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基于线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(COI)序列的猪和兔四个疥螨分离株的系统发育关系分析 被引量:4
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作者 古小彬 杨光友 +1 位作者 赖松家 王帅 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期465-472,共8页
为了探讨兔疥螨分离株和猪疥螨分离株的分类地位,采用PCR技术首次扩增了分离自中国猪和兔的4个疥螨分离株的线粒体细胞色素氧化酶I(COI)基因,并与GenBank中注册的14个国外疥螨分离株的同源基因进行了比较。序列分析结果显示:扩增的4个... 为了探讨兔疥螨分离株和猪疥螨分离株的分类地位,采用PCR技术首次扩增了分离自中国猪和兔的4个疥螨分离株的线粒体细胞色素氧化酶I(COI)基因,并与GenBank中注册的14个国外疥螨分离株的同源基因进行了比较。序列分析结果显示:扩增的4个疥螨株COI基因长度均为1427bp,序列间无插入、缺失,A+T含量(73%)明显高于G+C含量(27%),碱基组成存在明显偏移。猪和兔的4个疥螨分离株间的COI基因同源性较高(99.1%~100.0%),它们与澳大利亚人疥螨株、国外动物疥螨株的同源性范围为98.4%~99.6%。在构建的NJ树中,分离自中国猪和兔的4个疥螨分离株同澳大利亚人疥螨分离株、国外动物疥螨分离株亲缘关系较近。根据疥螨COI基因同源性分析和系统树构建结果,我们认为分离自中国猪和兔的4个疥螨分离株与澳大利亚人疥螨分离株以及国外的动物疥螨分离株均应属于同一个种。 展开更多
关键词 疥螨 线粒体细胞色素氧化酶1(COI) 序列分析 系统发育分析 中国
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益肾健身精对老年大鼠线粒体细胞色素氧化酶活力的影响 被引量:1
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作者 张波 张克纯 +1 位作者 汤军 阳力争 《湖南中医药导报》 2002年第10期627-628,共2页
目的 :研究益肾健身精延缓衰老的机理。方法 :将大鼠分为 3组 ,实验组为 2 0月龄大鼠饲喂混有一定量的益肾健身精饲料 80天 ,老龄对照组为 2 0月龄大鼠饲喂一般饲料 80天 ,青年对照组为 2月龄大鼠饲喂一般饲料 80天 ,然后取肝脏测定其... 目的 :研究益肾健身精延缓衰老的机理。方法 :将大鼠分为 3组 ,实验组为 2 0月龄大鼠饲喂混有一定量的益肾健身精饲料 80天 ,老龄对照组为 2 0月龄大鼠饲喂一般饲料 80天 ,青年对照组为 2月龄大鼠饲喂一般饲料 80天 ,然后取肝脏测定其线粒体的细胞色素氧化酶活性。结果 :2月龄对照组大鼠肝线粒体细胞色素氧化酶活性为 2 5 .5 4± 0 .0 8,2 0月龄对照组酶活性为 2 1.5 1± 0 .19,2 0月龄对照组酶活性为 2 1.88± 0 .18。结论 :大鼠线粒体细胞色素氧化酶活性随增龄而降低 。 展开更多
关键词 益肾健身精 老年大鼠 线粒体细胞色素氧化酶 活力 抗衰老药 中成药
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藏獒线粒体细胞色素氧化酶亚基基因序列的测定与犬科动物系统发育分析
3
作者 李隐侠 钱勇 曹少先 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1246-1252,共7页
旨在研究藏獒的起源、分类地位,及其与世界上其他大型家犬品种间的系统发育关系,根据家犬线粒体基因组序列设计引物,扩增藏獒线粒体3个细胞色素氧化酶亚基基因(COⅠ、COⅡ和COⅢ)的全序列,并以大熊猫为外类群,运用邻接法和最大似然法分... 旨在研究藏獒的起源、分类地位,及其与世界上其他大型家犬品种间的系统发育关系,根据家犬线粒体基因组序列设计引物,扩增藏獒线粒体3个细胞色素氧化酶亚基基因(COⅠ、COⅡ和COⅢ)的全序列,并以大熊猫为外类群,运用邻接法和最大似然法分析包括藏獒在内的20个犬科动物的系统发育关系。结果发现,藏獒线粒体基因组中COⅠ、COⅡ和COⅢ长度分别为1 545、684和784 bp,分别编码514、227和261个氨基酸;系统发育分析发现,藏獒、12个家犬品种与灰狼聚在一起,说明藏獒与家犬亚种内其他家犬品种一样起源于灰狼;家犬亚种内的13个家犬品种可以分为3大类,藏獒与圣伯纳犬、英国老式牧羊犬、兰伯格犬聚为一类,说明藏獒与圣伯纳犬、英国老式牧羊犬、兰伯格犬的亲缘关系较近,从分子水平上证实圣伯纳犬等大型家犬品种可能含有藏獒的血统。由此得出结论:藏獒起源于灰狼,在动物学分类地位上属于食肉目、犬科、犬属、狼种、家犬亚种;圣伯纳犬等大型家犬品种在品种形成过程中可能引入了藏獒的血统。 展开更多
关键词 藏獒 犬科 线粒体细胞色素氧化酶亚基 起源 分类地位 系统发育
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基于部分线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(mtCOI)DNA序列的6种蝙蝠(翼手目:蝙蝠科)的分子系统进化关系 被引量:5
4
作者 何淑艳 敖磊 +1 位作者 李娜 谷晓明 《四川动物》 CSCD 北大核心 2007年第3期520-524,共5页
对贵州5种蝙蝠科蝙蝠的部分线粒体细胞色素氧化酶亚基ⅠDNA序列进行了测定,并结合从Genbank获得的爪哇伏翼的相应序列,以Pteropus dasymallus,P.scapulatus,Rousettus aegyptiacus为外群,运用贝叶斯法(Bayes-ian),最大似然法(Maximum Li... 对贵州5种蝙蝠科蝙蝠的部分线粒体细胞色素氧化酶亚基ⅠDNA序列进行了测定,并结合从Genbank获得的爪哇伏翼的相应序列,以Pteropus dasymallus,P.scapulatus,Rousettus aegyptiacus为外群,运用贝叶斯法(Bayes-ian),最大似然法(Maximum Likelihood,ML)分析了这6种蝙蝠科蝙蝠的分子系统进化关系。结果表明:在贝叶斯,ML树中,这6种蝙蝠科的蝙蝠可分为3个分支:亚洲长翼蝠是第1个独立出来的分支;白腹管鼻蝠是继亚洲长翼蝠之后第2个分离出来的分支;第3个分支又分为两支,一支由大鼠耳蝠和小鼠耳蝠组成,另一支由南蝠和爪哇伏翼组成,支持将这4种蝙蝠同归于蝙蝠亚科的结论,从一定程度上否定了鼠耳蝠属和管鼻蝠亚科之间的姐妹类群关系,也不支持将鼠耳属提升为亚科。 展开更多
关键词 系统发生关系 线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(mtCOI) 蝙蝠科
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颞叶癫痫大鼠海马线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅲ和Ⅳ表达的变化 被引量:5
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作者 高静 陈雯 +6 位作者 张同霞 王小花 戴廷军 姚红 赵秀鹤 迟兆富 单培彦 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第8期817-820,824,共5页
目的:探讨癫痫对大鼠海马线粒体细胞色素氧化酶(COX)的mtDNA和nDNA编码亚基Ⅲ、Ⅳ表达的影响。方法:将成年雄性Wistar大鼠40只随机分为生理盐水对照组,癫痫持续状态(SE)后急性期(3 h)、静止期(7 d)、慢性期(45 d)组和注射匹鲁卡品(PILO... 目的:探讨癫痫对大鼠海马线粒体细胞色素氧化酶(COX)的mtDNA和nDNA编码亚基Ⅲ、Ⅳ表达的影响。方法:将成年雄性Wistar大鼠40只随机分为生理盐水对照组,癫痫持续状态(SE)后急性期(3 h)、静止期(7 d)、慢性期(45 d)组和注射匹鲁卡品(PILO)但未出现SE组,每组8只。荧光实时定量PCR和West-ern blot分别检测海马线粒体COXⅢ、ⅣmRNA和蛋白的表达。结果:COXⅢmRNA和蛋白在SE后3 h表达明显升高(P<0.001,P<0.01),7 d时降到对照水平,45 d显著降低(P<0.001,P<0.01);COXⅣmRNA和蛋白在3 h时表达较对照组升高,但差异无统计学意义(P>0.05),7 d和45 d时下降至对照水平。注射PILO但无SE组与对照组结果类似。结论:颞叶癫痫海马cox功能紊乱与痫性发作相关,线粒体编码的基因更易受痫性发作的影响。 展开更多
关键词 细胞色素氧化酶 癫痫 海马 线粒体 大鼠 Wistar
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我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ的DNA序列差异 被引量:5
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作者 王戎疆 万宏 +1 位作者 雷光春 李绍文 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期775-779,共5页
通过对我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ (COⅡ )DNA部分序列的比较分析 ,研究了二尾蛱蝶的遗传分化以及台湾海峡对其分化的影响。台湾和大陆二尾蛱蝶的COⅡ基因有0 75 %~ 1%的差异 ,估算其分化时间大约在 37 5~ 5 0万年... 通过对我国不同地区二尾蛱蝶线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ (COⅡ )DNA部分序列的比较分析 ,研究了二尾蛱蝶的遗传分化以及台湾海峡对其分化的影响。台湾和大陆二尾蛱蝶的COⅡ基因有0 75 %~ 1%的差异 ,估算其分化时间大约在 37 5~ 5 0万年前 ,台湾海峡可能有效地阻隔了两岸二尾蛱蝶的基因交流 ;台湾和大陆二尾蛱蝶间明显的基因差异可能与它们分属不同亚种有关 ,而大陆上不同地区的二尾蛱蝶也有较大的基因差异 ,推测大陆二尾蛱蝶可能存在 2个亚种。 展开更多
关键词 二尾蛱蝶 细胞色素氧化酶 遗传分化 台湾海峡
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知柏地黄汤对解脲脲原体感染大鼠生精细胞线粒体细胞色素氧化酶的影响 被引量:4
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作者 郭军华 李迎秋 +2 位作者 郭炫佐 刘朝圣 何清湖 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期722-727,共6页
目的:探讨解脲脲原体(UU)感染对大鼠生精细胞线粒体细胞色素氧化酶(COX)的影响以及知柏地黄汤对其的干预作用。方法:4~5月龄SD雄性大鼠40只,随机抽取30只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型。剩余10只同步注射生理盐水作为正常组... 目的:探讨解脲脲原体(UU)感染对大鼠生精细胞线粒体细胞色素氧化酶(COX)的影响以及知柏地黄汤对其的干预作用。方法:4~5月龄SD雄性大鼠40只,随机抽取30只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型。剩余10只同步注射生理盐水作为正常组,于接种后的第7天取睾丸穿刺液运用培养法检测UU,判断造模成功否。造模成功后,UU感染模型大鼠再随机分成模型组、知柏地黄汤组、阿奇霉素组。知柏地黄汤组给药量为1 g/(kg·d),阿奇霉素组给药量为0.105 mg/(kg·d),正常组、模型组给予相同剂量的生理盐水。以上各组均灌胃给药,每日1次,连续给药21 d(1 ml/d)。采用颈椎脱臼法处死大鼠,取附睾组织,采用机械分离法分离精子细胞,采用彩色精子动态检测系统检测精子运动参数;取睾丸组织,采用免疫组化法(DAB法)检测COX活性,RT-PCR法检测COXⅠ、ⅡmRNA表达。结果:模型组大鼠a级精子,b级精子,直线速度,平均速度,COXⅠ、ⅡmRNA表达均明显低于正常组(P<0.05,P<0.01)。经治疗后,知柏地黄汤组和阿奇霉素组a级精子、b级精子、直线速度、曲线速度、平均速度水平及COXⅠmRNA表达均提高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),分别为a级精子[(1.11±0.30)、(0.60±0.19)、(0.07±0.03)%]、b级精子[(2.40±0.59)、(1.32±0.27)、(0.35±0.13)%]、直线速度[(12.11±1.62)、(11.47±1.21)、(6.78±1.05)μm/s]、曲线速度[(54.30±2.35)、(45.75±1.64)、(38.10±7.65)μm/s]、平均速度[(18.40±1.27)、(16.69±1.02)、(10.02±1.08)μm/s]、COXⅠmRNA[(1.86±0.30)、(1.74±0.17)、(0.93±0.10)%],而两组均不能提高COX活性和COXⅡmRNA表达,知柏地黄汤组在提高a级精子、b级精子、曲线速度、平均速度方面效果优于阿奇霉素组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:UU感染能够降低大鼠a级精子,b级精子,直线速度,平均速度水平,COXⅠ、ⅡmRNA表达。知柏地黄汤和阿奇霉素对其都有治疗作用,且知柏地黄汤的效果优于阿奇霉素。精子活力的提高可能与COX活性无关。COX活性可能与COXⅡmRNA有关,与COXⅠmRNA表达无关。 展开更多
关键词 解脲脲原体 细胞色素氧化酶 知柏地黄汤 MRNA表达
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灵芝孢子和L-NNA对脊髓损伤后背核线粒体细胞色素氧化酶活性的影响 被引量:4
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作者 马钦桃 曾园山 +1 位作者 张伟 陈穗君 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期399-403,共5页
目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用对大鼠脊髓半横断后受损伤的背核线粒体细胞色素氧化酶活性的影响。方法将20只SD成年雌性大鼠(200-250g)行右侧T11脊髓半横断30d后,对受损伤脊髓做细胞色素氧化酶酶组化染色;用... 目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用对大鼠脊髓半横断后受损伤的背核线粒体细胞色素氧化酶活性的影响。方法将20只SD成年雌性大鼠(200-250g)行右侧T11脊髓半横断30d后,对受损伤脊髓做细胞色素氧化酶酶组化染色;用图像分析方法检测L1脊髓段背核线粒体细胞色素氧化酶活性的变化,用酶组化电镜技术观察L1脊髓段背核细胞色素氧化酶活性的分布位置。结果与对照组相比,L-NNA组和灵芝孢子组L1脊髓损伤侧背核线粒体细胞色素氧化酶活性有所提高,灵芝孢子+L-NNA组损伤侧背核线粒体细胞色素氧化酶活性最大。各组L1脊髓背核细胞色素氧化酶活性均出现在线粒体内,具有细胞色素氧化酶活性的线粒体存在所有神经元胞体及其树突和轴突内,也存在于神经胶质细胞胞体及其突起内。结论灵芝孢子和L-NNA均可提高大鼠脊髓半横断后受损伤的脊髓背核线粒体细胞色素氧化酶的活性,两者联合应用更能提高受损伤的背核线粒体细胞色素氧化酶的活性。 展开更多
关键词 灵芝孢子 N-硝基左旋精氨酸甲酯 脊髓半横断 背核 线粒体 细胞色素氧化酶
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不同中医证型十二指肠球部溃疡线粒体细胞色素氧化酶电镜观察 被引量:2
9
作者 金友 刘友章 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第7期1593-1596,I0005,共5页
目的:运用电镜酶组织细胞化学的方法,探讨十二指肠球部溃疡中医证型与线粒体细胞色素氧化酶相关性。方法:选择十二指肠球部溃疡患者脾气虚证、胃热证及正常组各5例,电镜下观察线粒体结构及细胞色素氧化酶分布情况,并运用体视学方法进行... 目的:运用电镜酶组织细胞化学的方法,探讨十二指肠球部溃疡中医证型与线粒体细胞色素氧化酶相关性。方法:选择十二指肠球部溃疡患者脾气虚证、胃热证及正常组各5例,电镜下观察线粒体结构及细胞色素氧化酶分布情况,并运用体视学方法进行图像分析。结果:与正常组比较,脾气虚组患者线粒体数量减少,线粒体结构有明显的损伤,壁细胞线粒体面积Am、周长Bm减小(P<0.05),δm、Ae、Rme的值均减小(P<0.01);胃热证组患者Am、Be与正常组比较没有显著性意义(P>0.05),Ae、Rme减小(P<0.01);脾气虚组Am、Bm、Ae、Be、Rme均低于胃热组(P<0.01)。结论:十二指肠球部溃疡中医不同证型与线粒体细胞色素氧化酶具有相关性。 展开更多
关键词 十二指肠球部溃疡 中医证型 线粒体 细胞色素氧化酶
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乳腺癌线粒体细胞色素氧化酶-Ⅱ基因突变检测 被引量:1
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作者 闫斌 韩丽红 于跃利 《当代医学》 2011年第1期42-44,共3页
目的研究乳腺癌患者线粒体DNA(mtDNA)细胞色素氧化酶-Ⅱ区基因突变情况。方法采用聚合酶链反应和DNA测序相结合的方法,对20例乳腺癌患者癌组织和和癌旁组织线粒体DNA的细胞色素氧化酶-Ⅱ区扩增并测序,检测突变情况。结果 20例乳腺癌患... 目的研究乳腺癌患者线粒体DNA(mtDNA)细胞色素氧化酶-Ⅱ区基因突变情况。方法采用聚合酶链反应和DNA测序相结合的方法,对20例乳腺癌患者癌组织和和癌旁组织线粒体DNA的细胞色素氧化酶-Ⅱ区扩增并测序,检测突变情况。结果 20例乳腺癌患者癌组织中共有4例mtDNA细胞色素氧化酶-Ⅱ区存在突变,癌旁组织中共有2例mtDNA细胞色素氧化酶-Ⅱ区存在突变。在20例乳腺癌组织中共有4个位点发生了突变,其中引起编码氨基酸改变的突变有1个。结论 mtDNA细胞色素氧化酶-Ⅱ区突变与乳腺癌发生、发展有相关性。 展开更多
关键词 线粒体DNA(mtDNA) 基因突变 细胞色素氧化酶-Ⅱ 乳腺癌
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桑天牛线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因的PCR反应体系优化 被引量:1
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作者 马向超 黄大庄 +1 位作者 张爽 任志彬 《河北林果研究》 2010年第4期384-388,共5页
建立一整套适用于研究桑天牛线粒体细胞色素氧化酶I(mtDNA CO I)基因的PCR反应体系,研究不同地理分布的桑天牛遗传多样性。通过L_(16)(4~5)正交组合试验和单因素梯度试验对缓冲液(Mg^(2+))、dNTP、随机引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA的浓... 建立一整套适用于研究桑天牛线粒体细胞色素氧化酶I(mtDNA CO I)基因的PCR反应体系,研究不同地理分布的桑天牛遗传多样性。通过L_(16)(4~5)正交组合试验和单因素梯度试验对缓冲液(Mg^(2+))、dNTP、随机引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA的浓度和退火温度、循环次数等影响PCR扩增的重要因素进行优化。试验结果表明,50μL反应体系及反应程序中各因素优化组合为:缓冲液(含Mg^(2+))0.9mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,随机引物0.44μnol/L,TaqDNA聚合酶3.0U,模板DNA75ng;退火温度47℃,循环次数35次。 展开更多
关键词 桑天牛 细胞色素氧化酶Ⅰ基因 PCR反应体系 正交组合 单因素
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氰化钾对人精子线粒体细胞色素氧化酶作用的研究
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作者 柏惠 郑英 +2 位作者 张健宁 周作民 沙家豪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第6期458-459,共2页
目的 了解氰化钾 (KCN)对人精子线粒体内细胞色素氧化酶的阻断作用。方法 用不同浓度的 KCN作用于活力正常的精子 ,阻断精子内细胞色素氧化酶的活性 ,观察其活性被阻断的情况。结果 低至 8.3× 10 - 3mol/L 的 KCN即可完全阻断... 目的 了解氰化钾 (KCN)对人精子线粒体内细胞色素氧化酶的阻断作用。方法 用不同浓度的 KCN作用于活力正常的精子 ,阻断精子内细胞色素氧化酶的活性 ,观察其活性被阻断的情况。结果 低至 8.3× 10 - 3mol/L 的 KCN即可完全阻断精子内的细胞色素氧化酶。结论 实验结果提示 ,8.3× 10 - 3mol/L 的 KCN可能是阻断精子线粒体内细胞色素氧化酶活性的最低浓度。 展开更多
关键词 精子 细胞色素氧化酶 氰化钾 线粒体
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骨髓增生异常综合征与线粒体细胞色素氧化酶基因突变初探
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作者 侯理 刘霆 孟文彤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期809-812,共4页
骨髓增生异常综合征(MDS)与线粒体基因突变的关系是近年来血液肿瘤发病机制研究的热点。本研究旨在分析MDS患者线粒体细胞色素氧化酶基因COI和COII是否存在不同于正常组织的突变,这些突变是否为"热点突变"。18例MDS患者纳入... 骨髓增生异常综合征(MDS)与线粒体基因突变的关系是近年来血液肿瘤发病机制研究的热点。本研究旨在分析MDS患者线粒体细胞色素氧化酶基因COI和COII是否存在不同于正常组织的突变,这些突变是否为"热点突变"。18例MDS患者纳入本研究,患者年龄20-70岁。18例中RA2例,RCMD 3例,RAEB 7例,AML(MDS转化)5例,MPD/MDS 1例。分别提取MDS患者骨髓单个核细胞和颊粘膜细胞的总DNA,用PCR方法扩增线粒体细胞色素氧化酶基因COI和COII的高度突变区,以获得528 bp(7181-7709)基因片段,产物经纯化后双向测序,将结果与DNA文库标准序列和患者自身正常组织对应序列比较,对突变结果进行分析。结果表明:所检测的18例患者线粒体细胞色素氧化酶基因COI和COII中高度突变区528 bp的片段中共发现3个单核苷酸序列突变,分别为7674 T→C,7353 A→G和7702 Ins G。前2个突变存在于相同个体的颊黏膜细胞和骨髓细胞,导致编码的异亮氨酸改变为蛋氨酸,蛋氨酸改变为缬氨酸。7702 Ins G插入仅见于骨髓细胞,导致移码,这可能与MDS细胞突变有关。结论:本研究病例中没有发现文献报道的细胞色素氧化酶基因COI和COII"热点突变",但发现3个新突变,提示mtDNA突变在MDS发病中仍然是一个异质性很大的复杂现象,可能是疾病过程中的一个前期或伴随现象。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 线粒体DNA 细胞色素氧化酶 基因突变
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极谱法测量大鼠脑线粒体细胞色素氧化酶活性的改良方法 被引量:2
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作者 谭小玲 柳君泽 《中国局解手术学杂志》 2001年第3期291-292,共2页
细胞色素氧化酶,即呼吸链复合体Ⅳ,它位于呼吸链的最末端,催化细胞色素C(cytochrome C,cyt.c)的氧化,同时驱动ATP的合成,它也是线粒体的标志酶,其酶活性的发挥对于维持线粒体结构和功能以及细胞能量的产生有非常重要的意义.虽然国内外... 细胞色素氧化酶,即呼吸链复合体Ⅳ,它位于呼吸链的最末端,催化细胞色素C(cytochrome C,cyt.c)的氧化,同时驱动ATP的合成,它也是线粒体的标志酶,其酶活性的发挥对于维持线粒体结构和功能以及细胞能量的产生有非常重要的意义.虽然国内外有关细胞色素氧化酶活性测量的报道很多,但运用较广的方法主要有三种:紫外分光光度法、极谱法和组织化学法,紫外分光光度法根据cyt.c的还原型和氧化型有不同的光吸收这一原理,通过测量还原型cyt.c的氧化率来反映细胞色素氧化酶的活性;极谱法是根据还原型cyt.c被酶氧化的同时消耗O2这一原理,通过测量反应体系中氧耗率来反映酶活[1]. 展开更多
关键词 极谱法 测量 线粒体细胞色谱氧化酶活性
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心肌线粒体细胞色素氧化酶的图象分析 被引量:1
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作者 真炳攸 王厚大 +3 位作者 张留保 周旭珊 张云鹏 吴建杨 《电子显微学报》 CAS CSCD 1990年第3期126-126,共1页
成年大鼠10只,随机分为实验组(6只)和正常对照组(4只)。实验组大鼠置入密封玻璃容器内,同时放人适量钠石灰。90分钟后,取出动物,麻醉后灌流固定,取左心室前外侧壁组织标本作超微细胞色素氧化酶反应,同时取正常对照组大鼠左心室前外侧壁... 成年大鼠10只,随机分为实验组(6只)和正常对照组(4只)。实验组大鼠置入密封玻璃容器内,同时放人适量钠石灰。90分钟后,取出动物,麻醉后灌流固定,取左心室前外侧壁组织标本作超微细胞色素氧化酶反应,同时取正常对照组大鼠左心室前外侧壁相同部位标本作对照。细胞色素氧化酶孵育采用DAB结合铈基法,用亚铁氰化钾半还原的锇酸后固定取代电子染色。实验组和对照组标本处理、孵育反应,电镜观察和照相条件等均相同。结果分析随机取样,对两组动物的电镜照片的各50个线粒体结构和细胞色素氧化酶反应进行图象分析。分析参数包括每个线粒体的面积、周长,形状因子(圆形度), 展开更多
关键词 心肌 大鼠 线粒体 细胞 氧化酶
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淮河青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ序列的研究
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作者 肖明松 鲍方印 康健 《安徽科技学院学报》 2018年第2期32-36,共5页
目的:研究青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ全序列。方法:以青虾肌肉组织为材料,采用苯酚-氯仿法提取青虾DNA,然后对青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因进行了PCR扩增和测序。结果:青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ全序列长度为1535bp,编码蛋白含511... 目的:研究青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ全序列。方法:以青虾肌肉组织为材料,采用苯酚-氯仿法提取青虾DNA,然后对青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因进行了PCR扩增和测序。结果:青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ全序列长度为1535bp,编码蛋白含511个氨基酸残基。其中A、T、C、G分别为30.0%、30.6%、22.5%和16.9%。T+A含量(60.6%)明显高于G+C含量(39.4%)。结论:青虾线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ序列的碱基组成与含量与其他沼虾类相似。 展开更多
关键词 青虾 细胞色素氧化酶I 序列分析
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氧化型脂蛋白(a)通过抑制细胞色素b表达促进血管内皮细胞焦亡 被引量:1
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作者 曹子彤 陈彦君 +4 位作者 谈世铭 饶羽祝 王晶晶 蔡泽民 王佐 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2024年第7期558-566,共9页
[目的]探讨氧化型脂蛋白(a)[oxLp(a)]诱发血管内皮细胞焦亡及其机制。[方法]人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)经100 mg/L oxLp(a)孵育24 h后,通过Western blot和RT-qPCR检测焦亡相关蛋白、促炎细胞因子、线粒体相关蛋白核呼吸因子1(NRF1)、... [目的]探讨氧化型脂蛋白(a)[oxLp(a)]诱发血管内皮细胞焦亡及其机制。[方法]人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)经100 mg/L oxLp(a)孵育24 h后,通过Western blot和RT-qPCR检测焦亡相关蛋白、促炎细胞因子、线粒体相关蛋白核呼吸因子1(NRF1)、核呼吸因子2(NRF2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及线粒体基因细胞色素b(CYTB)蛋白表达水平,ELISA检测炎症因子水平,扫描电镜检测细胞膜破裂,透射电镜检测线粒体形态,Hoechst33342/PI染色检测细胞凋亡,MitoSOX探针检测线粒体活性氧(mtROS),Flou-4AM探针检测钙离子,JC-1探针检测线粒体膜电位(MMP),Calcein AM染色检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放。向HUVEC转染CYTB过表达慢病毒,分析其对oxLp(a)诱发焦亡与线粒体功能的影响。[结果]经oxLp(a)处理后,焦亡相关分子NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、GSDMD-N蛋白水平显著升高(P<0.05);CYTB、促炎细胞因子IL-1β和IL-18蛋白和mRNA水平均显著升高(P<0.05);细胞膜上出现细小裂孔,PI染色阳性细胞百分比显著增加(P<0.05)。oxLp(a)抑制线粒体相关蛋白NRF1、NRF2、PGC-1α的表达及线粒体基因CYTB的表达,促使mtROS生成增加、钙离子超载、ATP水平下降、MMP下降、mPTP值升高、线粒体形态异常。pHelper 2.0慢病毒载体转染过表达CYTB后,oxLp(a)诱发HUVEC焦亡与线粒体形态功能异常被过表达CYTB部分逆转。[结论]oxLp(a)通过下调CYTB促进线粒体形态功能异常而诱发HUVEC焦亡。 展开更多
关键词 细胞焦亡 氧化型脂蛋白(a) 线粒体功能 血管内皮细胞 细胞色素B
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CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察
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作者 缪欣宇 栗彦飞 +4 位作者 郑方园 刘海龙 张瑶尧 晁耐霞 莫发荣 《山东医药》 CAS 2024年第2期31-34,38,共5页
目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢... 目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养。利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca^(2+)浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca^(2+)及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01)。结论CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡。 展开更多
关键词 色素 细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C 线粒体应激反应 线粒体钙离子超载 线粒体活性氧 细胞凋亡
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25份燕窝样品的线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因序列分析
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作者 谢彩玲 陈念 +1 位作者 潘柯伊 王乾蕾 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期334-338,共5页
目的对多种燕窝进行DNA条形码鉴别,为确定燕窝的基原提供分子依据。方法对25份燕窝样品的细胞色素氧化酶Ⅰ(mitochondria cytochrome oxidase subunitⅠgene,COⅠ)条形码序列进行PCR扩增和测序,分析燕窝正品来源的种内变异,与混伪品的... 目的对多种燕窝进行DNA条形码鉴别,为确定燕窝的基原提供分子依据。方法对25份燕窝样品的细胞色素氧化酶Ⅰ(mitochondria cytochrome oxidase subunitⅠgene,COⅠ)条形码序列进行PCR扩增和测序,分析燕窝正品来源的种内变异,与混伪品的种间变异,以及序列相似性和进化树研究,用Taxon DNA软件评估"Barcoding Gap"。结果金丝燕种内COI序列变异小,种间存在较多的变异位点,种间的遗传距离显著大于种内的遗传距离。通过构建的系统聚类树图可以看出,燕窝不同来源个体均聚在一起,能够与其混伪品区分开。结论基于COⅠ序列的DNA条形码技术可以用于鉴定燕窝的正品来源及其混伪品。 展开更多
关键词 燕窝 DNA条形码 线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因 鉴定
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DRP1调控线粒体稳态对人视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转化的影响
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作者 汤中 唐云骢 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第6期443-448,共6页
目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)... 目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)O_(2)组:先采用650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预细胞,此后培养方式及时间与NG组相同;H_(2)O_(2)+Mdivi-1组:先采用10μmol·L^(-1)Mdivi-1处理ARPE-19细胞2 h,再给予650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预,此后培养方式及时间与NG组相同。Western blot检测各组细胞p-DRP-1/DRP1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波型蛋白(Vimintin)及紧密连接蛋白(ZO-1)表达水平;线粒体红色荧光探针检测各组细胞线粒体形态;线粒体超氧化物红色荧光探针检测各组细胞线粒体活性氧(ROS)水平;JC-1染色试剂盒检测各组细胞线粒体膜电位;免疫荧光检测各组细胞中ZO-1表达水平。结果H_(2)O_(2)组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值高于NG组,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值低于H_(2)O_(2)组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞较H_(2)O_(2)组线粒体碎片化程度得到改善。H_(2)O_(2)组细胞线粒体ROS水平(4.42±0.29)与NG组(1.00±0.17)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(2.15±0.18)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞红/绿荧光强度比值(0.16±0.12)与NG组(1.00±0.09)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(0.42±0.05)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞上皮样标志物表达下降,间质样标志物表达上升,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞上皮样标志物表达上升,间质样标志物表达下降。各组细胞α-SMA、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、Vimintin及ZO-1相对表达量比较,H_(2)O_(2)组与NG组及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ZO-1免疫荧光染色实验显示,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组的细胞连接紧密程度优于H_(2)O_(2)组。结论DRP1可调控线粒体动态平衡,靶向DRP1可改善线粒体功能并抑制EMT进展,从而减轻H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞功能障碍。 展开更多
关键词 线粒体动力相关蛋白 线粒体功能 人视网膜色素上皮细胞 上皮-间充质转化 年龄相关性黄斑变性
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