目的通过研究线粒体DNA^4977缺失在盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫骶韧带中的变化,初步探讨POP可能的发生机制。方法取2016年9月～2017年4月我科因POPⅡ～Ⅳ期切除子宫26例为研究组,同期因良性疾病切除子宫的非POP患...目的通过研究线粒体DNA^4977缺失在盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)患者子宫骶韧带中的变化,初步探讨POP可能的发生机制。方法取2016年9月～2017年4月我科因POPⅡ～Ⅳ期切除子宫26例为研究组,同期因良性疾病切除子宫的非POP患者21例为对照组,取子宫骶韧带组织,提取其中的线粒体DNA,应用荧光定量PCR方法检测线粒体DNA和DNA^4977缺失的相对含量,应用琼脂糖凝胶电泳方法对PCR产物进行比对分析。结果①研究组子宫骶韧带组织中线粒体DNA^4977缺失明显高于对照组,差异有统计学意义(Z=-2. 086,P=0. 037);而2组总线粒体DNA含量无明显差异(P=0. 447)。②研究组线粒体DNA^4977缺失与年龄、孕次、产次、BMI、初产年龄、绝经年龄均无明显相关性(P>0.05);对照组患者线粒体DNA^4977缺失与年龄有明显相关性,随着年龄的增加,线粒体DNA4977缺失增多(r=0. 465,P=0. 034),而与孕次、产次、BMI、初产年龄、绝经年龄无明显相关性(P>0.05)。结论子宫骶韧带线粒体DNA^4977缺失在POP患者中显著增加,可能是导致POP的原因之一。展开更多
目的:探讨溴化乙锭(EB)诱导法建立人线粒体DNA(mtDNA)缺失宫颈癌Hela S3细胞,以及再转入线粒体构建融合细胞的可行性,并对转线粒体细胞进行初步分析。方法:采用低剂量(100 ng/m L)EB诱导法建立mtDNA缺失的ρ0 Hela S3细胞,通过普通PCR...目的:探讨溴化乙锭(EB)诱导法建立人线粒体DNA(mtDNA)缺失宫颈癌Hela S3细胞,以及再转入线粒体构建融合细胞的可行性,并对转线粒体细胞进行初步分析。方法:采用低剂量(100 ng/m L)EB诱导法建立mtDNA缺失的ρ0 Hela S3细胞,通过普通PCR、荧光定量PCR(qPCR)进行mtDNA缺失鉴定。采用聚乙二醇(PEG)介导细胞融合法,以正常人血小板为mtDNA供体转入ρ0 Hela S3细胞,构建转线粒体细胞(transmitochondrial cybrids),并通过PCR、qPCR和透射电镜观察进行初步分析和鉴定。结果:普通PCR和qPCR结果证实EB诱导法能够成功建立ρ0 Hela S3细胞,同时结合透射电镜证明转线粒体细胞能够恢复线粒体正常结构。结论:采用EB诱导法可成功建立ρ0 Hela S3细胞,且通过细胞融合构建的转线粒体细胞能够恢复mtDNA复制和正常线粒体结构,为研究mtDNA突变与线粒体功能异常相关疾病的关系提供可靠的实验基础。展开更多
The authors sequenced POLG1,C10ORF2,and ANT1 in 38 sporadic progressive external ophthalmoplegia patients withmultiple mitochondrial DNA(mtDNA)deletions.Cau-sative mutations were identified in approximately 10% of cas...The authors sequenced POLG1,C10ORF2,and ANT1 in 38 sporadic progressive external ophthalmoplegia patients withmultiple mitochondrial DNA(mtDNA)deletions.Cau-sative mutations were identified in approximately 10% of cases,with two unrelated individuals harboring a novel premature stop codon mutation(1356T > G).None had a mutation in C10ORF2 or ANT1.In the majority of patients,the primary nuclear genetic defect is likely to affect other unknown genes important for mtDNA maintenance.展开更多
文摘目的:探讨溴化乙锭(EB)诱导法建立人线粒体DNA(mtDNA)缺失宫颈癌Hela S3细胞,以及再转入线粒体构建融合细胞的可行性,并对转线粒体细胞进行初步分析。方法:采用低剂量(100 ng/m L)EB诱导法建立mtDNA缺失的ρ0 Hela S3细胞,通过普通PCR、荧光定量PCR(qPCR)进行mtDNA缺失鉴定。采用聚乙二醇(PEG)介导细胞融合法,以正常人血小板为mtDNA供体转入ρ0 Hela S3细胞,构建转线粒体细胞(transmitochondrial cybrids),并通过PCR、qPCR和透射电镜观察进行初步分析和鉴定。结果:普通PCR和qPCR结果证实EB诱导法能够成功建立ρ0 Hela S3细胞,同时结合透射电镜证明转线粒体细胞能够恢复线粒体正常结构。结论:采用EB诱导法可成功建立ρ0 Hela S3细胞,且通过细胞融合构建的转线粒体细胞能够恢复mtDNA复制和正常线粒体结构,为研究mtDNA突变与线粒体功能异常相关疾病的关系提供可靠的实验基础。
文摘The authors sequenced POLG1,C10ORF2,and ANT1 in 38 sporadic progressive external ophthalmoplegia patients withmultiple mitochondrial DNA(mtDNA)deletions.Cau-sative mutations were identified in approximately 10% of cases,with two unrelated individuals harboring a novel premature stop codon mutation(1356T > G).None had a mutation in C10ORF2 or ANT1.In the majority of patients,the primary nuclear genetic defect is likely to affect other unknown genes important for mtDNA maintenance.
