线粒体靶向抗氧化剂SS31对人晶状体上皮细胞氧化损伤的影响

背景老视是影响中老年视觉质量和生活质量的主要原因之一，主要与晶状体上皮细胞（LECs）随年龄增长而发生的氧化损伤有关。SS31是线粒体靶向的抗氧化剂，研究其对LECs氧化损伤的保护作用对老视的预防和治疗有重要意义。目的探讨SS31对叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导的人LECs氧化损伤的保护作用。方法用含质量分数10％胎牛血清（FBS）的DMEM低糖培养液对人LECs细胞株HLEB．3进行培养和传代，用200μmol／Lt-BHP处理HLEB一3细胞18h以构建细胞氧化损伤模型。培养的细胞分为空白对照组、t-BHP模型组、10nmol／LSS31±T—BHP组、100nmol／LSS31±T—BHP组、1μmol／LSS31±T—BHP组、10μmol／LSS31±T—BHP组和100μmol／Lt-BHP组，应用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞的存活率，以筛选SS31的最佳药物浓度。再将培养的细胞分为空白对照组、t-BHP模型组和1p^mol／LSS31±t．BHP共培养组。采用JC-1染色法并用流式细胞仪检测各组HLEB一3细胞线粒体膜电位的改变，用MitoSOX染色在荧光显微镜下检测各组活细胞线粒体中产生活性氧簇（ROS）的情况。结果200μmol／Lt-BHP加入培养液作用HLEB一3细胞18h后，与空白对照组的细胞存活率（100±0）％比较，模型组细胞存活率下降至（53．424-2．52）％，不同浓度的SS31组细胞存活率均较模型组明显升高，各组细胞存活率的差异有统计学意义（F=58．349，P〈0．01），其中以1μmol／LSS31组细胞存活率最高（82．134-3．15）％，明显高于t-BHP模型组，差异有统计学意义（t=28．710，P〈0．05）。各组HLEB-3细胞线粒体膜电位检测结果提示，正常对照组红／绿荧光强度比值为7．07±0．06，t-BHP模型组为4．46±0．14，1μmol／LSS31±t—BHP共培养组为5．76±O．26，3个组间差异有统计学意义（F=172．332，P〈0．01），空白对照组和1Izmol／LSS31±t—BHP共培养组红／绿荧光强度比值均明显高于t-BHP模型组，差异均有统计学意义（扛2．609、1．303，P〈0．001）。荧光显微镜下显示正常对照组HLEB一3线粒体内仅可见微弱的ROS红色荧光，t-BHP模型组细胞线粒体内ROS荧光明显增强，红色荧光染色的细胞明显增多，而1μmol／LSS31±t—BHP共培养组细胞线粒体内ROS荧光明显弱于t-BHP模型组。结论SS31能有效预防t，BHP诱导的HLEB-3细胞的氧化损伤，可能是治疗老视和其他年龄相关性晶状体疾病一个潜在的靶向治疗手段。

线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对氮芥诱导BEAS-2B细胞损伤的影响

目的:探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO对氮芥(HN2)诱导人支气管上皮细胞系BEAS-2B的影响。方法:BEAS-2B细胞分为正常对照组、Mito-TEMPO对照组、HN2染毒组和Mito-TEMPO干预组,其中正常对照组和Mito-TEMPO对照组分别给予含DMSO(体积分数为0.1%)和Mito-TEMPO(100μmol/L)的无血清培养基处理26 h,HN2染毒组给予含DMSO的无血清培养基预处理2 h,然后给予HN2(8μmol/L)染毒24 h,Mito-TEMPO干预组给予Mito-TEMPO(100μmol/L)预处理2 h,然后HN2(8μmol/L)和Mito-TEMPO(100μmol/L)共处理24 h。分别采用CCK-8法检测细胞活性,速率法检测细胞培养基上清乳酸脱氢酶(LDH)活性,倒置显微镜观察细胞形态,Annexin V/PI探针法流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1探针法检测线粒体膜电位,紫外分光光度法检测细胞匀浆ATP含量,MitoSOX、DCFH-DA、DHE探针法分别检测细胞内线粒体ROS、H2O2及总ROS水平,实时荧光定量PCR检测炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平。结果:与HN2染毒组相比,Mito-TEMPO干预组细胞活性降低了约42.6%(P<0.05),细胞上清LDH水平显著增加(P<0.05),同时伴有异常形态细胞增多,Mito-TEMPO干预组细胞线粒体ROS水平降低了53.6%(P<0.05),细胞内H2O2水平及总ROS水平分别升高了171%和43.4%(均为P<0.05)。Mito-TEMPO干预对HN2染毒导致的细胞凋亡比例、线粒体膜电位、ATP含量、TNF-α、IL-6的mRNA表达水平等指标改变均无显著影响(P>0.05)。结论:100μmol/L的Mito-TEMPO干预在HN2染毒BEAS-2B细胞模型中促进了细胞损伤,其机制可能与提高细胞内H2O2水平及总ROS水平有关。

川崎病与氧化应激的研究进展

氧化应激是川崎病发病机制之一,活性氧的过量产生将导致氧化应激,控制活性氧的产生将有助于减轻氧化应激的程度,有可能改善川崎病患儿预后,因此抗氧化剂可以作为川崎病急性期的辅助疗法,特别是针对特定细胞器的靶向抗氧化剂有望成为川崎病的新型治疗措施。本文将对活性氧的产生和在川崎病中产生的病理作用,以及抗氧化剂目前的研究进展进行讨论。Oxidative stress is one of the pathogenesis of Kawasaki disease. Excessive production of reactive oxygen species will lead to oxidative stress. Controlling the production of reactive oxygen species will help to reduce the degree of oxidative stress and may improve the prognosis of children with Kawasaki disease. Therefore, antioxidants can be used as an adjuvant therapy for the acute phase of Kawasaki disease, especially for specific organelles. Targeted antioxidants are expected to become a new treatment for Kawasaki disease. This article will discuss the production of reactive oxygen species and the pathological effects in Kawasaki disease, as well as the current research progress of antioxidants.

MitoQ对神经系统保护作用的研究进展

线粒体靶向抗氧化剂MitoQ是泛癸利酮的一种合成类似物,能靶向聚集于线粒体中清除过度生成的氧自由基,也能抑制脂质过氧化反应,保护线粒体膜免受氧化应激损伤,从而改善线粒体功能。MitoQ在以线粒体功能障碍和氧化应激损伤为主要病理表现的神经系统疾病(如脑缺血、阿尔茨海默病、帕金森病、弗里德赖希共济失调、多发性硬化)中均具有一定的作用。