缝隙连接蛋白43经典与非经典作用在疾病治疗中的潜在价值

背景:缝隙连接蛋白43在维持组织代谢稳态平衡中发挥着重要作用,传统观点认为它参与了缝隙连接过程,为细胞与细胞之间建立直接的物质信号交换通道奠定结构基础。而近年来研究对于其独特的半通道作用提出了新的看法,并发现了其亚细胞定位、自身片段等对于细胞生理活动及病理过程的重要意义。目的:综述数据库中相关文献,系统性总结缝隙连接蛋白43分子特征及在多种细胞表达的研究进展,重点阐述通道依赖性与非通道依赖性缝隙连接蛋白43的生理与病理作用,并探讨其在疾病治疗中的潜在价值。方法:分别设置“gap junction,connexin 43(Cx43),hemichannel,channel-dependent Cx43,channel-independent Cx43,extracellular vesicles(EVs),mitochondria,GJA1-20k”为英文关键词,以“缝隙连接,缝隙连接蛋白43,半通道,通道依赖性Cx43,非通道依赖性Cx43,线粒体,细胞外囊泡,GJA1-20k”为中文关键词,分别在PubMed数据库及中国知网数据库进行文献检索,最终共入选81篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)缝隙连接蛋白43的经典作用即构成缝隙连接通道,通道依赖性缝隙连接蛋白43主要可通过直接构成缝隙连接通道参与组织器官的生理或病理过程,应充分关注其结构和功能的完整性,而黏附是缝隙连接的重要特性,与屏障障碍类疾病密切相关。(2)缝隙连接蛋白43的非经典作用即非缝隙连接通道依赖性作用,缝隙连接蛋白43六聚体目前被发现定位于质膜、线粒体内膜和细胞外囊泡表面等结构,参与炎性疾病的正向促炎机制、线粒体功能代谢和细胞外囊泡的靶向摄取等,选择性截短片段则参与全长连接蛋白43靶向转运至胞内各结构域过程,并且通过促使线粒体周围肌动蛋白聚合,调控线粒体稳态。(3)以上两种作用为开发靶向治疗药物及基于组织工程技术的治疗手段中种子细胞转化机制等问题的解决提供了新思路,但现存的一些原始研究常不能全面考虑不同形式缝隙连接蛋白43的相互作用,从而混杂地描述了其总体特征,使得研究结果产生偏差。(4)未来研究需要系统地构架不同形式存在的缝隙连接蛋白43的生理特性及在各疾病中的潜在机制,为缝隙连接蛋白43完整性机制探索及多疾病的诊断和治疗提供参考依据。

缝隙连接蛋白43在舒芬太尼预处理减轻大鼠离体心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的探究缝隙连接蛋白(Cx)43在舒芬太尼预处理减轻大鼠离体心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为缺血再灌注(I/R)组、舒芬太尼预处理(Sufen)组、线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)特异性阻断剂5-羟基葵酸钠(5-HD)组、舒芬太尼预处理+5-HD(SH)组,每组10只。利用Langendorff离体心脏灌注装置制备离体心脏灌注模型,其中I/R组持续灌注30 min后停止灌注,然后恢复灌注2 h;Sufen组与5-HD组分别灌注含舒芬太尼(10 nmol/L)、5-HD(100μmol/L)的K-H液30 min;SH组于舒芬太尼预处理前10 min至缺血5 min灌注含舒芬太尼(10 nmol/L)和5-HD(100μmol/L)的K-H液30 min。分别于平衡末(T1)、缺血前(T2)、再灌注末(T3)记录各组心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)。再灌注结束后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死面积,采用免疫荧光共聚焦技术检测Cx43的平均光密度(AOD)值,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测各组Cx43 mRNA表达情况,采用Western印迹法检测各组心肌组织Cx43蛋白及磷酸化(p)-Cx43蛋白相对表达量。结果T3时,与Sufen组比较,I/R组、5-HD组、SH组HR、LVSP、±dp/dtmax均下降,LVDP均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Sufen组比较,I/R组、5-HD组、SH组心肌梗死面积均增大,差异有统计学意义(P<0.05)。与Sufen组比较,I/R组、5-HD组、SH组Cx43 AOD值和Cx43 mRNA、Cx43、p-Cx43蛋白相对表达量均减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Cx43参与MIRI的病理生理过程,舒芬太尼预处理对于大鼠离体MIRI的保护作用机制可能是通过开放mito-KATP通道促使Cx43蛋白表达增加来实现。

半夏泻心汤及其拆方对胃电节律失常大鼠胃组织缝隙连接蛋白Cx43表达的影响

目的探讨半夏泻心汤调节胃运动的配伍规律。方法选取90只健康SD雄性大鼠,分为正常组10只和模型组80只。复制大鼠胃电节律失常模型,经胃电生理学指标评价后,根据半夏泻心汤的配伍特点,将其拆分为辛开、苦降、甘补、辛开苦降、辛开甘补、苦降甘补组,每组10只。各给药组按相同药物浓度不等体积连续灌胃4周。给药后进行胃电参数分析,采用免疫组化法、RT-PCR检测胃组织Cx43及其m RNA表达。结果与正常组比较,模型组Cx43及其m RNA表达升高;与模型组比较,各给药组胃电慢波频率变异系数降低,各给药组Cx43及其m RNA表达降低,其中辛开甘补组作用最为显著。结论半夏泻心汤调节胃运动机制可能与其降低缝隙连接蛋白Cx43及其m RNA表达有关,从而改变紊乱的胃电节律,达到改善胃运动功能的作用。

缝隙连接蛋白Cx43介导硫化氢后处理对大鼠心肌的保护作用

目的探讨缝隙连接蛋白Cx43是否参与硫化氢后处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤。方法 72只♂SD大鼠随机分为6组(n=12):空白组(Sham组),缺血/再灌注组(I/R组),溶媒组(DMSO组),抑制剂18β-次甘草酸组(AGA组),硫化氢后处理组(NP组),硫化氢后处理+AGA组(N+A组)。采用离体心脏Langendorff灌注模型,平衡灌注20 min后,停灌30 min,复灌60 min。记录平衡末及灌注结束时的心率(HR)、左室舒张末期压(LV-EDP)、左室发展压(LVDP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax);灌注结束时,TTC染色法检测心肌梗死面积;Western blot半定量线粒体和胞质总的Cx43(total connexin 43,tCx43)和磷酸化Cx43(phosphorylated connexin 43,pCx43)表达水平。结果平衡灌注末各组间心功能指标差异无统计学意义。再灌注后,与I/R组比较,NP组明显改善再灌注损伤心功能的各项指标(P<0.05),减少心肌梗死面积[(24.4±4.8)%vs(49.4±4.2)%,P<0.05];tCx43表达在线粒体中明显升高,胞质中明显降低,pCx43表达线粒体中明显升高,胞质中明显降低。AGA逆转了硫化氢后处理产生的心肌保护效应及tCx43和pCx43在线粒体中表达的增加(P<0.05)。结论缝隙连接蛋白Cx43参与了硫化氢后处理减轻离体大鼠心脏I/R损伤过程。

波生坦对慢性低氧性肺动脉高压大鼠右心室肥厚及缝隙连接蛋白(Cx)43表达的影响

目的:研究波生坦(bosentan,BST)对慢性低压低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠右心室肥厚及缝隙连接蛋白43(Cx43)表达量的影响。方法:将24只实验动物随机分为正常组、HPH组、安慰剂组和BST治疗组,每组各6只。正常组:常压常氧下饲养6周;其他3组大鼠置于低压低氧仓内8h/d,共6周,从第4周开始,每天给BST治疗组大鼠BST(100mg/kg)灌胃,安慰剂组生理盐水灌胃。6周后,所有大鼠测定血流动力学指标:如平均肺动脉压力(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室收缩压上升最大速率(dp/dtmax),以及右心室肥厚度[如右心室质量/(左心室质量+室间隔质量),RV/(LV+S)]和右心室质量/体质量(RW/BW)。收集动脉血检测血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平。Masson染色观察心肌胶原纤维容积百分比的变化,免疫组化染色法和Westernblot观察Cx43的变化。结果:BST治疗组大鼠的mPAP、RVSP、RV/(LV+S)、RW/BW及心肌胶原纤维容积百分比均较HPH组显著降低(P<0.05),但血浆NO、ET-1的水平和心肌Cx43表达量显著升高(P<0.05)。结论:BST在降低肺动脉压力的同时,还可抑制右心室肥厚和Cx43表达量的降低。

缝隙连接蛋白Cx43在神经系统领域研究进展

缝隙连接（gapjunction，GJ）通道是对抗细胞间电阻，实现兴奋在细胞间传播的主要途径。缝隙连接蛋白（connexin，Cx）是构成细胞间缝隙连接通道的基本结构和功能的一大类膜蛋白，6个缝隙连接蛋白单体形成同源六聚体，中间有一个亲水性通道，每侧膜上的通道相当于一个半通道，两侧膜相对，形成缝隙连接通道。这些通道通常是开放的，允许水溶性分子和离子通过，一个细胞产生的动作电位可通过缝隙连接的局部电流传播到另一个细胞。

大肠癌癌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达及与肿瘤转移的相关性探讨

目的探讨癌细胞能穿出血管内皮进入靶器官继续生长形成转移瘤的机理。方法将人血管内皮细胞单独培养及分别与大肠癌低转移细胞HT29、高转移细胞Lovo共同培养,至细胞长成单层采用免疫组化SP法检测细胞缝隙连接蛋白Cx43表达。结果在单纯血管内皮细胞Cx43蛋白表达最强,次之为与HT29细胞共培养,而与Lovo细胞共培养后Cx43几乎无阳性表达。结论 Cx43蛋白在大肠癌细胞转移中起重要作用;检测Cx43蛋白表达有助于判断肿瘤的转移能力。

兔窦房结组织急性损伤后缝隙连接蛋白CX45 CX43表达的研究

目的 :研究兔窦房结组织急性损伤后缝隙连接蛋白CX4 5、CX4 3表达的动态变化规律。方法 :用 2 0 %甲醛湿敷兔窦房结区 ,建立窦房结组织急性损伤模型。分别于模型建立后 2h ,1周 ,2周 ,3周和 4周取窦房结组织 ,用免疫组织化学SP法检测CX4 5和CX4 3的表达。结果 :CX4 5主要在窦房结中心区表达 ,表达的CX4 5呈点状、短线状 ,形状不规则 ,分布稀疏 ;CX4 3在窦房结中心无表达 ,而表达于窦房结周边区心房肌细胞 ,呈条状、链状 ,分布于心房肌闰盘处。各实验组窦房结细胞CX4 5表达量均较对照组明显减少 (P <0. 0 5 ) ,且随观察时间的延长CX4 5表达量逐渐减少。结论 :兔窦房结细胞表达CX4 5 ,而无CX4 3的表达。窦房结组织急性损伤后CX4 5的表达量明显减少。

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑内缝隙连接蛋白Cx43和Cx32表达的影响

目的:研究苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑内缝隙连接蛋白Cx43和Cx32表达的影响。方法:40只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、苦参素治疗组、苦参素预防组4组,每组10只。模型组、苦参素治疗组和预防组大鼠分4点在四肢足垫皮下注射用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成的抗原乳剂(0.5 mL/只),诱导EAE模型。苦参素预防组于免疫后第1天起腹腔注射苦参素注射液250 mg/kg,1次/d;苦参素治疗组于免疫后第11天起腹腔注射等量的苦参素注射液,1次/d;正常组和模型组于免疫后第1天起腹腔注射等体积生理盐水,1次/d。每天进行神经功能评分。免疫后第18天处死动物,取脑组织,HE和勒克斯光蓝(LFB)染色观察病理组织学改变,免疫荧光法检测脑内Cx43和Cx32蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠神经功能评分增加,脑组织内有大量的炎性细胞浸润和髓鞘脱失,Cx43蛋白表达水平升高,Cx32表达降低(P均<0.05)。与模型组比较,苦参素治疗组和预防组的神经功能评分降低(P<0.05),脑内炎性细胞浸润和髓鞘脱失减轻(P均<0.05),Cx43蛋白表达水平降低(P<0.05),Cx32蛋白表达升高(P<0.05),且苦参素预防组的作用优于治疗组(P<0.05)。结论:苦参素可能通过调节中枢神经系统(CNS)缝隙连接蛋白Cx43和Cx32的表达,减轻CNS脱髓鞘程度,从而对EAE大鼠起到一定的防治作用。

异氟烷对心肌动作电位及缝隙连接蛋白Cx43的作用

目的:观察异氟烷对心肌动作电位及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法:健康家兔40只,采用Langendorff离体心脏平衡灌注15 min后,随机分为5组:I0.65组,用0.65 MAC异氟烷的K-H液灌注;I0.65H用0.65MAC异氟烷加0.5 mmol/L庚醇的K-H液灌注;I1.3组,用1.3 MAC异氟烷的K-H液灌注;H0.5组,用庚醇0.5 mmol/L的K-H液灌注;S组,用K-H液灌注。观察记录灌流15 min时(基础值)和给药15 min时的心率(HR)及心内膜心肌(Endo)、中层心肌(M)、心外膜心肌(Epi)的动作电位时程(APD)和振幅(APA),灌注完毕取左心室心肌组织,用免疫组织化学检测心肌Cx43蛋白表达。结果:I0.65组心肌动作电位无明显影响,I1.3组APD显著延长(P<0.05),H0.5组HR显著减慢(P<0.05),APD显著延长(P<0.05),I0.65H组给药后有发生心律失常甚至心电活动停止现象;Cx43蛋白表达I0.65H组较H0.5组表达少(P<0.05),H0.5组较I0.65、I1.3组表达少(P<0.05),I1.3组较I0.65组、S组表达少(P<0.05)。结论:异氟烷与庚醇对心脏动作电位和缝隙连接蛋白Cx43可能有着相似的作用,延长动作单位时程,减少Cx43蛋白表达,改变Cx43蛋白分布;异氟烷可能通过阻滞缝隙连接,对心脏动作电位产生作用。

连接蛋白43半通道介导NLRP3炎症小体激活在脑缺血中的作用

缝隙连接蛋白在脑缺血后的神经炎症扩散中发挥重要作用。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为中枢神经系统中主要的连接蛋白,通常以寡聚形式形成六聚体的半通道,与相邻细胞上的半通道对接,形成缝隙连接通道。在正常生理条件下,细胞表面的半通道开放维持在正常生理水平;然而,在脑缺血的过程中,Cx43半通道的过度开放导致了大量的离子(Na^(+)、Cl^(−)、Ca^(2+)、K^(+))、谷氨酸、天冬氨酸和三磷酸腺苷(ATP)等物质的释放,引起相邻细胞功能紊乱,从而加重神经细胞的损伤。此外,Cx43半通道的开放还诱导炎症因子的释放,这与脑缺血后NLRP3炎症小体的激活密切相关。因此,通过调控Cx43半通道能够缓解脑缺血后神经炎症,进而减轻脑缺血损伤。本文重点综述了Cx43半通道蛋白与NLRP3炎症小体激活的关系,以及其在脑缺血中的作用,旨在为脑缺血的治疗提供新的思路和方法。

缝隙连接蛋白Cx43在妇产科领域研究进展

由缝隙连接蛋白（connexin,Cx）构成的缝隙连接（gap junction,GJ）是相邻细胞质膜间的一种特殊跨膜蛋白通道结构,其重要功能是缝隙连接细胞间通讯（gap junction intercellular communication,GJIC）,沟通相邻细胞的胞质,允许细胞质中相对分子质量〈1 000的小分子物质,包括细胞代谢产物及细胞第二信使等通过,从而同步细胞活动、协调各细胞间活性和功能、控制细胞的生长和发育等生命过程。

缺氧预处理对离体心肌细胞膜和线粒体缝隙连接蛋白43表达的影响

目的通过建立离体心肌细胞缺氧/复氧模型,探讨缺血预处理(IPC)对心肌细胞膜和线粒体缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,阐明IPC抗缺血再灌注损伤的机制。方法将培养72 h的SD大鼠乳鼠原代细胞随机分为空白对照组、缺氧/复氧再灌注组(HR组)及缺氧预处理组(HPC组),使用实时荧光定量PCR检测Cx43 mRNA水平,Western blot半定量细胞膜、线粒体的Cx43及磷酸化Cx43水平。结果 HPC组的Cx43 mRNA、细胞膜和线粒体的Cx43及磷酸化Cx43均明显高于HR组(P<0.01),与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IPC可以保持心肌细胞Cx43 mRNA和细胞膜、线粒体蛋白Cx43的表达水平,减少由缺血再灌注引起的Cx43去磷酸化,增加磷酸化Cx43的含量,从而有效地减少缺血再灌注对心肌的损伤。

β_2受体对心肌缝隙连接蛋白Cx43的调节

目的探讨β-肾上腺素受体(β-AR)亚型对心肌缝隙连接蛋白connexin 43(Cx43)表达及功能的调节。方法采用免疫印迹技术和划痕标记示踪技术(SLDT)观察心肌细胞Cx43的表达和功能变化。结果给予异丙基肾上腺素(ISO)刺激5min,即可明显增加心肌细胞非磷酸化Cx43的表达,同时促进荧光染料在细胞间的扩散;选择性β2-AR拮抗剂ICI 118551,可完全拮抗异丙基肾上腺素所诱导的该作用。结论异丙基肾上腺素主要通过刺激β2-AR参与调控Cx43,这可能是β2-AR诱导心律失常的一个重要机制。

心室肥厚时的缝隙连接蛋白Cx43及快速刺激对其的影响

探讨心室肥厚时缝隙连接在心律失常发生中的作用。部分结扎日本大耳白兔腹主动脉建立心肌肥厚模型。术后 4周和 10周分别观察对照组、结扎组及结扎 +右心耳刺激组 (2 6 0次 /分起搏 30min)缝隙连接蛋白Cx4 3的面积及密度改变。结果 :①心肌肥厚伴随有Cx4 3的分布变化 ,这种情况与肥厚的不同阶段有关 :早期Cx4 3的密度下降 ,Cx4 3弥散分布于整个细胞表面 ,而不再集中于闰盘处 ;后期Cx4 3的分布面积增加 ;②心肌肥厚不同阶段Cx4 3也发生着变化 ,随病程的增加Cx4 3的分布面积和密度均明显加大 ;③快速短时右心耳起搏刺激对肥厚心肌Cx4 3的分布有影响。结论 :压力负荷增加所致的心肌肥厚引起了缝隙连接蛋白Cx4 3的改变 ,这种改变具有阶段依赖性。

线粒体缝隙连接蛋白43的心肌保护作用机制研究进展

缝隙连接蛋白(Cx)通过形成缝隙连接介导细胞间电化学信息传递,而哺乳动物心室肌中的Cx主要为Cx43。Cx43不仅存在于心肌细胞膜上,也存在于线粒体中。其中,缺血预处理或药物预处理减轻心肌缺血/再灌注损伤作用的分子机制与线粒体Cx43有关,它主要通过改善线粒体的功能状态,减少再灌注后心肌细胞的死亡,从而发挥心肌保护作用。而线粒体Cx43是否存在更多的生理或病理功能以及能否成为临床治疗缺血/再灌注相关心血管疾病的新靶点将是未来的研究方向。

转染缝隙连接蛋白CX43在脑胶质瘤化疗旁观者效应影响的体外实验研究

背景与目的:肿瘤细胞受损伤时,其旁边未受损肿瘤细胞也出现损伤的现象称为旁观者效应,国内外研究发现多种肿瘤组织在体内外存在该效应,为进一步明确脑胶质瘤在药物化疗时是否存的旁观者效应以及CX43(缝隙连接蛋白43)对该效应的影响,通过构建并转染pCMV-Cx43cDNA质粒入C6细胞,上调缝隙连接蛋白CX43表达,增强缝隙连接功能,探讨转染缝隙连接蛋白CX43对脑胶质瘤化疗体外旁观者效应影响。方法:(1)通过C6细胞培养,并提取总RNA,行RT-PCR、质粒酶切及连接等,构建缝隙连接蛋白CX43真核表达重组质粒pCMV-Cx43cDNA;(2)通过脂质体行重组质粒pCMV-Cx43cDNA转染C6细胞,过表达C6细胞缝隙连接蛋白CX43,RT-PCR及Weston-blot检测CX43 mRNA及蛋白表达水平变化。划痕荷载染料传输实验法检测转染缝隙连接蛋白CX43后缝隙连接功能;(3)通过体外TRASWELL细胞共培养模型,将转染pCMV-Cx43cDNA、空载体细胞分别分成化疗药物替膜唑胺处理组与替膜唑胺未处理组细胞,然后将两组细胞按一定比例分别接种TRASWELL细胞共培养板膜两侧,检测未化疗处理细胞存活率及凋亡率,观察体外转染CX43对体外化疗旁观者影响。结果:(1)成功构建带CX43目的基因的真核表达pCMV-Cx43cDNA重组质粒;(2)成功转染C6细胞并筛选稳定转染过表达CX43细胞株(C6-Cx43)及转染空载体的细胞株(C6-non),C6-Cx43细胞Cx43mRNA及CX43蛋白表达显著增加;(3)在体外TRASWELL细胞共培养模型中,观察到体外未化疗细胞凋亡的旁观者效应,(C6-Cx43)组与对照组差异存在明显统计学意义。结论:(1)C6细胞转染重组质粒pCMV-Cx43cDNA,缝隙连接蛋白CX43表达增高,C6细胞GJIC功能增强;(2)在体外化疗时,C6-Non、C6-Cx43都存在化疗旁观者效应,而C6-Cx43的化疗旁观者效应显著。即转染缝隙连接蛋白CX43能放大体外化疗的旁观者效应。

过表达缝隙连接蛋白Cx43与人脑胶质瘤细胞U251侵袭性的研究

目的通过上调脑胶质瘤细胞U251的Cx43表达水平,检测其对U251侵袭能力的影响,为抑制肿瘤的恶性浸润提供新的治疗途径。方法通过构建缝隙连接蛋白Cx43真核表达重组质粒,并转染U251细胞,过表达U251细胞缝隙连接蛋白Cx43,RT-PCR及Weston-blot检测Cx43 mRNA及蛋白表达水平变化。用Traswell细胞培养板结合MTT法测定U251细胞侵袭能力的改变。结果 (1)成功构建pCMV-Cx43 cDNA重组质粒。(2)成功转染U251细胞并筛选稳定转染过表达Cx43细胞株。(3)Traswell细胞培养板结合MTT法,检测到过表达Cx43后U251细胞侵袭能力较正常组下降。结论过表达缝隙连接蛋白Cx43能抑制人脑胶质瘤细胞U251侵袭能力。

缝隙连接蛋白43(Cx43)与神经炎症的研究进展

缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是中枢神经系统(central nervous system,CNS)中含量最丰富的连接蛋白,主要分布于星形胶质细胞,以缝隙连接(gap junction,GJ)和半通道(hemichannel,HC)的形式存在,分别介导细胞间和细胞与外环境间的信息交流。随着人口的老龄化,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、脑卒中及术后认知功能障碍等疾病的发生率越来越高,神经炎症是这些CNS疾病的一个共同特征,涉及到白细胞聚集、胶质细胞激活、炎性因子释放等,该过程需要高效的信息交流,研究表明Cx43在该过程中发挥着不可忽视的作用,主要表现为GJ抑制和HC活性增加并影响神经功能。本文重点综述Cx43与神经炎症的关系,为多种CNS疾病的治疗提供新的靶点。

慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43基因表达变化的实验研究

目的:研究慢性神经痛大鼠脊髓缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)基因表达的变化.方法:18只成年SD大鼠随机分为两组(n=9),分别接受右侧坐骨神经结扎手术(CCI组)和假手术(Sham组).手术前、后观察大鼠疼痛行为学并测定右后肢热刺激抬脚潜伏期(PWTL)、电刺激抬脚阈值(PWET)的变化,于术后14天取大鼠L4/5右侧脊髓,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照基因,采用RT-PCR半定量分析CCI组和Sham组Cx43表达的差异.结果:CCI组大鼠表现为行走步态异常,与Sham组相比CCI组术后5～14天疼痛阈值明显降低(P＜0.01).Sham组Cx43扩增产物量极少,而CCI组L4/5 Cx43扩增产物量约为Sham组的3倍.结论:慢性神经痛大鼠脊髓Cx43基因表达显著增加,提示脊髓缝隙连接可能在慢性病理性痛过程中发挥重要的作用.