粟酒裂殖酵母中Mmp1蛋白的功能研究

线粒体是存在于大多数真核细胞中的一种产能细胞器,它参与了细胞内ATP的合成、物质的代谢、细胞凋亡等多种生理过程.Mmp1蛋白被预测为线粒体内膜肽酶复合体催化亚基,但其具体功能尚未得到解析.通过分子克隆、表型实验、荧光显微观察、线粒体分离提取、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法等技术,分析了Mmp1的定位及其对线粒体功能的影响.通过荧光定位分析发现Mmp1是一个定位在线粒体中的蛋白.细胞缺失mmp1无法在非发酵型培养基上生长,暗示缺失mmp1影响了线粒体的功能.同时,细胞缺失mmp1,使线粒体基因组编码的呼吸链复合体核心蛋白Cox1、Cox2、Cox3、Cob1、Atp6的蛋白水平显著降低.在对野生型和Δmmp1菌株线粒体编码的基因的mRNA水平进行实时荧光定量实验发现,Δmmp1菌株中的Cox1、Cox2、Cox3、Cob1、Atp6的转录水平并未有明显变化.结果表明,Mmp1影响了线粒体呼吸链复合体亚基的蛋白水平,对维持线粒体功能的发挥起着重要作用.