环氧合酶-2-1195G/A和锰超氧化物歧化酶9Ala/Val基因多态性与高脂饮食的交互作用及其与溃疡性结肠炎的关系

目的探讨环氧合酶-2-1195G/A（COX-2-1195G/A）和锰超氧化物歧化酶9Ala/Val（Mn SOD9Ala/Val）基因多态性与高脂饮食的交互作用及其与溃疡性结肠炎（UC）的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以750例UC患者及750例健康对照者的外周血白细胞为样本,采用聚合酶链反应（PCR）技术分析COX-2-1195G/A和Mn SOD9Ala/Val基因多态性。结果 UC组和对照组COX-2-1195G/A（A/A）基因型的分布频率分别为49.07%和21.20%,Mn SOD9Ala/Val（V/V）基因型的分布频率分别为50.13%和22.40%,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。COX-2-1195G/A（A/A）基因型（OR=3.5808,95%CI=1.8062-5.3478）和Mn SOD9Ala/Val（V/V）基因型（OR=3.4828,95%CI=1.9137-5.5496）者患UC的风险均显著增加。基因突变的协同分析结果显示,COX-2-1195G/A（A/A）/Mn SOD9Ala/Val（V/V）基因型者在UC组和对照组中的分布频率分别为40.67%和8.40%,差异有统计学意义（P〈0.01）,COX-2-1195G/A（A/A）/Mn SOD9Ala/Val（V/V）基因型者患UC的风险显著增加（OR=7.5655,95%CI=4.1849-11.2037）。UC组高脂饮食率显著高于对照组（49.73%比20.13%,P〈0.01）,高脂饮食与COX-2-1195G/A（A/A）（γ=11.81821）和Mn SOD9Ala/Val（V/V）（γ=9.0107）基因型均有交互作用。结论 COX-2-1195G/A（A/A）和MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型及高脂饮食是UC的易患因素,基因多态性与高脂饮食的交互作用增加了UC的发病风险。

吸烟和β3-肾上腺素能受体基因Trp64Arg、锰超氧化物歧化酶9Ala/Val基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的相关性

目的探讨吸烟和β3-肾上腺素能受体（β3-AR））基因Trp64Arg、锰超氧化物歧化酶9Ala/Val（MnSOD9Ala/Val）基因多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以720例NAFLD患者及720例健康对照者的外周血白细胞为样本,采用聚合酶链反应（PCR）技术分析β3-AR基因Trp64Arg和MnSOD9Ala/Val基因多态性。结果β3-AR基因Trp64Arg（A/A）基因型和MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型频率分布分别为39.4%、71.7%（病例组）和21.1%、43.3%（对照组）,差异有统计学意义（P〈0.01;P〈0.01）。Trp64Arg（A/A）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=2.434,95%CI=1.816～4.075）。MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者患NAFLD的风险也显著增加（OR=3.308,95%CI=1.913～4.509）。基因突变的协同分析发现,Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为32.8%和6.5%,差异有统计学意义（P〈0.01）。Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=9.753,95%CI=4.292～12.426）。病例组的吸烟率显著高于对照组（OR=2.623,95%CI=1.425～4.957）,Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型与吸烟有协同作用（OR=33.764,95%CI=18.907～61.582）。结论 Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,三者的联合在NAFLD的发生中起着协同的作用。

老年偏头痛患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸、锰超氧化物歧化酶水平与认知功能障碍的关系

目的探讨老年偏头痛患者血清8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)水平与认知功能障碍的关系。方法选取本院2017年5月至2019年10月收治的256例偏头痛患者为研究对象,其中认知功能障碍患者126例为观察组,认知功能正常患者130例为对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清8-OHdG水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清MnSOD水平,Pearson法分析8-OHdG、MnSOD水平与蒙特利尔认知评估量表(MoCA)总分相关性;Logistic回归模型分析影响偏头痛患者发生认知功能障碍的因素。结果两组患者性别、年龄、体质量指数、受教育程度、病程、汉密尔顿抑郁量表-24项(HAMD-24)评分、有/无先兆偏头痛、脑白质疏松比例相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,观察组血清5-羟色胺(5-HT)与8-OHdG水平显著升高(t=12.455、48.271,P<0.05),观察组血清MnSOD水平、视空间与执行功能、注意力、语言能力、延迟回忆、MoCA总分显著降低(t=26.684、5.460、4.178、3.383、16.916、20.061,P<0.05);Pearson相关分析结果显示,观察组血清8-OHdG水平与MoCA总分呈负相关(r=-0.475,P<0.05),MnSOD水平与MoCA总分呈正相关(r=0.553,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果表明,8-OHdG高水平、MnSOD低水平均是影响偏头痛患者发生认知功能障碍的独立危险因素[OR(95%CI)=2.239(1.410~3.556)、2.216(1.468~3.344),P<0.05]。结论老年偏头痛患者血清8-OHdG水平较高,MnSOD水平较低,可能为老年偏头痛患者发生认知功能障碍的诊治提供参考依据。

锰超氧化物歧化酶基因C1183T、抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性与吸烟的交互作用和食管鳞状细胞癌的关系

目的 探讨锰超氧化物歧化酶（MnSOD）基因C1183T、抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性与吸烟的交互作用,以及与食管鳞状细胞癌（ESCC）的关系。方法 采用病例-对照研究的方法,选择经病理学检查确诊为原发性ESCC的患者720例（ESCC组）,对照组为进行健康体格检查者720名,并根据吸烟状况将研究对象分为不吸烟者和吸烟者（每天至少吸1支烟,持续半年以上）。以研究对象的外周血白细胞为样本,利用PCR分析MnSOD基因C1183T和抵抗素基因启动子-420C/G单核苷酸多态性。结果 ESCC组的吸烟者构成比显著高于对照组（OR=3.326 4,95%CI为1.907 5~5.740 6,P〈0.01）。ESCC组与对照组间C1183T的CC＋CT、TT基因型频率和C、T等位基因频率,以及-420C/G的CC＋CG、GG基因型频率和C、G等位基因频率的差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。ESCC组C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型频率分布分别为50.1%和49.9%,对照组分别为24.2%和23.9%。携带C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型者罹患ESCC的风险显著增加（OR=3.155 3和3.168 3,95%CI分别为1.806 2~5.145 1和1.925 4-5.206 2）。基因突变的协同分析发现,ESCC组C1183T的TT纯合子基因型联合-420C/G的GG纯合子基因型者占39.7%,显著高于对照组的12.8%（P〈0.01）,携带两种纯合子基因型者罹患ESCC的风险显著增加（OR=5.065 1,95%CI为3.187 9~7.848 1）。吸烟与C1183T的TT纯合子基因型和-420C/G的GG纯合子基因型在ESCC的发生中均有交互作用（γ=3.926 6、3.938 3）。结论MnSOD基因C1183T的TT纯合子基因型、抵抗素基因启动子-420C/G的GG纯合子基因型和吸烟是ESCC的易患因素,基因多态性与吸烟的交互作用增加了ESCC的发病风险。

TAT蛋白介导锰—超氧化物歧化酶(Mn-SOD)可行性研究

目的探究TAT蛋白介导锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的可行性。方法建立插入TATPTDDNA序列的表达载体pT7460,将锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因融合进入载体pT7460。应用层析方法提纯融合蛋白并用电泳分析。结果锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)与TAT的融合蛋白表达在包涵体内。结论锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)可与TAT形成融合蛋白。

中国人2型糖尿病肾病患者锰超氧化物歧化酶基因的PCR-DGGE分析

目的探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因在中国人糖尿病肾病(DN)遗传背景中的地位.方法运用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术在200例无亲缘关系之中国云南昆明地区汉族人2型糖尿病肾病患者90例;2型糖尿病患者70例;健康对照者40例中对MnSOD基因编码区进行分子扫查.结果在对研究对象MnSOD基因编码区的第1、2、3、4、5个外显子的PCR-DGGE扫查中未发现异常泳动片段.结论 MnSOD基因可能不是中国汉族人DN的主要致病基因.

锰超氧化物歧化酶与糖尿病慢性并发症

近年对糖尿病（DM）慢性并发症（chronic complications of diabetes mellitus，DCC）发病机制的研究显示，氧化应激在DM及其各种DCC中起着不容忽视的作用，成为发病机制研究中的一个热点。而锰超氧化物歧化酶（Mn-superoxide dismutase，Mn-SOD）作为线粒体内的抗氧化酶，对抗氧化损伤起着重要作用，一些学者已经注意到Mn-SOD在线粒体内的活性下降与许多疾病包括DCC在内的相关性。

锰超氧化物歧化酶模拟物对三硝基苯磺酸诱导溃疡性结肠炎大鼠的保护作用及机制研究

目的:研究锰超氧化物歧化酶模拟物(MnSODm)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎(UC)大鼠的保护作用及其机制。方法:Wistar大鼠随机分为:空白组、模型组、柳氮磺吡啶(SASP,500 mg/kg)组和MnSODm低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高剂量(40 mg/kg)组。大鼠直肠给予100 mg/kg TNBS-50%乙醇溶液建立UC模型,分别用SASP及不同剂量的MnSODm对其进行治疗。连续灌胃给药7 d。观察大鼠一般情况、进行疾病活动指数(DAI)评分,取结肠标本用于评价结肠湿重指数及评估结肠组织病理学损伤程度,检测结肠组织与血清中髓过氧化物酶(MPO)活力。用试剂盒检测结肠组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和一氧化氮合酶(i NOS)活力及谷胱甘肽(GSH)和NO含量。ELISA检测大鼠结肠组织中TNF-α、IL-4及IL-10的含量。Western blot检测各组大鼠结肠黏膜中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及p-AKT蛋白的表达水平。结果:与模型组比较,Mn SODm能改善大鼠一般状况,显著降低DAI、大鼠结肠湿重指数、病理学损伤评分及结肠组织与血清中MPO活力(P<0.05或P<0.01);此外,MnSODm能显著降低大鼠结肠组织中i NOS、NO、TNF-α含量及PI3K、p-AKT表达水平,同时显著增加GSH-Px、GSH、IL-4和IL-10含量(P<0.05或P<0.01)。结论:Mn SODm对大鼠UC有显著的治疗作用,这种作用机制可能是通过抗氧化损伤、清除自由基、调节致炎因子和抗炎细胞因子的表达,抑制PI3K/AKT信号通路,从而阻断炎症过程实现的。

锰超氧化物歧化酶、细胞黏附分子-1和诱生型一氧化氮合酶在大鼠心肌缺血预适应中的意义

目的通过建立心肌梗死、心肌缺血预适应(ischemic precondition,IP)大鼠模型,并测定其血清中锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、细胞黏附分子-1(ICAM-1)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)含量的变化来阐明其在IP过程中的作用。方法 Wistar大鼠90只,分为对照组、心肌梗死组、IP 1个循环组、IP 2个循环组、IP 3个循环组、IP 4个循环组。通过氯化三苯四唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色方法来测定心肌梗死的面积;通过氧化还原酶法测定血清中的Mn-SOD的含量变化,通过酶联免疫法测定血清中ICAM-1、iNOS的含量。结果 (1)IP可以明显降低心肌梗死的面积,其保护作用并不随IP时间的增加而增加,而是在IP 3个循环以后维持在最高的水平,IP 4个循环之后心肌梗死面积反而有所下降,与3个循环组比较差异没有统计学意义。(2)心肌梗死以后血清中的Mn-SOD含量与对照组相比明显升高(P<0.05)。IP以后血清中的Mn-SOD含量亦有明显的升高,从第1个循环开始到第3个循环,随着循环次数的增加血清中的Mn-SOD含量依次增加,高峰在IP 3个循环的时间,达到了(169.69±23.35)g/L,与心肌梗死组比较差异有统计学意义(P<0.01);第4个循环的时间血清中Mn-SOD的含量较3个循环组反而稍有下降,但是两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。(3)心肌梗死以后血清中的ICAM-1含量与对照组相比明显升高(P<0.05)。IP以后血清中的ICAM-1含量亦有明显的升高,从第1个循环开始到第4个循环,随着循环次数的增加血清中的ICAM-1含量依次增加,高峰在IP 4个循环的时间,达到了(145.33±21.13)g/L,与心肌梗死组比较差异有统计学意义(P<0.01);第4个循环的时间血清中Mn-SOD的含量较3个循环组高,但是两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。(4)心肌梗死以后血清中的iNOS含量与对照组相比明显升高(P<0.05)。IP以后血清中的iNOS含量亦有明显的升高,从第1个循环开始到第3个循环,随着循环次数的增加血清中的iNOS含量依次增加,高峰在IP 4个循环的时间,达到了(218.00±11.43)g/L,与心肌梗死组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 IP对缺血及梗死心肌具有保护作用,Mn-SOD、ICAM-1、iNOS在IP过程中有明显的变化,可能参与了心肌IP的过程。

皮肤癌与锰超氧化物歧化酶信号肽基因多态性关系的研究

利用聚合酶链式反应与限制性片段长度多态性 (PCR- RFLP)，检测了 52例皮肤癌和 50名正常人锰超氧化物歧化酶 (MnSOD)信号肽基因的多态性位点 V- 9A。结果，皮肤癌患者与正常对照相比具有较高的- 9A等位基因频率和 A/A基因型频率，表明 MnSOD信号肽基因的多态性位点 V- 9A与皮肤癌发病相关。

超氧化物歧化酶的医学意义及模拟合成研究进展

在漫长的生物进化过程中,机体为了防御新陈代谢及其他生命活动中氧自由基的损伤和破坏,组织和细胞中建立和形成了—整套完善的抗氧化防御系统,而超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)是一类抗氧化防御体系中的重要金属酶,它的改变或变化对机体的生长、发育、成熟、衰老和死亡起着不可低估的生理和病理性的调控作用。

N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物诱导的气道上皮细胞线粒体过氧化损伤的保护作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)诱导的气道上皮细胞线粒体损伤的保护作用及机制。方法体外培养人气道上皮细胞BEAS-2B,分为正常对照组、7.5%(75 mL/L)CSE组、7.5%CSE+NAC组,干预24 h后应用MTT法检测细胞活性,荧光显微镜下观察线粒体内活性氧(reactive oxygen species, ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)强度,流式细胞仪检测MMP水平,Western blotting检测细胞内Sirt3和锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase, MnSOD)的蛋白表达,比色法测定细胞内MnSOD活性。结果 7.5%CSE+NAC组的气道上皮细胞活性较7.5%CSE组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜和流式细胞仪检测结果显示,7.5%CSE+NAC组的气道上皮细胞MMP水平显著高于7.5%CSE组(P<0.05)。与7.5%CSE组相比,7.5%CSE+NAC组气道上皮细胞线粒体内ROS显著降低,Sirt3和MnSOD蛋白表达以及MnSOD活性均显著增加(P<0.05)。结论 NAC通过调控Sirt3-MnSOD信号通路减轻CSE所致的气道上皮细胞线粒体过氧化损伤,有助于阐明NAC对慢性阻塞性肺疾病的作用机制。

联苯胺对线粒体抗氧化酶活性及同工酶的影响

不同浓度联苯胺(0.5,1.0,1.5,2.0mg/mL),以体外染毒方式作用于武昌鱼-团头鲂(Megalobrama amblycephala)肝脏线粒体,研究了武昌鱼肝脏线粒体两种主要抗氧化酶[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)]活性的变化,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了其同工酶谱.结果显示0.5,1.0mg/mL联苯胺激活GSH-Px, 0.5mg/mL联苯胺激活SOD,而1.5, 2.0mg/mL联苯胺抑制这两种酶的活性;另外,在GSH-Px同工酶谱中呈现出特异性标志酶gsh4.

丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注损伤后海马线粒体ATP含量和ATP酶活性的影响

目的观察丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注损伤后海马线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量、ATP酶活性、脂质过氧化和超微结构的影响。方法采用大鼠全脑缺血-再灌注损伤模型。40只Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血-再灌注对照组(B组)和缺血-再灌注丙泊酚预处理组,后者按丙泊酚用量又分为50 mg/kg(C1组)1、00 mg/kg(C2组)和150 mg/kg(C3组)三个亚组。观察全脑缺血10 min再灌注60 min时海马线粒体的超微结构、ATP和丙二醛(MDA)的含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)和谷光甘肽(GSH)活性的变化。结果与B组比较,丙泊酚各处理组海马线粒体的ATP含量、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD和GSH的活性均有不同程度的增高(P<0.05或0.01),MDA含量有不同程度的降低(P<0.05或0.01),线粒体超微结构的损伤程度亦明显减轻。结论丙泊酚对脑缺血-再灌注损伤的保护效应可能与其抑制线粒体脂质过氧化反应,减轻线粒体的损伤,促进线粒体ATP含量和ATP酶活性的恢复有关。

红景天干预可改善大强度运动小鼠骨骼肌细胞线粒体自噬及融合-分裂等功能

背景:超负荷量的运动会引起体内氧化活性物质大量堆积从而损害骨骼肌细胞,而线粒体在运动过程能量代谢中具有关键作用。研究表明,红景天可以减少肌组织脂质过氧化水平,保护受损内皮细胞。目的:探讨红景天通过调节线粒体功能改善大强度运动小鼠骨骼肌细胞的功能。方法:实验方案经西安石油大学伦理委员会批准。选择40只SPF级BALB/c小鼠,根据干预措施的不同,将小鼠分为空白对照组、单纯运动组、红景天对照组、红景天运动干预组。①空白对照组:不进行运动;②单纯运动组:采用生理盐水灌胃后,进行大强度运动;③红景天对照组:将红景天与生理盐水悬浊液灌胃,不运动;④红景天运动干预组:红景天干预措施同红景天对照组,运动方案同单纯运动组。以上各组干预措施均为每天1次,连续28 d。观察小鼠的体质量、前肢握力、力竭时间;Western Blot检测骨骼肌锰超氧化物歧化酶蛋白、p53蛋白、线粒体起源、自噬启动相关蛋白表达;RT-qPCR检测骨骼肌Mfn-1、Mfn-2、Opa-1、Drp-1、fis-1 mRNA表达。结果与结论:①从第2周开始,单纯运动组小鼠前肢握力显著低于其他3组(P<0.05),但空白对照组、红景天对照组与红景天运动干预组之间,小鼠前肢握力始终无明显差异(P>0.05);②第3,4周时,单纯运动组小鼠负重游泳训练力竭时间均显著短于红景天运动干预组(P<0.05);③单纯运动组小鼠骨骼肌细胞内的锰超氧化物歧化酶、p53蛋白表达显著高于其他组小鼠(P<0.05),红景天运动干预组小鼠骨骼肌细胞内的锰超氧化物歧化酶、p53蛋白表达显著高于红景天对照组(P<0.05);④与空白对照组相比,单纯运动组小鼠骨骼肌内PGC-1α、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平明显升高,Atg7、P62水平显著下降(均P<0.05),与红景天对照组相比,红景天运动干预组PGC-1α、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平明显升高,Atg7、P62水平显著下降(均P<0.05);⑤与空白对照组相比,单纯运动组的融合基因表达下降,分裂基因Drp-1 mRNA表达上升(P<0.05);红景天运动干预组的融合基因表达也呈下降趋势,Drp-1 mRNA表达水平呈上升趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);⑥结果说明,红景天可显著提高大强度运动量小鼠的运动耐力,这可能与改善了骨骼肌线粒体自噬、起源及线粒体融合-分裂有关。

线粒体Mn-SOD参与预适应大鼠心肌抗梗死保护作用的实验研究

为定量去甲肾上腺素 (NE)诱导的延迟相预适应抗心肌梗死保护强度 ,研究了预适应机体抗氧化剂酶活性变化与预适应保护的关系。将 5 0只大鼠分为NE组、I/R组和正常组。 3.1μmol/kgNE腹腔内注射诱发预适应 ,2 4h后开胸结扎左冠状动脉主干 (LCA) ,造成LCA支配区缺血30min ,再灌注 12 0min复制预适应模型 ,用伊文斯蓝、TTC染色分别显示左室未缺血区、梗死区、危险区。数码相机与实体显微镜结合拍摄左室切面 ,MetamorphImagingSystem软件定量各组左室梗死区 /危险区面积 ,放免法和黄嘌呤氧化酶法分别测定血清Cu2 + 、胞浆Cu2 + ,Zn2 + -SOD含量、活性及线粒体Mn -SOD活性。结果显示 ,1)预适应保护可使心肌梗死面积减少 33.4 %;2 )预适应心肌线粒体Mn -SOD活性增高 ;3)血清及心肌细胞胞浆Cu2 + ,Zn2 + -SOD含量、活性预适应组与非预适应组差别不显著。实验研究启示 ,NE可诱导大鼠产生延迟相心肌预适应保护 ,其机制可能是通过使心肌线粒体Mn -SOD活性增高 ,减少自由基损伤 ,产生预适应保护。

PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白对缺氧复氧损伤模型大鼠心肌细胞H9C2心肌线粒体功能的影响

目的探讨蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶(PTD4-Cu/ZnSOD)融合蛋白对缺氧/复氧损伤心肌线粒体功能的影响。方法 H9C2大鼠心肌细胞采用厌氧培养箱培养(85%N_2,10%H_2,5%CO_2)制作缺氧复氧损伤模型,之后在缺氧复氧损伤细胞培养液中不加任何处理因素作为HRI组,分别加入10μmol/L Cu/ZnSOD作为Cu/ZnSOD组、10μmol/L PTD4-Cu/ZnSOD作为PTD4-Cu/ZnSOD组,且以正常培养心肌细胞作为正常组。采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,生化测定心肌细胞线粒体三磷酸腺苷(ATP)酶活性、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量,Western blot检测心肌细胞线粒体B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、Bax蛋白的表达。结果 HRI组线粒体膜电位显著低于正常组;PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体膜电位较正常组较低。各处理组心肌细胞凋亡指数均明显高于正常组(P<0.01);PTD4-Cu/ZnSOD组心肌细胞凋亡指数较HRI组明显降低(P<0.01)。PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体ATP酶活性明显高于HRI组,且超氧化物歧化酶活性较高,显著降低丙二醛含量(P<0.01)。HRI组Bcl-2蛋白表达低于正常组,Bax蛋白表达高于正常组(P<0.01);与HRI组比较,PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白能显著增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达(P<0.01)。结论 PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白可提高线粒体ATP酶活性,减轻线粒体损伤;提高线粒体SOD活性,减轻自由基对线粒体损伤;提高线粒体膜Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,从而发挥心肌保护作用。

衰老小鼠心肌缺血对线粒体Mn-SOD活性改变的研究

目的探讨小鼠心肌缺血对线粒体锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性的改变及其意义。方法以D-半乳糖(D-gal)建立人工衰老小鼠,观察心肌缺血时线粒体锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性的变化。结果D-gal衰老小鼠较青年小鼠心肌细胞线粒体Mn-SOD活性降低(P<0.05),心肌缺血损伤时线粒体Mn-SOD活性升高(P<0.05),且青年心肌缺血组线粒体Mn-SOD活性较衰老模型心肌缺血组显著升高(P<0.01)。结论衰老小鼠心肌细胞线粒体Mn-SOD活性均降低与衰老时细胞抗氧化水平降低有关;心肌缺血损伤时线粒体Mn-SOD活性变化可能与氧化应激有关。

基于AMPK-FoxO3a-MnSOD信号通路探讨类风湿关节炎患者氧化应激的机制及黄芩清热除痹胶囊对其影响

目的基于AMPK-FoxO3a-MnSOD信号通路研究黄芩清热除痹胶囊(HQC)改善类风湿关节炎患者氧化应激的机制。方法将50例RA患者按随机数字表法分为2组:HQC组(3粒/次,每日3次)和来氟米特(LEF)组(10 mg/次,每日1次),每组25例,连续治疗3个月。评定2组中医证候临床疗效和脾虚症状评分;魏氏法测ESR;日立7060型全自动生化分析仪检测Hs-CRP、RF、CCP-AB;ELISA检测血清中IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10、IL-35、SOD、TAOC、MDA、LPO;FCM法检测单个核细胞CD36水平;RT-PCR法检测PPAR-γ、AMPKα1、FoxO3a mRNA表达;Western blot法检测PPAR-γ、p-FoXO3a、FoXO3a、AMPKα1、MnSOD蛋白表达。采用Spearman方法对RA患者氧化/抗氧化指标、信号通路指标与细胞因子、中医脾虚症状、CD36之间进行相关性分析。结果 HQC组总有效率为88%,LEF组总有效率为92%,2组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,2组中医脾虚各个症状评分均降低,Hs-CRP、RF、CCP-AB、IL-1β、TNF-α、IL-6等指标均显著下降,IL-4、IL-10显著升高,SOD、TAOC均显著升高,LPO显著降低,AMPK-α1、PPAR-γ、p-FoxO3a蛋白水平升高,CD36表达水平明显升高,PPAR-γmRNA表达升高。且HQC组IL-35明显升高,MDA显著降低,FoxO3a、MnSOD蛋白水平显著升高,AMPK-α1 mRNA、FoxO3a mRNA表达明显升高。且HQC组食欲减退、少气懒言、食后腹胀、大便稀溏、关节重着等评分、LPO治疗后较LEF组降低明显,IL-35、FoxO3a、p-FoxO3a、MnSOD蛋白水平、CD36表达、AMPK-α1 mRNA、FoxO3a mRNA表达治疗后较LEF组升高明显。相关性分析显示,RA患者氧化/抗氧化指标、信号通路指标与细胞因子、中医脾虚症状、CD36存在一定相关性。结论 RA患者氧化应激的发生机制及黄芩清热除痹胶囊改善氧化应激状态可能是与AMPK-FoxO3a-MnSOD信号通路密切相关。

依达拉奉对脓毒症大鼠心肌线粒体SOD XOD及心肌组织NF-κB的影响

目的 观察依达拉奉对脓毒症大鼠心肌线粒体超氧化物歧化酶（SOD）、黄嘌呤氧化酶（XOD）及心肌细胞NF-κB表达的影响.方法 SD大鼠30只分为假手术组、手术对照组、依达拉奉治疗组,手术对照组和治疗组均予盲肠结扎穿刺法制作大鼠脓毒症模型,3组术前15 min及术后3 h各皮下注射盐酸左氧氟沙星20 mg/kg,治疗组于术前15 min及术后3 h各皮下注射依达拉奉5 mg/kg,3组术后18 h取心肌线粒体测SOD、XOD,及用RT-PCR法测定大鼠心肌组织的NF-κB mRNA的表达,并对心肌线粒体进行电镜检查.结果 手术对照组心肌细胞线粒体SOD活力显著低于假手术组,心肌组织NF-κB mRNA的表达显著高于假手术组;治疗组心肌细胞线粒体SOD活力显著高于手术组,心肌组织NF-κB mRNA的表达显著低于手术组,各组间心肌细胞线粒体XOD活力比较差异无统计学意义.手术对照组电镜下可见心肌线粒体轻度水肿,治疗组心肌线粒体嵴多、致密（正常）.结论 依达拉奉能使心肌线粒体SOD活力升高,并使心肌细胞NF-κB mRNA的表达下降,提高清除自由基和抗氧化能力,减轻炎症级联放大效应,具有保护心肌作用.