抑制线粒体苯二氮卓类受体对缺血心肌细胞APD_(90)和ERP的影响

目的研究抑制线粒体苯二氮卓类受体(mitochondrial benzodiazepine receptor,mBzR)对缺血大鼠乳头肌动作电位复极至90%的时间(90%of duration of action potential,APD_(90))和有效不应期(effective refractory period,ERP)的影响。方法建立体外大鼠乳头肌模拟心肌缺血模型,将50只大鼠随机分为正常对照组、单纯缺血组、4′-chlorodiazepam(16μmol/L)组、4′-chlorodiazepam(32μmol/L)组和4′-chlorodiazepam(64μmol/L)组,每组各10只。利用细胞内标准玻璃微电极技术,记录APD_(90)和ERP的变化。结果与正常对照组相比,缺血组APD_(90)和ERP显著减小(P<0.05)。缺血加4′-chlorodiazepam的各组都可以显著减少缺血时APD_(90)和ERP的降低程度(P<0.05)。结论缺血时,心肌细胞APD_(90)和ERP逐渐缩短,这可能是缺血促进折返性心律失常的基础之一;而线粒体mBzR受体特异性的抑制剂4′-chlorodiazepam可以显著地减少缺血所致的APD_(90)和ERP的缩短,从而减少了折返形成的可能性,这可能是抑制线粒体mBzR受体阻止心室颤动发生的重要的电生理基础。

艾司西酞普兰联合运动方案对苯二氮[艹卓]类药物依赖焦虑症患者睡眠质量的影响

目的:探讨艾司西酞普兰联合运动方案对苯二氮[艹卓]类(BDZ)药物依赖焦虑症患者睡眠质量的影响。方法:选取2021年9月至2023年2月泉州市第三医院收治的BDZ类药物依赖焦虑症患者120例作为研究对象,按照抛掷法随机分为对照组(n=58)和观察组(n=62)。对照组仅予以艾司西酞普兰治疗,观察组予以艾司西酞普兰联合运动方案治疗。比较2组睡眠质量、失眠程度、负性情绪以及生命质量。结果:治疗后,观察组匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)中主观睡眠质量、入睡时间、睡眠效率、睡眠障碍、日间功能5个维度评分及总分均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),失眠严重程度指数(ISI)评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组汉密尔顿焦虑抑郁量表(HADS)评分均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05),健康调查简表(SF-36)评分较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:艾司西酞普兰联合运动方案能明显提高BDZ类药物依赖焦虑症患者的睡眠质量,改善失眠症状,缓解负性情绪,提高生命质量。

ZIF-8泡腾辅助分散固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱法测定人尿液中苯二氮卓类药物

发展了基于沸石咪唑酯骨架材料-8(ZIF-8)的泡腾辅助分散固相萃取(ET-DSPE)技术,结合高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)对人尿液中艾司唑仑、阿普唑仑、地西泮、三唑仑和劳拉西泮5种苯二氮卓类药物(BZDs)进行分析。采用傅里叶变换红外光谱、X射线衍射仪、扫描电子显微镜和全自动比表面积及孔隙分析仪对ZIF-8进行表征,并考察了ZIF-8和Na_(2)CO_(3)用量、吸附时间、溶液pH值及离子强度、尿液稀释比例、洗脱溶剂、洗脱体积和时间对BZDs萃取效率的影响。在最佳条件下,艾司唑仑在0.002~100 ng/mL,其余4种BZDs在0.001~100 ng/mL范围内线性关系良好(r≥0.999),检出限和定量下限分别为0.0003~0.0006 ng/mL和0.001~0.002 ng/mL,3个加标水平下的回收率为81.6%~108%,日内和日间相对标准偏差分别为1.4%~5.6%和1.4%~9.9%。该方法不仅能够直接处理原始尿液,无需稀释和去蛋白操作,而且通过泡腾辅助分散,对BZDs的富集倍数达40.8~54.0倍,实现了尿液中5种BZDs的准确、简便和灵敏分析。

3种苯二氮[艹卓]氮类药物对幽门螺杆菌的抗菌作用及其机制

目的探究苯二氮[艹卓]氮类药物对幽门螺杆菌(Hp)的抗菌作用及其机制分析。方法以Hp国际标准菌株ATCC43504作为实验菌株,苯二氮[艹卓]类药物地西泮、咪达唑仑、瑞马唑仑为实验药物,阿莫西林、克拉霉素为阳性对照,注射用水为阴性对照,采用药敏纸片法测量每种药物的抑菌圈。采用抗菌效能检测药物对Hp的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。配置Hp菌悬液,分别用地西泮(地西泮组)、咪达唑仑(咪达唑仑组)处理,不加药的菌悬液作为对照组,使用全自动生化分析仪检测各组药物干预前(T_(0))及干预后1 (T_(1))、2 (T_(2))、3 (T_(3))、4 (T_(4))、5 (T_(5))、6 (T_(6))、7 h (T_(7))菌悬液中K^(+)浓度。提取Hp脲酶,分别采用1/2 MIC地西泮、MIC地西泮、2 MIC地西泮、1/2 MIC咪达唑仑、MIC咪达唑仑、2 MIC咪达唑仑、1 mg/ml乙酰氧肟酸、注射用水处理,酚红显色法检测各组pH值从6.8升至7.7所需的时间。结果地西泮、咪达唑仑、瑞马唑仑、阿莫西林、克拉霉素、注射用水对Hp的抑菌圈分别为52.3、42.7、6.0、72.3、60.8、6.0 mm。地西泮、咪达唑仑对Hp的MIC分别为12.5、25.0μg/ml,MBC分别为25、50μg/ml。与T_(0)比较,T_(1)~T_(7)地西泮组、咪达唑仑组和对照组的K^(+)浓度均明显升高(P均<0.01);T_(1)~T_(4)地西泮组和咪达唑仑组的K^(+)浓度明显高于对照组(P均<0.01)。1/2 MIC地西泮组、MIC地西泮组、2 MIC地西泮组、1/2 MIC咪达唑仑组、MIC咪达唑仑组、2 MIC咪达唑仑组对脲酶活性的抑制时间分别为(39.86±5.11)、(36.52±6.65)、(38.58±4.83)、(39.25±6.19)、(36.36±4.61)、(35.81±6.18) min,明显短于乙酰氧肟酸组(P均<0.01),但与注射用水组差异无统计学意义(P均>0.05)。结论苯二氮[艹卓]类药物地西泮、咪达唑仑对Hp有良好的抗菌作用,其抗菌机制可能与Hp细胞裂解有关,与脲酶抑制无关。

大鼠肝再生过程中线粒体外周型苯二氮卓类受体的研究

目的:研究肝细胞线粒体通透性转换(PT)的主要调节蛋白外周型苯二氮卓类受体(PBR)在肝再生过程中的表达及其与专一性配体结合动力学变化,探讨与线粒体PT的关系。方法:健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:肝部分切除(PH)组,切除肝左叶和中叶约全肝的70%;假处理组,同样麻醉和开腹,但不切肝;正常组。手术后3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、120 h和168 h分别以半定量RT-PCR法检测PBR mRNA表达的动态变化。利用PBR专一的配体[3H]PK11195测定肝再生时线粒体膜上PBR的含量以及受体与配体亲和力的变化。结果:在肝再生过程中PBR基因表达与假处理组无显著差异;[3H]PK11195与PBR最大结合量(Bm ax)显著低于对照组(P<0.05),其中PH后3 h和120 h非常显著(P<0.01),168 h接近正常水平;平衡解离常数(Kd)在PH后72 h和168 h明显低于假处理照组(P<0.01)。假处理组之间Bm ax和Kd无明显差异。结论:肝再生过程中肝线粒体PBR mRNA水平无明显变化,而PBR与配体结合动力学明显改变提示PBR与线粒体PT变化有关。

血小板膜与脑细胞线粒体和突触体外周型苯二氮卓受体的相关性及生物学意义

目的:探讨衰老过程中脑细胞线粒体和突触体外周型苯二氮卓受体(PBRs)的动态变化以及与外周血血小板膜PBRs相关性的生物学意义。方法:实验动物分为3月龄、12月龄和24月龄3组。动物断头取血后,迅速取脑。采用梯度离心技术提取大脑皮质线粒体和海马突触体,低渗溶血法制备外周血血小板膜。应用放射配基[3H]PK11195结合实验测定PBR结合活力。结果:3组比较,大脑皮质线粒体(F=194.6)、海马突触体(F=94.2)、外周血血小板膜(F=162.2)[3H]PK11195结合活性差异均有显著性(P<0.001)。随着鼠龄增加,上述指标显著下降。外周血血小板膜[3H]PK11195结合活性与大脑皮质线粒体(r=0.894)、海马突触体(r=0.893)[3H]PK11195结合活性比较差异均具有显著性(P<0.001)。结论:大脑皮质线粒体、海马突触体PBRs水平呈增龄下降改变,外周血血小板膜[3H]PK11195结合活性能够反映脑组织该指标的变化。

移液枪头式整体柱直接固相微萃取-高效液相色谱法测定尿液中苯二氮卓类药物

本文采用甲基丙烯酸2-羟乙酯(HEMA)与乙二醇二甲基丙烯酸酯在移液器枪头中共聚制备固相微萃取整体柱,用于直接处理尿液中3种苯二氮卓类药物(BZDs)。实验考察了单体用量、聚合时间及固相微萃取条件对BZDs萃取效率的影响,评价了其吸附性能。当HEMA用量为40 mg,聚合温度60℃时,固相微萃取整体柱对目标物吸附效率达98.9%~100%,且对尿液中杂质的吸附率低于10%。取3 mL尿液样品,无需处理,直接上样至该柱,经4 mL纯净水冲洗,1 mL乙腈洗脱,得到的样品结合高效液相色谱仪分析。方法对3种BZDs在2.5~1000 ng/mL浓度范围呈现良好线性关系(r=0.999),检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)为0.8~1.5 ng/mL和2.5~5.0 ng/mL,回收率为86.2%~107%。本方法构筑的萃取柱制备简单,能实现对原始尿液的直接、高效萃取,操作便捷。

尿液中12种苯二氮卓类新精神活性物质实时直接分析串联质谱快速检测研究

随着新精神活性物质(NPS)种类不断增加、滥用越来越广泛,其兴起给各国禁毒机构带来严峻挑战。该文建立了实时直接分析串联质谱(DART-MS/MS)检测尿液中12种苯二氮卓类新精神活性物质(DBZDs)的方法。优化了质谱条件、进样量、载气加热器温度和前处理方法,并进行了方法学验证。结果表明:使用乙酸乙酯进行液液萃取后,移取5μL上清液至玻璃棒下端,采用DART 12Dip-ItTM玻璃棒自动进样装置进样,载气加热器温度为300℃,在正离子模式下使用多反应监测(MRM)模式分析时可得到最佳响应。采用地西泮-D5作为内标进行定量分析,该方法在0.05~5μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r2)> 0.99;检出限为0.5~20 ng/mL,定量下限为1~50 ng/mL;基质效应为-11.1%~12.6%,回收率为94.7%~115%,高、中浓度的日内及日间相对标准偏差(RSD)均不大于15%,定量下限浓度的日内及日间RSD均不大于17%。方法的重复性良好,符合实战工作要求。

超高效液相色谱-串联质谱法测定毛发中7种新型苯二氮[艹卓]类策划药物的含量

由于新型苯二氮[艹卓]类策划药物具有用量小、药效强、体内代谢快和含量低等特点,很难在受害人的血液和尿液中检出,而毛发具有检出时效长、易获取和易保存的优势,因此提出了题示方法.取剪至1~2 mm的毛发20 mg,加入1 m L含内标(1μg.L^(-1)阿普唑仑Gd5)提取剂,于-50℃预冷5min,冷冻研磨两次,每次90s,中间间隔60s,并离心5min,取上清液浓缩至干,用100μL甲醇复溶,经0.22μm有机滤膜过滤.滤液在Acquity UPLCHSST3色谱柱上进行分离,经不同体积比的0.1%(体积分数,下同)甲酸溶液G含0.1%甲酸的乙腈溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式(ESI+)扫描,多反应监测(MRM)模式检测,以保留时间和特征离子定性,内标法定量.结果表明,7种新型苯二氮[艹卓]类策划药物(瑞马唑仑、科纳唑仑、氟阿普唑仑、氟溴唑仑、玻玛唑仑、依替唑仑、溴替唑仑)工作曲线的线性范围为1~500pg.mg^(-1),检出限(3S/N)为0.11~0.35pg.mg^(-1).按照标准加入法进行回收试验,回收率为90.2%~104%,日内精密度和日间精密度试验所得相对峰面积的相对标准偏差(n=6)分别为1.7%~4.7%和2.9%~7.0%.

脱氢表雄酮对衰老大鼠线粒体外周型苯二氮艹卓受体的影响

目的:观察脱氢表雄酮(DHEA)对衰老模型大鼠大脑皮质线粒体外周型苯二氮艹卓受体(PBRs)的影响,探讨PBRs在脑老化中的作用。方法:Sprague-Dawley大鼠随机分为溶媒对照组和药物治疗组。实验动物连续注射D-半乳糖(100 mg.kg-1,qd,共56次)制备衰老动物模型。溶媒对照组、药物治疗组动物分别同时注射二甲基亚砜或DHEA,隔日一次,共28次。利用Morris水迷宫测试学习记忆能力后动物断头,采用梯度离心法制备大脑皮质线粒体,应用放射配基结合试验测定PBRs最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(KD)。结果:与溶媒对照组比较,药物治疗组Bmax显著升高,KD无显著变化,动物学习记忆能力显著改善。大脑皮质线粒体PBRs特异结合活性与迷宫试验动物逃避潜伏期、平台象限游泳距离和时间显著相关(P<0.05)。结论:大脑皮质线粒体PBRs表达量与衰老动物学习记忆功能密切相关。DHEA可以增加脑组织PBRs的表达量,并改善衰老动物智能状态。

重复经颅磁刺激在失眠患者苯二氮[艹卓]类药物撤药过程中的应用

目的评估重复经颅磁刺激(rTMS)治疗在苯二氮[艹卓]类药物撤药过程中对失眠障碍患者的疗效和安全性。方法选取100例失眠障碍患者,随机分为研究组和对照组各50例。两组均按照失眠障碍的治疗原则选用苯二氮[艹卓]类药物治疗,在使用苯二氮[艹卓]类药物第2周末时开始减药,按照减药的原则分两次递减完毕,第3周末时完全停用苯二氮[艹卓]类药物。研究组在入院时药物治疗的基础上合并rTMS治疗。比较两组疗效、两组在基线及治疗后第1,2,3,4周末临床总体印象-严重度量表(CGI-S)、17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、14项汉密尔顿焦虑量表(HAMA-14)评分并评估治疗安全性。结果研究组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。两组治疗后第1、2、3、4周末CGI-S、HAMD-17、PSQI、HAMA-14评分均较基线时下降(P<0.05),研究组治疗后第3、4周末CGI-S、HAMD-17、PSQI、HAMA-14评分均低于对照组(P<0.01)。两组总不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论rTMS可以作为失眠障碍患者长期治疗的一种有效补充,能够帮助患者顺利撤药,改善睡眠质量,且具有一定的安全性。

氟马西尼联合醒脑静用于急性苯二氮卓类药物中毒治疗的效果观察

目的:观察急性苯二氮卓类药物中毒患者采取氟马西尼联合醒脑静治疗的临床效果。方法:选取2021年3月到2022年3月收治的60例急性苯二氮卓类药物中毒患者进行研究,其中,对照组采取氟马西尼治疗,观察组联合醒脑静治疗。结果:观察组治疗效果高于对照组,药物平均有效时间、症状消失时间、催醒时间、住院时间等临床指标低于对照组,不良反应低于对照组,治疗满意度高于对照组(P<0.05)。治疗前两组昏迷程度评分相比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组昏迷程度评分高于对照组(P<0.05)。结论:针对急性苯二氮卓类药物中毒患者,在采取氟马西尼治疗的基础上,为患者提供醒脑静治疗,能够有效保障患者临床疗效,提高患者治疗安全性,改善患者昏迷情况,使患者尽快苏醒,有利于促进患者早日出院,优化患者满意度。

苯二氮卓类策划药氯硝唑仑的研究进展

氯硝唑仑是苯二氮卓类策划药中最活跃的化合物之一。氯硝唑仑的可获得性和滥用行为逐渐引起关注,服用者过量、高剂量用药导致昏迷、死亡或侵害事件经常发生。目前国内期刊文献中缺乏氯硝唑仑相关研究进展的综述报道,本文对氯硝唑仑的识别、应用、检测和鉴定进行系统综述,以期为氯硝唑仑等苯二氮卓类策划药的研究提供参考。

咪唑并吡啶类外周苯二氮卓受体配体的合成新方法

目的咪唑并[1,2-a]吡啶类PBR配体新的合成方法及其同位素125I-标记。方法非放射活性的咪唑并[1,2-a]吡啶通过5-氯-2-氨基吡啶与溴代酮酯缩合后再酰胺化而得。起始溴代酮酯经付-克酰化、酯化和溴代而被制备。放射标记的125I-咪唑并[1,2-a]吡啶通过Na125I在氯胺T反应体系中经碘脱锡交换反应被制备。由反向HPLC纯化得125I-咪唑并[1,2-a]吡啶。结果非放射活性的咪唑并[1,2-a]吡啶6步合成总收率25.2%,放化得率68%,放化纯度大于98%。结论咪唑并[1,2-a]吡啶类PBR配体的合成和标记方法简便,且回收率高。

液相色谱-串级质谱法同时检测中成药及保健食品中非法添加的22种苯二氮卓类药物

建立了同时检测中成药及保健食品中22种苯二氮卓类药物的液相色谱-串级质谱(LC-MS/MS)方法。在硼砂缓冲液(pH 11)中,样品中的苯二氮卓类药物经乙醚-二氯甲烷(8∶2,V/V)提取,浓缩至干后,用乙腈-水(2∶8,V/V)溶解残渣,采用电喷雾正离子模式电离(ESI+),多反应监测定性和同位素标记的内标物进行内标法定量。结果表明:在0.5～50.0%g/L范围内,22种苯二氮卓类药物的线性相关系数均大于0.9990;检出限为0.0085～0.062%g/L;定量限为0.028～0.21%g/L。添加浓度水平为1.0,2.0和5.0%g/kg时,平均回收率为58.0%～116.5%;相对标准偏差为2.4%～12.2%。

大鼠脑缺血半暗带区外周型苯二氮卓受体的变化及黄芪甲苷的影响

目的观察大鼠脑缺血/再灌注损伤后半暗带区外周型苯二氮卓受体(peripheral-type benzodiazepine receptors,PBRs)的变化,研究不同剂量黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AST)对PBRs的影响。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、AST 10、40和100 mg.kg-1组5组。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型,于缺血2 h后再灌注24 h。采用Bederson方法进行神经功能评分,采用梯度离心法提取缺血半暗带区线粒体,应用放射配基结合实验检测线粒体[3H]PK11195特异性结合活性,测定PBRs最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。结果线粒体PK11195特异性结合活性与动物神经功能缺损评分具有明显相关性(r=0.833,P<0.01)。与模型组相比,AST 10(P<0.05)、40(P<0.01)、100(P<0.01)mg.kg-1组动物神经功能障碍评分均明显减少,AST 40 mg.kg-1组与AST 100 mg.kg-1组相比,差异无显著性(P>0.05)。与模型组相比,AST 10(P<0.05)、40(P<0.01)、100(P<0.01)mg.kg-1组半暗带区Bmax明显减少。与AST 10 mg.kg-1组相比,AST 40(P<0.05)、100(P<0.01)mg.kg-1组Bmax明显减少(P<0.01)。AST 40 mg.kg-1组和100 mg.kg-1组相比,Bmax及动物神经功能缺损评分差异均无显著性(P>0.05)。各组Kd值差异无显著性(P>0.05)。结论 AST可通过降低脑缺血/再灌注后PBRs表达起到脑保护作用。

UPLC-ESIMS/MS法测定动物饲料中苯二氮卓类药物

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI MS/MS)同时检测动物饲料中地西泮、奥沙西泮、硝西泮、三唑仑、艾司唑仑和咪达唑仑6种苯二氮卓类药物的方法。饲料样品采用碱性叔丁基甲醚提取,Oasis MCX固相萃取柱净化,反相色谱柱分离,以0.1%甲酸和乙腈为流动相进行梯度洗脱,正离子模式扫描,多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明,6种苯二氮卓类药物在5～100μg/L范围内呈良好线性,方法的检出限为2μg/kg,定量下限为5μg/kg。在空白大猪配合饲料中添加5、20、100μg/kg 3个加标水平,6种药物的平均回收率为68%～94%,相对标准偏差为5.8%～12.7%。方法快速、准确、灵敏度高、重复性好,适用于动物饲料中苯二氮卓类药物的检测。

固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时检测猪肉中18种苯二氮卓类药物残留量

建立了同时检测猪肉中18种苯二氮卓类药物残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品中的苯二氮卓类药物残留在pH 5.2的乙酸铵缓冲溶液中酶解后,用氨水调节pH值大于9.5,经乙酸乙酯-异丙醇(体积比5∶1)提取,正己烷去脂,MCX离子交换柱净化,采用电喷雾正电子模式电离,多反应监测模式检测,同位素内标法定量。结果表明:在0.5～50.0μg/L范围内18种苯二氮卓类药物的线性相关系数均大于0.999 0,检出限(S/N≥3)范围为0.01～0.13μg/kg,定量限(S/N≥10)范围为0.04～0.45μg/kg。添加浓度水平为1.0,2.0和5.0μg/kg时,平均回收率范围为76.0%～107.2%,相对标准偏差(RSD)范围为2.3%～9.1%。

动物源食品中苯二氮卓类残留分析方法研究进展

目前,动物源食品中残留的药物对环境和公众的健康构成的潜在危害越来越受到重视。苯二氮卓类为国家明令禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物之一。但为了追求经济效益,其非法使用相当的广泛。本文介绍了动物源产品中苯二氮卓类残留的检测方法,包括色谱分析法和免疫分析法。

尿和血浆中苯并二氮杂卓类药物及其代谢物的气相色谱氮磷检测分析法

建立了尿和血浆中11种苯并二氮杂卓类药物和10种代谢物的气相色谱氮磷检测分析方法。血浆及加β-葡萄糖醛酸酶水解后的尿在碱性条件下用苯-异戊醇(98.5∶1.5,V/V)提取,提取物用两根极性不同的色谱柱分析。分析物的检出限大多数低于10 ng/mL。对口服治疗量药物自愿者血浆和尿中药物和代谢物分析的分析结果表明,本方法适用于麻醉犯罪案件中药物的分析。