电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响

目的:观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗老年性痴呆(AD)的部分作用机制。方法:以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天。用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应。用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构,用免疫组化法检测海马神经元中凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达。结果:与空白组小鼠相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长、原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达增高;与模型组小鼠相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短、原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,海马神经元中Caspase-3、Caspase-9表达减少。结论:电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤、降低Caspase-3、Caspase-9表达,抑制细胞凋亡线粒体途径的级联反应,减少细胞凋亡有关。

电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构的影响

目的观察电针对SAMP8小鼠海马神经元线粒体超微结构及相关凋亡蛋白的影响,从保护线粒体、抑制细胞凋亡的角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的部分作用机制。方法以SAMP8小鼠为研究对象,依据"补肾通督,醒神益智"的治疗原则,电针"百会"、"涌泉",每日1次,共治疗21天。用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力的变化,评价电针对AD的治疗效应。用透射电镜观察海马神经元线粒体的超微结构。结果模型组与空白组相比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间明显缩短,海马神经元线粒体超微结构不完整,线粒体面密度和体密度减少;模针组与模型组相比较,模针组小鼠治疗后平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,学习记忆能力有所提高,海马神经元线粒体超微结构基本正常,线粒体面密度和体密度增加。结论电针对AD治疗效应的发挥可能与减轻线粒体超微结构损伤,改善线粒体功能,进而改善能量代谢和脑功能有关。

紫杉醇联合顺铂化疗对人卵巢浆液性囊腺癌组织occludin和ZO-1表达以及线粒体超微结构的影响

目的:观察紫杉醇联合顺铂化疗对人卵巢浆液性囊腺癌(serous cystadenocarcinoma,SC)组织紧密连接蛋白occludin和zonula occludens-1(ZO-1)表达以及线粒体超微结构的影响。方法:取紫杉醇联合顺铂化疗和未化疗的卵巢癌患者SC组织,用电镜观察其线粒体超微结构,用免疫组织化学法观察癌组织occludin和ZO-1蛋白的表达,并以子宫肌瘤患者的正常卵巢组织为正常对照。结果:SC细胞线粒体明显肿胀,呈现巨线粒体,且嵴断裂十分显著;化疗后的SC细胞线粒体肿胀减轻,形态接近正常。SC细胞较正常卵巢上皮细胞occludin和ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01);化疗组较未化疗组SC细胞occludin和ZO-1蛋白表达明显增多(P<0.01)。结论:紧密连接蛋白occludin和ZO-1的低表达可能是SC浆液生成增多和细胞代谢异常的关键所在,而化疗可促进紧密连接蛋白表达,从而减轻线粒体结构肿胀并改善细胞功能。

针刺大椎、人中、百会穴对脑缺血再灌注损伤大鼠脑线粒体超微结构的影响

目的观察针刺大椎、人中、百会穴对脑缺血再灌注后大鼠脑线粒体超微结构的影响,探讨针刺对脑缺血再灌注损伤的部分作用机制。方法 40只大鼠随机挑选10只为假手术组,其余30只大鼠造模后随机分为模型组、针刺对照点组、针刺穴位组3组,每组10只。大鼠造模成功后,模型组、假手术组只捆绑不针刺,针刺穴位组针刺大椎、人中、百会三穴,针刺对照点组针刺针刺穴位左侧旁开0.3 cm处,每12小时针刺1次,6次治疗后处死大鼠,取缺血海马组织电镜下观察线粒体超微结构。结果治疗后,除假手术组外其余各组大鼠神经功能缺损评分均下降(P<0.05);与模型组比较,针刺穴位组和针刺对照点组均下降更明显(P<0.05)。电镜观察结果显示,假手术组线粒体结构正常;模型组线粒体肿胀明显,嵴断裂,空泡结构明显;针刺对照点组线粒体肿胀,可见嵴断裂,少量空泡结构;针刺穴位组线粒体稍肿胀,嵴断裂及空泡化不明显。结论针刺能减轻脑缺血再灌注损伤,其机制可能与改变缺血再灌注局灶的线粒体超微结构损伤有关。

丁苯酞注射液对慢性脑低灌注状态大鼠前脑线粒体超微结构及ATP酶活性的影响

目的:观察丁苯酞注射液对慢性脑低灌注状态大鼠前脑线粒体超微结构及ATP酶活性的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组,生理盐水组,丁苯酞组。术后第4周,生理盐水组腹腔注射生理盐水;丁苯酞组腹腔注射丁苯酞注射液。治疗4周后,观察电镜下线粒体超微结构改变;提取线粒体,测定线粒体成分的ATP酶活性。结果:电镜观察表明丁苯酞组线粒体超微结构的破坏明显比生理盐水组轻。丁苯酞组的Na-K-ATP酶活力明显高于生理盐水组(P<0.01),丁苯酞注射液可明显增加线粒体ATP酶活性。结论:丁苯酞注射液对慢性脑低灌注状态下线粒体结构和功能具有一定保护作用。

三种脾虚模型小鼠线粒体超微结构改变的比较研究

对番泻叶泻下法、劳倦过度法和番泻叶泻下加劳倦过度法研制的脾虚小鼠在线粒体超微结构改变方面进行了比较研究。旨在探讨单因素和复合因素造模法对脾虚动物模型生物膜结构的影响。结果表明 ,三种脾虚小鼠模型均出现了线粒体形态的破坏 ,且各具特征。

血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌缺血及心肌线粒体超微结构的影响

目的:观察血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌缺血及心肌线粒体超微结构的影响。方法:采用冠状动脉左前降支结扎制备大鼠急性心梗模型,给药5 d,通过死亡率、心电图、心脏超声心动、血浆cTn-T、心肌梗死质量、心肌间质及血管周围胶原Ⅰ、Ⅲ型胶原分布,电镜观察心肌线粒体超微结构阐明血府逐瘀胶囊对急性心梗的治疗作用及机制。结果:血府逐瘀各剂量组术后即刻死亡率均较模型组降低,cTn-T、LDH、CK降低明显,高、低剂量组可明显降低ST段并改善心功能。各剂量组心肌胶原表达显著降低,对心肌线粒体结构有明显改善作用。结论:血府逐瘀胶囊对大鼠急性心肌梗死有明确的治疗作用,可降低死亡率,降低血浆cTnT、LDH、CK,改善心电图ST段,增加射血分数,减小左室内径,降低心肌胶原表达,改善心肌线粒体超微结构。

海人酸致痫大鼠海马CA_3区神经元线粒体超微结构损伤及caspase-3的表达变化

目的观察海人酸(KA)诱导的癫痫持续状态(SE)大鼠海马CA3区神经元线粒体超微结构的损伤及caspase3的表达变化。方法用KA诱导大鼠SE2h。于SE终止后第3、12、24小时取海马,电镜观察线粒体的超微结构,免疫组化方法检测caspase3的表达。腹腔内注射生理盐水的大鼠设为对照组。结果SE终止后3h,电镜下可见线粒体肿胀及膜完整性的破裂。caspase3的表达于SE后12h较对照组增加,平均阳性细胞数及灰度值分别为10.49±0.68及45.57±2.27(P<0.05);于SE后24h,分别为37.36±0.57及115.24±1.22(P<0.01)。结论在实验性SE模型中,海马神经元线粒体超微结构的损伤早于caspase3的表达,提示线粒体的损伤可能是SE后神经元损伤的关键环节。

卵巢癌VEGF表达及癌细胞线粒体超微结构的改变

目的:观察卵巢癌血管内皮生长因子(VEGF)表达及癌细胞线粒体超微结构的改变,探讨卵巢癌VEGF表达增强对线粒体的影响及其机制。方法:用免疫组化染色法及电子显微镜技术研究卵巢癌VEGF表达及癌细胞线粒体超微结构的改变及相互关系。结果:免疫组化结果显示,微血管内皮细胞及卵巢上皮细胞VEGF表达呈强阳性。癌变后的卵巢上皮细胞的线粒体数量增多,线粒体明显肿胀、脊断裂明显。结论:卵巢癌线粒体超微结构的改变与VEGF表达有关,其VEGF表达增强可能是癌细胞自我保护机制的反应。

通精灵对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡及线粒体超微结构的影响

目的:探讨通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡与线粒体超微结构的影响以及其部分作用机制。方法:雄性Wistar大鼠75只随机分为假手术组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组15只。制备大鼠精索静脉曲张模型,造模完成后4周开始给药,持续8周。观察大鼠的一般情况;Annexin V-FITC方法检测各组生精细胞凋亡;免疫组化检测Cyt-c蛋白表达;透射电镜观测各组生精细胞线粒体超微结构。结果:与假手术组比较,模型组生精细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与模型组相比较,通精灵各组凋亡率均有下降,差异具有显著性(P<0.01)。Cyt-c在间质细胞和各级生精细胞的细胞质中可见棕黄色表达,以精母细胞较明显。与假手术组相比较,模型组Cyt-c表达升高(P<0.01)。与模型组比较,通精灵各组Cyt-c表达降低(P<0.01)。透射电镜结果显示模型组生精细胞线粒体数目减少,超微结构发生改变,线粒体损伤。通精灵各组线粒体存在不同程度的超微结构的改变,但改变程度与模型组相比较轻。结论:精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡率明显升高,线粒体超微结构改变,线粒体损伤明显,生精细胞Cyt-c蛋白表达升高,通精灵可能是通过保护生精细胞线粒体超微结构,抑制生精细胞Cyt-c蛋白表达,从而调节线粒体途径引起的精索静脉曲张大鼠生精细胞过度凋亡。

直结肠癌细胞线粒体超微结构与细胞凋亡的关系

目的:研究直结肠癌细胞线粒体的超微结构。方法:收集香港大学玛丽医院直结肠外科手术切除的直结肠癌大体病检标本共18例。用透射电镜观察线粒体,并取正常黏膜作对照组。结果:直结肠癌细胞线粒体肿胀,空泡化,脊稀少,排列紊乱。凋亡细胞的线粒体比非凋亡细胞的线粒体多,形态更接近正常。结论:线粒体超微结构的异常与肿瘤的代谢方式及细胞凋亡有密切关系。

醒脾解郁方对抑郁大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响

目的探讨醒脾解郁方对抑郁模型大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响。方法将Wister大鼠平均分成5组,即空白对照组、模型组、舍曲林组、醒脾解郁高、低剂量组。采用28 d慢性不可预见应激(CUS)建立抑郁模型,治疗各组给予相应药物灌胃,连续给药28 d。模型组、空白对照组以蒸馏水代替药液。以大鼠体重变化、糖水偏爱及旷场实验进行抑郁行为学评价,采用透射电镜观察大鼠海马神经元、骨骼肌细胞线粒体超微结构变化。结果与空白对照组相比,模型组大鼠体重增长缓慢、糖水偏爱率下降、旷场运动总路程减少(P<0.01);与模型组相比,醒脾解郁高、低剂量组及舍曲林组大鼠体重、糖水偏爱率、旷场中运动总路程均明显增加(P<0.05)。透射电镜观察结果:模型组海马神经元及骨骼肌细胞均出现线粒体数目减少、形态肿胀、空泡变性,内嵴排列紊乱甚至溶解消失。醒脾解郁高剂量组海马神经元及骨骼肌线粒体接近正常,未见肿胀及空泡变性;醒脾解郁低剂量组与舍曲林组海马神经元及骨骼肌的线粒体形态轻度肿胀,内嵴部分紊乱。结论慢性应激导致抑郁的发生中,海马与骨骼肌均会出现线粒体结构的损伤,这可能是抑郁症极度疲劳和多系统症状的关键因素之一;醒脾解郁方能改善大鼠抑郁行为学及线粒体结构损伤,其中高剂量组一定程度上比舍曲林组有效果更好的趋势。

还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马区线粒体超微结构的影响

目的:研究还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马CA1区线粒体超微结构的影响,从能量代谢的角度探讨中药提取物治疗AD的部分作用机制。方法:选用3月龄APP695V717I转基因小鼠120只为痴呆模型,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物高剂量组、低剂量组,每组30只,并设正常对照组。采用Morris水迷宫及跳台实验观察试验动物的行为学;应用透射电镜观察模型脑海马区线粒体超微结构。结果:7,9月龄APP转基因模型小鼠Morris水迷宫试验中穿越原平台位置次数、游泳时间和路程均较转基因模型组显著增多(P<0.05,P<0.01)、跳台实验中的潜伏期均明显缩短(P<0.01),且随着病程的进展而有加重之势。还脑益聪方提取物能明显提高不同月龄转基因小鼠穿越原平台位置次数、游泳时间和路程(P<0.05,P<0.01),且明显延长跳台实验中的潜伏期(P<0.05,P<0.01)。7,9月龄APP转基因小鼠海马CA1区神经元线粒体均表现出线粒体膜破坏、溶解,内嵴大部分排列轻度紊乱,有的嵴内腔扩张,基质疏松,线粒体肿胀,且随病程进展而损坏加重;还脑益聪方提取物能改善不同月龄APP转基因小鼠海马CA1区线粒体超微结构与数量。结论:APP转基因小鼠AD模型学习记忆能力显著下降,且该模型海马CA1区神经元线粒体数量减少、结构损伤,且随病程进展而均显加剧;还脑益聪方提取物能够改善不同病程APP转基因小鼠的学习记忆能力,其可能与改善海马区神经元线粒体结构、增加线粒体数量而保护脑功能有关。

储藏微环境下小麦细胞线粒体超微结构和抗氧化酶活性变化研究

利用透射电镜观察人工模拟储藏微环境下小麦细胞线粒体超微结构,并同时测定线粒体中的O2-·含量、COX活性,以及种子活力和抗氧化酶(SOD、CAT、POD)的活性,研究在不同储藏微环境(A、B、C、D)下小麦线粒体超微结构和抗氧化酶活性的变化规律,从微观角度探讨其与小麦衰老的关系。研究表明:随储藏时间延长和温湿度增高,线粒体数目减少,其超微结构的损伤劣变不断加剧。主要表现为:外膜变形并出现破损溶解,内膜的脊减少,脊的双层膜结构逐渐模糊不清,线粒体内部降解,内腔出现空泡化等;与此同时,O2-·生成速率不断增大,而COX活性和种子活力不断下降。D条件下三者变化最显著(P<0.05);抗氧化酶的活性在高温高湿(C和D)条件下都经历了先增大后下降的过程,D条件下下降最明显,降幅分别达到36%、63%、57%,显著高于低温低湿(A和B)条件(P<0.05)。

慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体分裂蛋白Fisl表达和线粒体超微结构改变

目的观察慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体分裂蛋白Fisl表达和线粒体超微结构改变，探讨其在慢性氟中毒肾脏细胞线粒体损伤中的机制。方法将60只SD大鼠按性别和体质量随机分为3组：对照组、低氟组、高氟组，每组20只，分别饮用加入0、10、50mg／L氟化钠的自来水。6个月时，采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术检测肾脏细胞FislmRNA和蛋白表达，采用电镜观察肾脏细胞线粒体形态。结果与对照组大鼠（28．70±12．41）比较，低、高氟组大鼠肾脏细胞FislmRNA表达（91．48±34．83和582．09±184．69）明显升高（P均〈0．05）；低、高氟组大鼠肾脏Fisl蛋白表达（16．33±10．26和21．50±5．24）与对照组（10．49±7．66）比较，有增高趋势，其中高氟组明显高于对照组（P〈o105）；电镜下，低、高氟组大鼠肾脏细胞线粒体嵴模糊或消失，出现线粒体分裂截面。结论慢性氟中毒可致肾脏细胞线粒体损伤，诱导Fisl在转录水平和蛋白水平表达，致线粒体融合分裂障碍和线粒体超微结构异常，该过程在慢性氟中毒大鼠肾脏细胞线粒体损伤的发生机制中可能起重要作用。

深低温停循环对大鼠海马神经元线粒体超微结构的影响

本研究旨在观察深低温停循环（DHCA）技术本身对海马线粒体超微结构的影响，现报道如下。

磷酸三邻甲苯酯对母鸡神经组织线粒体超微结构及功能的影响

目的观察磷酸三邻甲苯酯(tri-ortho-cresyl phosphate,TOCP)对母鸡神经组织线粒体超微结构及功能的影响,探讨有机磷化合物诱导的迟发性神经毒性(organophosphorus easter-induced delayed neurotoxicity,OPIDN)的机制。方法成年罗曼母鸡16只,随机分为750mg/kg TOCP染毒组(n=12)和对照组(n=4)。TOCP按0.65ml/kg灌胃量一次性染毒,对照组给予等体积玉米油。分别于染毒后第1、5、15、21天观察线粒体结构的改变。另取成年罗曼母鸡96只,随机分为低、中、高剂量染毒组和1个对照组(n=24)。染毒组分别按185、375、750mg/kg经灌胃一次性染毒TOCP,对照组给予等体积玉米油。分别于染毒后第1、5、15、21天采用MTT比色法检测大脑、脊髓和周围神经(坐骨神经和胫神经)中琥珀酸脱氢酶活力的改变来间接代表线粒体呼吸链酶活力的改变。结果 TOCP组母鸡中枢神经系统大脑和脊髓中线粒体结构从染毒第5天开始出现病理改变,并随着OPIDN症状的发展逐渐加重;胫神经在第1天即可观察到线粒体及髓鞘的病理改变,且逐渐加重。染毒组与对照组相比,大脑中线粒体呼吸链酶活力的改变不明显,高剂量组在第15天和第21天出现明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);脊髓与周围神经中线粒体呼吸链酶活力的变化趋势大致相同,中、高剂量组均从第5天开始明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),低剂量组的最低峰值较中、高剂量组出现稍晚。各剂量组间及各时间点之间没有显著差异。结论 TOCP能使母鸡神经组织线粒体结构发生改变,并影响线粒体呼吸链关键酶的活力。

DHEA对TM-3细胞线粒体超微结构和功能的影响

研究还证实,DHEA具有抗衰老、调控脂代谢、提高机体免疫力、增强细胞活性、促进动物健康等多种作用,且其生物学功能的呈现须归结于其代谢转化的中间产物和终产物。睾丸间质细胞是机体合成和分泌睾酮的主要细胞。外源性DHEA可显著提高机体血清雄激素水平,但DHEA对睾丸间质细胞生物学特性的影响及其生物转化过程,目前还鲜有报道。

甲基苯丙胺对体外培养SH-SY5Y细胞线粒体膜电位、超微结构及Mfn1、Fis1蛋白表达的影响

目的 评估甲基苯丙胺(METH)对体外培养的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位(MMP)、线粒体超微结构及Mfn1、Fis1蛋白表达的影响。方法 SH-SY5Y细胞中加入METH(0.0、1.0、1.5、2.0 mmol·L^-1 ),培养3、6、12、24 h;JC-1法检测SH-SY5Y细胞MMP;透射电镜观察SH-SY5Y细胞线粒体超微结构;Western blot检测Mfn1、Fis1蛋白表达。结果 METH作用SH-SY5Y细胞3、6、12、24 h,与对照组比较,METH组细胞MMP红绿荧光比值明显降低( P <0.05),Mfn1蛋白表达降低( P <0.05),Fis1蛋白表达升高( P <0.05);METH作用SH-SY5Y细胞24 h时,透射电镜观察见未处理组细胞线粒体呈椭圆形棒状双层膜结构,线粒体嵴正常、清晰,METH组细胞线粒体椭圆形棒状结构被分裂成小球状结构,并发现线粒体自噬小体及自噬溶酶体。结论 METH可引起SH-SY5Y细胞MMP下降、线粒体超微结构改变及Mfn1、Fis1蛋白表达水平改变,其改变可能参与METH致神经细胞损伤的发病机制。