线粒体融合蛋白-1对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的:比较正常及炎症来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)中线粒体融合蛋白-1(mitofusion 1,Mfn1)的表达差异及其对PDLSCs成骨分化的影响。方法:分离培养PDLSCs,分别为正常来源(HPDLSCs)、牙周炎来源(P-PDLSCs)及应用IL-1β模拟炎症微环境诱导牙周膜干细胞(H-PDLSCs+IL-1β)。RT-PCR方法检测对比H-PDLSCs与P-PDLSCs、H-PDLSCs与H-PDLSCs+IL-1β中Mfn1表达差异;RT-PCR检测成骨基因、茜素红染色及氯化十六烷基吡啶定量,对比P-PDLSCs及si Mfn1下调Mfn1表达后的成骨分化能力。结果:与H-PDSLCs组相比,P-PDSLCs组及H-PDLSCs+IL-1β组中Mfn1表达量显著升高(P<0.05);si Mfn1下调P-PDSLCs中Mfn1表达量后,其成骨分化能力增强(P<0.05)。结论:炎症微环境下,PDLSCs中Mfn1表达量升高,导致成骨分化能力下降。

龙血复合物对人体皮肤细胞线粒体的作用研究

通过重建老化皮肤细胞的体外评估模型,评估龙血复合物(一种由4种活性成分复合而成的活性物)对正常人皮肤成纤维细胞和表皮角质形成细胞ATP含量和线粒体完整性(包括:线粒体形态、线粒体网络和线粒体融合蛋白-1的表达)的影响。ATP检测试剂盒测定成纤维细胞和角质形成细胞内ATP含量,荧光探针染色结合显微镜图像半定量方法评估线粒体形态和线粒体网络结构的丰度,免疫细胞荧光染色方法分析线粒体融合蛋白-1(Mfn1)的表达。实验结果显示,龙血复合物显著促进成纤维细胞和角质形成细胞ATP含量,显著促进角质形成细胞线粒体网络的形成,龙血复合物处理的成纤维细胞线粒体形态完整、碎片较少、具有更加丰富的分支结构,Mfn1的表达水平更高。研究发现龙血复合物通过促进细胞ATP产生、保持线粒体完整性、增加线粒体网络数、促进Mfn1的表达,显示出对成纤维细胞和角质形成细胞的抗衰老作用。本研究中使用的评估方法也可用于筛选针对与线粒体衰老和生物能量相关功能的活性成分。