基于超滤-HPLC-MS/MS技术的苦荞提取物抑制线粒体肿胀活性研究

为了阐明苦荞对肝脏线粒体肿胀的抑制作用和物质基础,采用超滤技术,结合HPLC-MS/MS分析,研究苦荞中靶向肝脏线粒体发挥活性的功能成分。结果表明,苦荞含有丰富的总酚和总黄酮,其中以乙醇-麸皮粉提取物(YF)中总酚和总黄酮含量最高,为(32.48±0.37)mg GA/g DW和(63.06±0.21)mg rutin/g DW,丙酮和水提取物次之。同时,YF对FeSO 4-VC诱导的肝脏线粒体肿胀抑制效果最好,超滤-HPLC-MS/MS分析发现,苦荞YF中发挥肝脏线粒体肿胀抑制作用的主要活性成分为槲皮素、山奈酚、大黄素和L-苹果酸,其中槲皮素和山奈酚的效果优于大黄素和L-苹果酸。细胞实验进一步证实,槲皮素和山奈酚可有效恢复高脂诱导的线粒体膜电位下降,降低ROS水平,发挥线粒体保护作用。

有氧运动对大鼠骨骼肌线粒体Na^+,K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶及线粒体肿胀的影响

背景:研究表明有氧运动可提高线粒体功能,但在不同时期的作用特点还不明确。目的:观察不同周期有氧运动对大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组,有氧运动2,4和6周组。正常对照组不进行有氧运动,其余3组则参照BedfordTG标准,采用跑台运动方式,建立有氧运动模型进行相应的运动周期锻炼。测定各组大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性以及线粒体肿胀程度。结果与结论:有氧运动2周组各指标与对照组比较无差异。有氧运动4和6周组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性均增高(P<0.05),线粒体肿胀程度降低(P<0.05)。实验结果表明,有氧运动可保护线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性,提高线粒体功能,但需要一定的时间积累。

线粒体酶活性及线粒体肿胀与不同运动强度的关系

背景:关于不同运动强度对机体的影响早有研究,并且取得了不少有价值的成果。但是对于不同运动强度对线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及线粒体肿胀程度影响的研究较少。目的:观察不同运动强度对大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常对照组,中等强度运动组和高强度运动组。正常对照组大鼠正常笼内生活,不运动。另2组游泳训练方式,分别建立中强度和高强度运动模型,进行相应的运动锻炼,训练4周。结果与结论:中强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均增高(P<0.05),线粒体肿胀程度降低(P<0.05);而高强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均降低(P<0.05),线粒体肿胀程度增大(P<0.05)。实验结果表明中强度运动可以保护线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性,提高线粒体功能;而高强度运动则降低了线粒体的功能。

羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌线粒体损伤的作用研究

目的研究红花成分羟基红花黄色素A(HSYA)对大鼠心肌线粒体损伤的作用。方法采用低温离心法制备大鼠心肌线粒体;比浊法检测线粒体肿胀;荧光偏振法测量线粒体膜流动性;硫代巴比妥酸比色法观察线粒体脂质过氧化水平。结果HSYA可明显减轻离体大鼠心肌线粒体肿胀(P<0.05)、缓解线粒体膜流动性的下降(P<0.001)、抑制羟自由基诱导的线粒体脂质过氧化(P<0.001)。结论HSYA可减轻大鼠心肌线粒体的损伤。

原花青素对·OH致损的鼠肝线粒体的保护作用

采用分光光度法和荧光偏振法,检测了原花青素对·OH引起的鼠肝线粒体损伤的保护作用。结果表明,原花青素能有效增加受损伤的线粒体的膜脂流动性,明显减少受损伤的线粒体肿胀及脂质过氧化物的形成,从而维护线粒体结构和功能的完整性。以上结果为原花青素的进一步开发提供了新的资料。

高脂饮食性脂肪性肝炎大鼠肝脏线粒体损伤和ATP储备改变

目的:探讨高脂饮食大鼠脂肪性肝炎模型肝脏线粒体损伤和三磷酸腺苷(ATP)储备的改变. 方法:SD大鼠随机分为模型组(n=48)和对照组(n=24), 分别给予高脂饲料和标准饲料喂养,分批于实验8、12、16和24 wk处死.常规检测血清生化和肝匀浆ATP 含量,光镜和电镜观察肝脏组织学改变. 结果:与对照组相比,模型组肝脏8 wk时肝脂肪变明显,表现为单纯性脂肪肝,12-24 wk进展为脂肪性肝炎;模型组肝脏ATP含量呈减低趋势,16-24 wk时较对照组减低约1/3(P<0.05);电镜下8wk模型组大鼠肝细胞线粒体肿胀、增大,部分内膜嵴粒脱落,16 wk 和24 wk大鼠线粒体内有类圆形结晶样物质沉积. 结论:高脂饮食大鼠脂肪性肝炎模型的肝细胞存在线粒体损伤和ATP储备的减低.

双核锰配合物[Mn_2(Adpa)_2Cl_4]的合成、与线粒体和癌细胞的作用(英文)

本文以N-烯丙基二吡啶甲基胺为配体,合成了一个新的锰配合物。晶体结构显示其为双核锰(Ⅱ,Ⅱ)配合物。用MTT法研究了双核锰配合物体外与线粒体作用和对肿瘤细胞生长的抑制作用。实验结果表明双核锰(Ⅱ,Ⅱ)配合物对癌细胞ECA-109有较强的抑制作用,且化合物能抑制过量钙离子引起的线粒体肿胀。

肾茶提取物抗氧化及保护线粒体作用研究(英文)

肾茶水提液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取,与水层得到4个不同极性部位。以清除DPPH·、超氧阴离子和羟自由基的能力,络合Fe2+能力,体外抗活性氧能力以及对FeSO4和H2O2诱导小鼠肾脏组织匀浆脂质过氧化产物MDA和GSH-Px水平的影响,综合评价其抗氧化活性;以抑制Fe2+-L-Cys诱导肾脏线粒体肿胀能力,初步评价其保护肾脏线粒体的作用。结果显示肾茶水提液4个不同极性部位均具有不同程度的清除DPPH·、O-·2、·OH和络合Fe2+能力;其中乙酸乙酯和水提部位具有显著体外抗ROS能力,降低MDA和升高GSHPx水平,以及抑制肾脏线粒体肿胀的能力,且其作用效果均与剂量呈正相关。本实验结果可为肾茶用于治疗肾脏疾病的药效物质基础研究提供依据。

1,6-二磷酸果糖镁盐对大鼠实验性心肌线粒体损伤的治疗作用

目的观察1,6-二磷酸果糖镁盐(FDP-Mg)对由异丙肾上腺素(Iso)诱导的心肌线粒体缺血性损伤的治疗作用。方法采用皮下多点注射Iso致大鼠心肌缺血损伤模型,静脉分别予FDP-Mg100mg·kg-1及FDP-Na120mg·kg-1和MgSO430mg·kg-1进行治疗,观察心肌细胞及线粒体超微结构的变化,测定药物对缺血损伤的心肌细胞内的线粒体膜电位的影响及对线粒体肿胀的抑制率。同时利用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧自由基发生系统和CuSO4/细胞色素C羟自由基发生系统分别检测药物对超氧阴离子(O2-)和羟自由基(·OH)的清除率。结果FDP-Mg可以显著改善由Iso所诱导的线粒体膜电位异常改变,抑制线粒体肿胀。且对·OH和O2有较高的清除率,与对照组相比有显著差异。电镜显示FDP-Mg对维持线粒体的正常形态有明显作用。结论FDP-Mg可有效保护由Iso所致的心肌细胞的线粒体实验性缺血损伤。

小儿克山病非变质心肌线粒体形态定量观察

本文在9例三型小儿克山病非变质心肌中,对391个心肌细胞的70 838个线粒体作了形态定量观察。结果表明,线粒体呈单纯性肿胀,其Vv和(?)普遍增大(P<0.001),可能是心肌变质前的最早形态指征。Nvm,p增大只见于慢型(P<0.01),属代偿性增生。

杏花雨对外源性高钙致大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的探讨杏花雨注射液对外源性高钙所致线粒体损伤的保护作用。观察杏花雨对离体线粒体是否具有保护作用,从而进一步完善银杏叶提取物抗脑缺血损伤的机制。方法新鲜制备的大鼠脑线粒体悬液,分别与不同浓度Ca2+以及不同浓度的杏花雨注射液进行孵育,观察线粒体基质游离钙、线粒体活性以及线粒体膜肿胀度的变化。结果与正常对照组比较外源性高钙导致大鼠脑线粒体严重钙超载(P<0.01),线粒体活性下降(P<0.01),540 nm处线粒体悬液吸光度值显著下降,线粒体明显肿胀(P<0.01);于钙离子损伤前给予杏花雨孵育,线粒体基质游离钙浓度明显降低(P<0.01),线粒体活性显著升高(P<0.01),吸光度值有明显升高,显示线粒体肿胀度减轻(P<0.01)。结论外源性高钙可使线粒体基质游离钙含量升高,产生线粒体通透性转换(mitochondria permeability transition,MPT),使线粒体活性降低,功能障碍。杏花雨通过缓解线粒体钙超载,防止产生MPT,从而恢复线粒体功能。提示杏花雨抑制线粒体钙超载可能是其对缺血再灌注脑损伤的保护作用机制。

香烟水溶性提取物对大鼠心肌线粒体的毒性

观察香烟水溶性提取物(CSE)和尼古丁对大鼠心肌线粒体的损伤作用.大鼠心肌线粒体分别与CSE或尼古丁于37℃温孵60min,结果表明,CSE明显降低线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性,呈剂量依赖性.但是ATPase活性不受影响.在线粒体呼吸活性受到抑制的同时,过氧化指标无明显变化.CSE对6.5mmol/L钙离子引起的线粒体肿胀反应具有抑制作用,但可加剧250mmol/L钙离子诱导的线粒体肿胀反应.维生素C对CSE造成的线粒体损伤无保护作用.未见尼古丁对体外大鼠心肌线粒体有毒性.CSE对心肌线粒体的损伤可能是由于它对呼吸酶活性的直接抑制作用而与氧自由基机制无关.尼古丁可能不是CSE损伤大鼠心肌线粒体的毒性成分.

手法对兔颈椎间盘退变模型骨骼肌超微结构的影响

目的:观察手法干预对实验性兔颈椎间盘退变模型骨骼肌超微结构的影响。方法:建立兔颈椎间盘退变模型,2 5只成年新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用透射电镜观察手法干预对兔颈后部骨骼肌超微结构的影响。结果:模型组兔颈后部骨骼肌表现出肌原纤维萎缩,粗细不均,肌原纤维间隙增宽,明、暗带消失,肌节不清晰,大量线粒体肿胀等病变。手法干预能不同程度地阻止骨骼肌的上述病变,并且手法早期干预的效果优于晚期干预。结论:通过阻止骨骼肌损害恢复颈椎动力平衡可能是手法防治椎间盘退变的主要途径之一。

杭白菊总黄酮对大鼠缺血/再灌损伤大脑的保护作用

目的观察杭白菊总黄酮(total flavones extracted from chrysanthemum morifolium,TFCM)对大鼠缺血/再灌损伤大脑的影响,并初步探讨其机制。方法采用大脑中动脉内栓线梗塞法造成大鼠局灶性脑缺血/再灌损伤模型,缺血90min,再灌注22h后,以盐酸2,3,5-三苯基四氮唑染色法测定脑梗死面积,比色法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehycle,MDA)含量,采用“10分法”进行神经症状评分。用荧光分光光度计检测氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的生成;测定分离脑线粒体540nm处吸光度。结果TFCM(50,100,200mg·kg-1,ip)能明显改善脑缺血/再灌后大鼠神经症状,明显减小梗死面积与全脑面积之比,提高缺血脑组织SOD活性,降低MDA含量,并减少脑组织ROS的生成。TFCM减轻Ca2+诱导的脑线粒体肿胀,此作用可被苍术苷所拮抗。结论TFCM对大鼠缺血/再灌损伤大脑具有显著的保护作用,其作用机制可能与TFCM抗氧化作用进而抑制线粒体肿胀有关。

刺激性泻剂对大鼠结肠肌间神经丛超微结构的影响

目的本实验主要研究刺激性泻剂对大鼠结肠肌间神经丛超微结构的影响及其在慢性便秘发生、发展过程中的作用机制。方法通过建立“泻剂结肠”的动物模型,应用电镜技术对正常大鼠及模型大鼠结肠肠壁肌间神经丛超微结构进行观察及对照研究。结果与正常对照组相比,“泻剂结肠”大鼠肠壁肌间神经丛超微结构有明显的病理损害,表现为结肠肌间神经丛可见神经元细胞线粒体轻度肿胀,神经纤维轴突内线粒体肿胀破裂,“嵴”状结构不完整,神经束轴突及树突扩张,电子密度不均匀,部分明显扩张形成空泡。结论长期应用刺激性泻剂可损害结肠肌间神经丛,其超微结构的改变可能是慢性便秘进一步发展和加重的病理基础之一。

犬脑室内出血动物模型脑细胞超微结构的研究

目的：研究脑室内出血后脑细胞超微结构的病理变化及其临床意义。方法：对１８ 只杂种家犬采用脑室内注血法建立脑室内出血动物模型，电镜观察其病理改变。结果：大脑、小脑及脑干神经细胞、胶质细胞及神经纤维细胞内线粒体肿胀及染色质边集、内质网肿胀是其主要病理变化。结论：脑室内注血法是建立犬脑室内出血模型的最简单、最可靠的方法。脑室内出血后脑细胞受损的超微病理改变主要是线粒体肿胀及染色质边集；线粒体肿胀导致ＡＴＰ产生受抑，脑细胞能量不足，从而表现为临床神经功能障碍；染色质边集导致脑细胞死亡。

血管性痴呆大鼠海马超微结构的变化及药物干预

目的:探讨血管性痴呆病理机制及黄精口服液的作用机制。方法:结扎双侧颈总动脉建立血管性痴呆模型,黄精口服液灌胃,应用透射电镜观测神经细胞、胶质细胞、微血管病理变化和突触结构参数的变化。结果:血管性痴呆大鼠海马CA1区神经组织线粒体肿胀、嵴断裂、模糊或消失,微管断裂、排列紊乱,神经毡中突起肿胀、变性,突触结构参数明显改变;毛细血管内皮细胞局部基膜和星形胶质细胞也有病理改变。黄精口服液干预的大鼠海马组织病理变化明显减轻;海马CA1突触界面曲率增大、突触后致密物增厚、突触活性区增长。结论:(1)突触结构变化是血管性痴呆的病理机制之一;(2)黄精口服液促进突触重建、改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。

不同时程吗啡给药大鼠部分脑区超微病理变化观察

目的:观察不同时程吗啡依赖大鼠依赖相关脑区超微病理结构变化。方法:背部皮下递增注射吗啡建立不同时程吗啡依赖大鼠模型,应用透射电镜对吗啡依赖大鼠依赖相关脑区LC、中脑导水管周围灰质、黑质、豆状核、杏仁核、海马进行观察,并与空白对照组进行比较。结果:吗啡依赖大鼠依赖相关脑区部分神经细胞肿胀或固缩,神经毡灶性水肿,有髓神经纤维髓鞘分离,线粒体肿胀、畸形,内质网扩张,多聚核糖体解聚,轴突、树突灶性水肿,细胞器稀疏,突触小泡密集并向活性区聚集。空白对照组未见异常。结论:吗啡依赖大鼠依赖相关脑区神经细胞呈缺血、缺氧性及退行性改变。