料,根据中医学原理组方制成芪参补气药茶(ACT),探索ACT清除线粒体活性氧作用及促进健康的机制。分别用Al Cl3比色法和硫酸苯酚法测定ACT的功能因子总黄酮、总糖及总多糖含量。以还原型辅酶Ⅰ/吩嗪硫酸甲酯(NADH/PMS)为超氧阴离子(O2·-)生成系统,过氧化氢(H2O2)/Fe2+体系为羟自由基(·OH)生成系统,分别用氮蓝四唑(NBT)还原法和Fenton反应显色法测定ACT清除O2·-及·OH的能力;用Na2S2O3滴定法测定ACT清除H2O2的能力。ACT总糖质量分数为(26±1.3)mg·m L-1,总多糖质量分数为(12.5±0.8)mg·m L-1,总黄酮质量分数为(121±8.5)μg·m L-1。ACT可一定程度上清除O2·-、·OH和H2O2。ACT具有温和的抗氧化作用,从而维持机体氧化与抗氧化平衡,这是ACT促进健康的潜在机制。

线粒体活性氧自由基抑制剂R(+) -普拉克索对脑缺血再灌注损伤大鼠JAK2-STAT3通路及炎性因子TNF-α的影响

目的研究线粒体活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)抑制剂R(+)-普拉克索[R(+)-PPX]对大脑中动脉梗塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠再灌注6 h后内源性酪氨酸激酶2(janus kinase 2,JAK2)-信号转换器和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路以及炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,探讨R(+)-PPX在再灌注早期保护脑缺血损伤的机制。方法将30只健康雄性SD大鼠依据数字表法随机分为假手术(Sham)组、MCAO组和R(+)-PPX组,每组10只。大鼠MCAO模型制作采用改良线栓法,并于右侧大脑中动脉缺血90 min后拔出线栓进行再灌注。术中监测大鼠肛温,使其维持在正常范围。于再灌注后6 h处死大鼠,迅速取脑,应用Western blotting法检测缺血侧脑组织p-JAK2蛋白水平,免疫荧光染色法检测脑组织冰冻切片缺血半暗带区p-STAT3、TNF-α的表达,采用超氧化物阴离子荧光探针(dihydroethidium,DHE)荧光染色法计数大鼠脑缺血半暗带区ROS阳性细胞数目,应用荧光双标法将ROS分别和p-STAT3、TNF-α在大鼠脑缺血半暗带区进行共定位,应用免疫荧光双标法对p-STAT3和TNF-α共定位。结果1)与Sham组相比,MCAO组大鼠再灌注6 h后,缺血侧脑组织p-JAK2蛋白水平明显升高(P<0.05)。R(+)-PPX组大鼠缺血侧脑组织p-JAK2蛋白水平比MCAO组显著减少(P<0.05)。2)Sham组大鼠脑内未见p-STAT3阳性细胞。MCAO组大鼠再灌注6 h脑缺血半暗带区p-STAT3阳性细胞数比Sham组显著增加(P<0.05)。R(+)-PPX组大鼠缺血半暗带区p-STAT3阳性细胞数比MCAO组显著减少(P<0.05)。且ROS与p-STAT3在大鼠脑缺血半暗带区共定位。3)Sham组大鼠脑内未见TNF-α阳性细胞。MCAO组大鼠再灌注6 h脑缺血半暗带区TNF-α阳性细胞数比Sham组显著增加(P<0.05)。R(+)-PPX组大鼠缺血半暗带区TNF-α阳性细胞数比MCAO组显著减少(P<0.05)。且ROS与TNF-α在大鼠脑缺血半暗带区共定位。4)MCAO组大鼠再灌注6 h脑缺血半暗带区内,p-STAT3与TNF-α免疫荧光染色共定位。结论线粒体ROS抑制剂R(+)-PPX可能通过抑制脑缺血再灌注6 h大鼠缺血脑组织JAK2-STAT3通路激活,降低TNF-α的水平,从而在脑缺血再灌注损伤早期发挥神经保护作用。

线粒体活性氧在氟化钠诱导PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化中的作用

旨在探究氟化钠(NaF)对PC12细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响以及线粒体活性氧(mtROS)/核因子κB(NF-κB)信号在其中的调节作用。以PC12细胞为研究对象,分别转染NLRP3 siRNA、孵育NF-κB通路抑制剂PDTC(50μmol/L)或mtROS清除剂Mito-TEMPO(500μmol/L),并给予质量浓度为80 mg/L的NaF刺激24 h。通过CCK-8法检测细胞存活率,mitoSOX荧光探针检测mtROS水平,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA法检测白细胞介素(IL)-18和IL-1β分泌,Western blot检测磷酸化NF-κB p65、磷酸化I-κB激酶β(iKKβ)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)p20蛋白表达,免疫荧光测定NF-κB p65的入核。与NaF组比较,NLRP3 siRNA干预显著降低了NaF暴露引起的NLRP3和Caspase-1 p20蛋白表达水平升高(P<0.01),缓解了NaF诱导的细胞存活率降低(P<0.01)、减弱了培养液上清中LDH活性以及IL-1β和IL-18的分泌水平(P<0.01)。与NaF组比较,PDTC+NaF组细胞中p-NF-κB p65和p-iKKβ水平降低(P<0.01),NF-κB p65的入核被阻断。此外,Mito-TEMPO干预后,NaF处理细胞中的mtROS、p-NF-κB p65、p-iKKβ、NLRP3、IL-1β和IL-18水平均降低(P<0.01)。NaF引起的PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化与mtROS水平升高有关。

鼠尾草酸影响线粒体功能抑制破骨细胞分化

背景:鼠尾草酸是在迷迭香中发现的一种生物活性化合物,已被证明可减少炎症和活性氧,但在破骨细胞分化进程中的作用机制尚不明确。目的:探讨鼠尾草酸对破骨细胞活化、活性氧产生及线粒体功能的影响。方法:体外提取培养小鼠来源的原代骨髓源巨噬细胞,使用CCK-8细胞活力实验检测不同浓度(0,10,15,20,25和30μmol/L)鼠尾草酸对骨髓源巨噬细胞的增殖和毒性作用,筛选出安全作用浓度。将骨髓源巨噬细胞按照浓度梯度分组培养,核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞5-7 d后,分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色、F-actin染色、H2DCFDA探针和线粒体活性氧、Mito-Tracker荧光检测,观察鼠尾草酸对破骨细胞分化和功能的影响;通过Western Blot及RT-PCR实验检测鼠尾草酸对核因子κB受体活化因子配体诱导的丝裂原激活蛋白激酶信号通路上下游基因和蛋白的影响。结果与结论:①抗酒石酸酸性磷酸酶和F-actin染色显示:鼠尾草酸以浓度依赖性地抑制体外破骨细胞分化及细胞骨架肌动蛋白环形成,其中鼠尾草酸30μmol/L组的抑制作用最显著;与其他干预时期相比,鼠尾草酸在破骨分化的早期(第1-3天)抑制作用最显著;②H2DCFDA探针和线粒体活性氧、Mito-Tracker荧光显示:鼠尾草酸抑制细胞活性氧和线粒体内活性氧的产生,同时减少线粒体膜电位,影响线粒体的功能;③Western Blot及RT-PCR结果显示:鼠尾草酸可抑制与破骨分化相关的NFATc1、CTSK、MMP9、C-fos蛋白的表达,下调与破骨分化相关的NFATc1、Atp6vod2、ACP5、CTSK和C-fos基因的表达;鼠尾草酸还可以增强抗氧化酶蛋白的表达,减少破骨分化过程中活性氧的产生;④鼠尾草酸抑制P38/ERK/JNK蛋白的磷酸化修饰,通过激活MAPK信号通路抑制骨髓源巨噬细胞破骨细胞分化。

CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察

目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养。利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca^(2+)浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca^(2+)及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01)。结论CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡。

线粒体调控肿瘤免疫的研究进展

肿瘤细胞通过改变自身代谢以适应能量和生物合成的需求。线粒体作为肿瘤细胞代谢重编程的关键细胞器,其功能异常是癌症发生和进展的主要驱动因素。线粒体动力学和能量代谢途径的改变对免疫细胞活化、增殖和分化至关重要,肿瘤微环境通过诱导免疫细胞线粒体代谢重编程和线粒体动力学变化,影响肿瘤浸润免疫细胞的活化和功能,进而促进肿瘤免疫抑制微环境形成;线粒体应激介导的线粒体DNA泄露可通过激活多条天然免疫信号通路,如cGAS-STING、TLR9和NLRP3,在宿主抗肿瘤免疫响应和肿瘤免疫抑制微环境的塑造中扮演复杂的调控角色,线粒体DNA介导的免疫原性细胞死亡是目前极具潜力的抗肿瘤免疫治疗手段;线粒体活性氧作为肿瘤发生的重要媒介,通过改变肿瘤微环境中免疫细胞组成,推动肿瘤免疫抑制微环境形成。本文围绕线粒体生物学与抗肿瘤免疫应答之间的关系,从多个角度探讨线粒体在肿瘤-宿主互作中的核心作用,以期为开发靶向线粒体的抗肿瘤免疫治疗策略提供参考。

几种不同提取线粒体的方法对线粒体含量及活性的影响

目的比较几种不同的提取线粒体的方法对线粒体蛋白浓度及活性的影响。方法采用蔗糖密度梯度离心法、普利莱试剂盒提取方法和Pierce线粒体提取试剂盒方法分别提取线粒体,测定提取得到的线粒体蛋白浓度、污染情况和活性。结果同样数量的细胞采用普利莱法提取得到的线粒体蛋白浓度高于其他2种方法所提取的线粒体蛋白浓度(P<0.05);采用Westernblotting的方法测定提取的线粒体发现采用普利莱法提取得到的线粒体中胞质蛋白污染较其他2种方法提取得到的线粒体少,线粒体纯度高;测定线粒体中细胞色素C和ATP含量后发现同样采用普利莱法提取得到的线粒体活性最高。结论普利莱法提取线粒体的方法优于蔗糖密度梯度离心法和Pierce线粒体提取试剂盒方法。

线粒体活性氧与肿瘤的研究进展

线粒体活性氧（mitochondrial reactive oxygen species,mROS）是线粒体电子传输链的有毒副产品,同时mROS可作为一种信号分子促进细胞生长。肿瘤细胞内某些致癌基因激活,抑癌基因受抑制及缺氧可诱导mROS升高,从而激活与肿瘤细胞生存转移、代谢转变和血管形成相关的信号通路。

白藜芦醇对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞线粒体活性氧产生及内质网的影响

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞(LECs)凋亡、线粒体活性氧产生以及内质网表达的影响。方法:用含30 mmol·L-1葡萄糖浓度的培养基体外培养LECs,随后加入25 mg·L-1Res共培养48 h。流式细胞术检测LECs细胞凋亡情况和线粒体膜电位的变化。激光共聚焦显微镜观察线粒体活性氧变化情况,并用免疫组化法检测内质网表达。结果:在高糖培养条件下,与对照组相比,LECs死亡率明显增高,线粒体膜电位降低,活性氧增多。内质网阳性率明显下降。经Rev干预后,细胞凋亡率显著降低,线粒体膜电位和内质网阳性率均升高,活性氧产生明显减少(P<0.05)。结论:白藜芦醇能在一定程度上减轻糖尿病性白内障大鼠晶状体凋亡的发生并维持正常细胞器功能,从而延缓白内障的发生和发展。

基于线粒体凋亡途径研究黄斑变性方对蓝光照射的视网膜色素上皮细胞的保护作用

目的研究黄斑变性方对蓝光损伤的视网膜色素上皮细胞(human retinal pigmental epithelial cell,hRPE)凋亡以及线粒体膜电位、线粒体活性氧表达的影响,阐释黄斑变性方对蓝光损伤的hRPE细胞的保护作用及可能的机制,为临床应用黄斑变性方治疗年龄相关性黄斑变性提供理论依据。方法黄斑变性方由熟地、山茱萸、山药、茯苓、白术、当归、黄精、枸杞子等组成,具有补益肝肾、养阴明目的功效,但其具体作用机制尚不明确。本研究采用血清药理学方法,分为A组(空白对照组)、B组(蓝光照射未加中药组)、C组(中药低剂量组,10%含药血清处理)、D组(中药中剂量组,20%含药血清处理)、E组(中药高剂量组,30%含药血清处理)5个组,不同浓度的含药血清分别干预蓝光照射的hRPE细胞,流式细胞仪检测细胞的凋亡及线粒体膜电位、线粒体活性氧表达的影响。结果经黄斑变性方干预后的细胞,A组空白对照组、B组蓝光照射未加中药组、C组中药低剂量组、D组中药中剂量组、E组中药高剂量组,hRPE细胞凋亡数分别为(1.09±0.71)%、(18.94±4.32)%、(4.76±1.76)%、(2.29±1.34)%和(1.17±0.57)%,各组比较差异有统计学意义(F=23.723,P<0.01),两两比较差异有显著统计学意义(P<0.01),且hRPR细胞凋亡率随含药血清浓度的增加而逐渐减少,具有浓度依赖性。经黄斑变性方干预的细胞线粒体活性氧阳性细胞率在C组中药低剂量组、D组中药中剂量组、E组中药高剂量组分别为(3.22±0.13)%,(2.96±0.20)%,(1.91±0.17)%,而未经含药血清干预的B组单纯蓝光照射组细胞线粒体活性氧阳性细胞率为(5.43±0.27)%,各组比较差异有统计学意义(F=25.245,P<0.01),两两比较差异有统计学意义(P<0.01);在经黄斑变性方含药血清低剂量、中剂量和高剂量干预后,各组细胞线粒体膜电位阳性细胞百分率分别为(76.56±1.13)%,(80.31±2.20)%和(95.32±3.17)%,而未经含药血清干预的细胞线粒体膜电位阳性的细胞率为(69.89±2.27)%,各组比较差异有统计学意义(F=47.834,P<0.01),两两比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄斑变性方可通过线粒体凋亡途径保护蓝光照射引起的视网膜色素上皮细胞的凋亡,我们的研究结果为黄斑变性方的临床应用提供了理论依据。

黄芪对大鼠脑外伤后脑组织线粒体酶活性影响的研究

目的 探讨黄芪对大鼠创伤性脑损伤后脑组织线粒体酶活性水平的影响。方法 建立大鼠自由落体脑挫裂伤模型 ,伤后立即腹腔注射黄芪注射液 ,采用生化检测的方法分别测定治疗后 4小时、2 4小时和 4 8小时及各自的对照组大鼠脑组织线粒体ATP酶和超氧化物歧化酶 (SOD)活性以及丙二醛 (MDA)水平。结果 黄芪治疗后 2 4小时和 4 8小时大鼠脑组织线粒体ATP酶和SOD活性均高于各自时间点对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,而MDA水平则明显低于各自对照组 (P <0 .0 1)。结论 黄芪可以通过影响线粒体功能而减轻大鼠创伤性脑损伤后的继发性脑损害 。

模拟高原缺氧大鼠脑线粒体UCP活性与含量的变化及其对线粒体能量合成的影响

目的观察模拟高原暴露大鼠脑线粒体UCP活性和含量的改变,探讨其对线粒体能量合成功能的影响。方法健康成年SD大鼠置于模拟海拔5000m低压舱中,23h/d,连续3d。差速离心法分离大鼠脑组织线粒体,Clark氧电极法测定线粒体的呼吸活性,罗丹明123法测定线粒体膜电位,高压液相色谱法测定腺苷酸的含量,用3H-GTP结合法测定线粒体UCP活性及含量。结果高原缺氧导致大鼠脑线粒体解偶联蛋白与3H-GTP结合的解离常数Kd下降37%,结合3H-GTP的最大量Bmax增加2.9倍(P<0.01);线粒体的呼吸ST3氧耗减为对照组的83.1%,而ST4则升高28%,RCR降为对照的66.67%(P<0.01);相关分析显示,ST4与反映UCP活性的Kd呈显著负相关,而与UCP含量Bmax呈显著正相关(P<0.01);同时线粒体内ATP含量仅为对照组的58.4%(P<0.01),线粒体膜电位显著下降(P<0.01)。结论模拟高原缺氧暴露可增加脑线粒体解偶联蛋白活性和含量,揭示缺氧时线粒体的呼吸氧耗及能量的生成的改变与关系。