线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂调控冠心病大鼠心肌凋亡的功能及机制

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组、冠心病组及二氮嗪低、中、高剂量组,除对照组外,其余各组大鼠均用高脂饮食联合垂体后叶素构建冠心病大鼠模型,造模后二氮嗪低、中、高剂量组大鼠分别灌胃3,5,7 mg/kg的二氮嗪,每日给药1次,共14 d,对照组和冠心病组大鼠灌胃等体积的生理盐水。治疗14 d后,取各组大鼠心肌组织,苏木精-伊红(HE)染色检测心肌损伤,原位缺口末端转移酶标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织中Cleaved-Caspase 3、Bcl-2、Bax、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)表达。结果:相比于对照组,冠心病组大鼠心肌损伤严重,血清TNF-α、IL-1β、IL-6显著增加,心肌细胞凋亡指数增加,Cleaved-Caspase 3和Bax表达增加,Bcl-2表达、PI3K和AKT磷酸化水平降低(P<0.05)。相比于冠心病组,二氮嗪低、中、高剂量组大鼠心肌损伤均有缓解,TNF-α、IL-1β、IL-6降低,心肌细胞凋亡指数降低,Cleaved-Caspase 3和Bax表达下调,Bcl-2表达、PI3K和AKT磷酸化水平增加(P<0.05)。结论:线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪可缓解冠心病大鼠心肌细胞损伤及凋亡,其机制为激活抗凋亡的PI3K/AKT信号通路。

线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠血管内皮损伤的影响及相关机制研究

目的探究线粒体ATP敏感性钾离子通道(mito-KATP)开放剂对冠心病模型大鼠血管内皮损伤的影响及作用机制。方法30只雄性无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为3组:对照组、模型组和二氮嗪组,每组10只。模型组和二氮嗪组采用高脂饮食饲养+腹腔注射脑垂体后叶素制备冠心病大鼠模型,其中,二氮嗪组制备模型后给予3 mg/kg二氮嗪灌胃治疗,对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续给药14 d。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)炎性因子表达;检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血脂指标水平及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)等血管内皮损伤标志物水平;比较各组大鼠血管内皮细胞功能、心功能及心肌细胞病理情况;多重逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)实验和蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织成纤维细胞生长因子2(FGF-2)、血管内皮生长因子(VEGF)等血管生成因子mRNA和蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组及二氮嗪组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05),TC、TG、LDL-C水平明显升高(P<0.05),HDL-C水平明显降低(P<0.05),AngⅡ、ADMA水平明显升高(P<0.05),左室收缩压(LVSP)、左心室压力变化最大上升速率(+dp/dt_(max))、左心室压力最大下降速率(-dp/dt_(max))、冠状动脉血流量(CF)明显下降(P<0.05),心肌细胞形态紊乱,不同程度炎症浸润表现,心肌组织中FGF-2、VEGF基因及蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,二氮嗪组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平及TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),AngⅡ、ADMA水平明显下降(P<0.05),LVSP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、CF升高(P<0.05),心肌细胞水肿缓解,炎症状态减轻,心肌组织中FGF-2、VEGF基因及蛋白表达水平明显改善(P<0.05)。结论mito-KATP开放剂可通过降低炎症反应,改善冠心病大鼠血脂代谢,同时促进大鼠血管FGF-2和VEGF表达上调,减轻血管内皮损伤。

线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂改善冠心病大鼠模型心肌氧化应激损伤的分子机制

目的探索线粒体ATP敏感性钾离子通道(mito KATP)开放剂改善冠心病大鼠模型心肌氧化应激损伤的分子机制。方法选取40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组(不造模且不给予二氮嗪药物干预)、假手术组(仅切皮不进行造模手术)、模型组(制作冠心病大鼠模型,但不给予二氮嗪药物干预)和药物组(制作冠心病大鼠模型,给予二氮嗪药物3 mg/kg干预),每组10只。利用实时荧光定量聚合酶链式反应及Western blotting实验测定各组血管生成因子[成纤维细胞生长因子2(FGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)]m RNA及相关蛋白的表达量,同时比较各组大鼠细胞内的乳酸脱氢酶、线粒体膜电位(MMP)和细胞死亡率。采用SPSS 22.0软件进行数据处理。组间比较采用方差分析或者t检验。结果与模型组相比,药物组大鼠FGF-2[(100. 21±12. 33)×103vs (120. 43±10. 33)×103IU]与VEGF [(163. 31±9. 33)×10~3vs (181. 33±11. 13)×10~3IU]m RNA转录水平、FGF-2 [(0. 69±0. 33) vs (1. 32±0. 33)与VEGF [(0. 68±0. 33) vs (1. 20±0. 13)]表达水平、乳酸脱氢酶[(49. 32±3. 51) vs (156. 12±10. 18) U/L]表达均显著降低(P <0. 05)。与模型组相比,药物组细胞死亡率显著降低[(30. 32±3. 48)%vs (66. 12±3. 23)%],而荧光强度显著增加[(780. 12±9. 20) vs (220. 24±6. 15),P<0. 05]。结论 mito KATP通道开放剂可通过促进冠心病大鼠血管FGF-2和VEGF增加,增强乳酸脱氢酶活性,降低MMP、细胞死亡率和冠心病大鼠心肌氧化应激损伤。

线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠心肌细胞影响及机制研究

目的探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠心肌细胞影响及机制.方法将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、二氮嗪低、中、高剂量组,每组10只.除对照组外,其余各组大鼠以高脂饲料喂养6周后,均以30μg/kg的剂量腹腔注射垂体后叶素,每24h注射1次,共3次,构建冠心病大鼠模型,造模后检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necro-sis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察心肌组织结构变化;原位缺口末端转移酶标记法检测大鼠心肌细胞凋亡;Western blot法检测心肌组织内向整流钾通道6.2亚基(inwardly rectified potassium channel6.2,Kir6.2)和细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2的表达水平.结果冠心病大鼠造模成功,与模型组比较,各给药组大鼠血清炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6显著下降(P<0.05);HE染色结果表明,各给药组大鼠心肌组织结构损伤显著改善;且心肌细胞凋亡数目显著减少(P<0.05);与模型组比较,各给药组Kir6.2表达量显著上升,且呈剂量依赖性,ERK1/2表达量亦显著下降(P<0.05).结论线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪能够对冠心病大鼠起到治疗作用,其机制可能为降低炎性反应,以及通过抑制ERK1/2的表达来缓解心肌细胞凋亡.

线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠血脂代谢和血管内皮损伤的影响及相关机制研究

背景线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂是一类扩血管药物,临床常用于治疗心脑血管疾病,但其对冠心病患者血脂代谢的影响、对血管内皮损伤的保护作用及相关机制尚不完全明确。目的探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对冠心病大鼠血脂代谢和血管内皮损伤的影响及机制。方法2018年8月-2019年2月,将50只6周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。除对照组外,其他组大鼠均喂养高脂饲料、腹腔注射垂体后叶素制备冠心病大鼠模型,低、中、高剂量组大鼠分别按照二氮嗪3、5、7 mg/kg进行灌胃治疗,对照组、模型组大鼠均给予相同体积0.9%氯化钠溶液;五组大鼠均连续给药14 d。比较五组大鼠治疗前后血脂指标〔包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)〕,治疗后眼球血OD340值及颈动脉血管内皮细胞成纤维细胞生长因子2(FGF-2)、血管内皮生长因子(VEGF)相对表达量。结果治疗前模型组及低、中、高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平高于对照组(P<0.05);治疗前五组大鼠HDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后模型组及低、中、高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平高于对照组,低、中、高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平低于模型组,中、高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平低于低剂量组,高剂量组大鼠TC、TG、LDL-C水平低于中剂量组(P<0.05);治疗后五组大鼠HDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后模型组大鼠眼球血OD340值低于对照组,中、高剂量组大鼠眼球血OD340值高于对照组,低、中、高剂量组大鼠眼球血OD340值高于模型组(P<0.05)。治疗后模型组及低、中剂量组大鼠颈动脉血管内皮细胞FGF-2及VEGF相对表达量高于对照组,低、中、高剂量组大鼠颈动脉血管内皮细胞FGF-2及VEGF相对表达量低于模型组(P<0.05)。结论线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂可通过抑制羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶活性而改善冠心病大鼠血脂代谢,并可通过下调颈动脉血管内皮细胞FGF-2及VEGF的表达量而减轻血管内皮损伤。

线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂对大鼠冠状动脉硬化斑块及血脂代谢的影响

目的探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)通路对大鼠冠状动脉硬化斑块及血脂代谢的影响。方法将50只大鼠分为对照组、模型组、二氮嗪组、PPARγ抑制剂(GW9662)组、二氮嗪+GW9662组,除对照组外,其余各组采用高脂饲料喂养、腹腔注射维生素D_(3)建立冠状动脉粥样硬化性心脏病大鼠模型。检测血脂指标、血清炎症因子水平,油红O染色观察主动脉弓血管壁脂质沉淀情况,透射电镜观察主动脉弓内皮细胞线粒体损伤情况,RT-qPCR法和Western blot法检测主动脉弓PPARγ、核因子-κB p65(NF-κB p65)mRNA和PPARγ、NF-κB p65、NF-κB p-p65蛋白表达量。结果(1)血脂指标及炎症因子:与对照组比较,模型组、GW9662组、二氮嗪组、二氮嗪+GW9662组血脂指标及血清炎症因子水平均较高,其中GW9662组>模型组>二氮嗪+GW9662组>二氮嗪组(P<0.05)。(2)主动脉弓血管壁脂质沉淀:对照组无脂质沉淀,模型组有大量成片脂滴沉淀,GW9662组较模型组脂滴沉淀更多,二氮嗪组较模型组脂滴沉淀减少,而二氮嗪+GW9662组较二氮嗪组脂滴沉淀增多。(3)主动脉弓血管内皮细胞中线粒体损伤:对照组线粒体双层膜结构清晰、完整;模型组线粒体双层膜结构不连续,线粒体嵴断裂或模糊,呈现肿胀和空泡化现象;GW9662组较模型组线粒体嵴断裂明显,部分仅留残端,肿胀和空泡化严重;二氮嗪组较模型组线粒体损伤减轻;而二氮嗪+GW9662组较二氮嗪组线粒体损伤稍加重。(4)主动脉弓PPARγ、NF-κB mRNA和蛋白及NF-κB p-p65蛋白表达水平:与对照组比较,模型组、GW9662组、二氮嗪组、二氮嗪+GW9662组PPARγmRNA和蛋白相对表达量降低,其中GW9662组<模型组<二氮嗪+GW9662组<二氮嗪组(P<0.05);与对照组比较,模型组、GW9662组、二氮嗪组、二氮嗪+GW9662 NF-κB p-p65蛋白相对表达量升高,其中GW9662组>模型组>二氮嗪+GW9662组>二氮嗪组(P<0.05)。结论线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪可减轻大鼠冠状动脉硬化斑块病变程度,改善血脂代谢,其机制为通过调控PPARγ通路发挥改善作用。

线粒体ATP敏感性钾离子通道参与远程预处理对大鼠脑保护作用的机制

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道在远程预处理对大鼠脑保护效应中的作用.方法:SD雄性大鼠,随机分为4组(每组n=10):①RPC+NS组,行远程预处理前15min,给予生理盐水1mL静脉注射,远程预处理1h后行MCAO;②RPC+5-HD组,行远程预处理前15min给予5-羟基葵酸盐(5-HD)10mg/kg静脉注射,远程预处理后1h行MCAO;③DIAZ组,MCAO前30min给予二氮嗪(DIAZ)5mg/kg腹腔注射;④DMSO组,MCAO前30min给予5g/LDMSO.所有大鼠行MCAO模型阻闭120min恢复再灌注,观察再灌注后24h时神经功能损害并取大脑行TTC染色测量脑梗死容积百分比.结果:①神经功能障碍评分:再灌注24h后神经功能障碍评分,RPC+NS组和DIAZ组与RPC+5-HD组和DMSO组相比有统计学差异(P<0.05),RPC+5-HD组和DMSO组相比无统计学差异(P>0.05).②脑梗死容积百分比:再灌注24h后脑梗死容积百分比RPC+NS组[(16.3±2.9)%,P=0.00]和DIAZ组[(17.5±8.9)%,P=0.00]明显小于RPC+5-HD组(46.1±10.1)%和DMSO组(36.4±10.9)%,而DMSO组和RPC+5-HD组相比较无统计学差异(P=0.216),RPC+NS组和DIAZ组相比较无统计学差异(P=0.747).结论:线粒体敏感性钾离子通道阻断剂可阻断远程预处理保护作用,提示线粒体敏感性钾离子通道参与远程预处理对大鼠脑缺血耐受的形成机制.

线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪对大鼠缺血心肌细胞的保护作用

目的评价线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)开放剂二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞超微结构和死亡率的影响。方法选用Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、心肌细胞损伤模型组(皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg)和二氮嗪20mg/kg组。24h后处死动物,观察心肌细胞超微结构的改变。结果异丙肾上腺素皮下注射可以引起心肌细胞超微结构明显受损,预先给予二氮嗪口服可以减轻超微结构的损伤。二氮嗪10～100μmol/L可以降低缺血心肌细胞的死亡率,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞具有保护作用。

三磷酸腺苷敏感性钾离子通道开放剂在大鼠离体心脏超极化停跳中的心肌保护作用

目的三磷酸腺苷敏感性钾离子通道开放剂(PCOs)的应用是介导心脏超极化停跳的关键,以PCOs-Nicorandil,应用于纯种成年SD大鼠离体心,观测Nicorandil对心肌缺氧/再灌注的影响。方法选用成年纯种SD大鼠共12只,随机分两组,对照组停灌30分钟,以Krebs-Hensenleit液(K-H液)再灌注30分钟;开放剂组停灌前以Nicorandil 100μmol/L灌注5分钟,停灌30分钟,以K-H液再灌注30分钟。观察指标:持续监测左室内压、左室内压变化速率(dp/dt)及心率、冠状动脉流量;免疫组化法检测HSP70的表达。结果开放剂组再灌注时的LVP、心率、dp/dt及冠状动脉流量均较对照组高,其中dp/dt和冠状动脉流量的增加最为明显;开放剂组再灌注30分钟时的血流动力学结果均超过停灌前水平;HSP70于开放剂组的表达为阴性,对照组为阳性,两组差异有显著性。结论 Nicorandil对缺氧、再灌注离体心具有确实的保护作用。

ATP敏感性钾通道开放剂对脑缺血／再灌注损伤的保护作用及信号转导机制研究

目的 观察ATP敏感性钾通道（KATP）开放剂对大鼠脑缺血／再灌注（I／R）损伤后神经元凋亡的保护作用及其信号转导机制。方法 将200只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（A组）、缺血组（B组）、KATP开放剂治疗组（C组）及KATP开放剂和阻断剂联合治疗组（D组）。应用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，各组于缺血后2h进行再灌注。各组于再灌注6、12、24、48和72h分别取5只大鼠脑组织标本，用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测神经元凋亡，用免疫组化法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和caspase-9的蛋白表达；各组其余5只大鼠用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察caspase-3和caspase-9的mRNA表达。结果 B、C、D组再灌注后各时间点凋亡神经元数以及caspase-3、caspase-9的蛋白和mRNA表达均显著高于A组（P〈0．05或P〈0．01），C组各指标均显著低于B组和D组（P〈0．05或P〈0．01），而B组与D组各指标间比较差异均无显著性（P均〉0．05）。结论 KATP开放剂能显著减少脑I／R损伤后神经元凋亡以及caspase-3、caspase-9的mRNA和蛋白表达，提示KATP开放剂可能通过抑制线粒体通路减少脑I／R损伤后的神经元凋亡。

ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林对高原脱习服的影响

目的:观察长期口服埃他卡林对高原脱习服的影响。方法:该临床研究采用随机双盲安慰剂平行对照试验方法,随机分为埃他卡林试验组和安慰剂对照组,两组受试者分别为39例和17例。其中,受试者分别口服埃他卡林片(5 mg/片,1次/日)或安慰剂(1片/日),连续服用药物7个月,下山到3700 m停留2 d并停止服药,再返回到海拔1400 m的平原地区,自返回平原的第2、4、6天,进行高原脱习服症状调查,随访受试者的高原脱习服症状并进行症状评分。结果:长期驻扎在5200～5380 m高海拔地区的受试者,返回平原后第2、4、6天,分别有82.4%、52.9%、23.5%的人员产生显著的高原脱习服症状,长期口服埃他卡林,高原脱习服发生率分别为43.6%、30.8%、38.5%;安慰剂对照组返回平原后脱习服反应程度的评分,在第2、4、6天分别为(6.0±1.9)、(4.6±1.0)、(3.8±1.5)分,埃他卡林治疗组分别为(4.4±2.4)、(3.3±1.8)、(4.0±1.5)分,两组比较,在返回低海拔第2、4天,高原脱习服反应的发病率及发病程度均显著减少,第6天的数据两组之间差别无统计学意义。结论:高原地区长期口服埃他卡林可显著减轻高原脱习服的发病程度,降低高原脱习服的发生率,预防高原脱习服。

电针内关穴对心肌缺血大鼠ATP敏感性钾离子通道蛋白的影响

目的:研究电针循经穴位与其他穴位对心肌缺血大鼠心肌细胞ATP敏感性钾离子通道相关蛋白表达的影响。方法:通过注射盐酸异丙肾上腺素制作大鼠心肌缺血模型,针刺内关、列缺、非经非穴进行干预,采用Western blot检测Kir6.1、Kir6.2、SUR2A和SUR2B的蛋白表达水平。结果:与模型组比较,内关组和列缺组蛋白表达均显著降低,非经非穴组蛋白表达降低不显著;与列缺组比较,内关组蛋白表达显著降低。结论:电针内关穴和列缺穴均可降低心肌缺血大鼠心肌细胞ATP敏感性钾通道相关蛋白的表达,且心包经内关穴的针刺效应优于列缺穴。

神经系统ATP敏感性钾离子通道相关研究进展

ATP敏感性钾离子通道（ATP-sensitive potassium channel,KATP通道）联系细胞代谢与细胞的电活动,KATP通道在神经细胞兴奋性调控、缺血损伤保护等生理、病理过程中发挥了重要作用[1],现将神经系统KATP通道研究相关进展总结如下。

线粒体ATP敏感钾通道开放剂对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨线粒体ATP敏感钾通道开放剂二氮嗪（DE）对肺缺血-再灌注损伤（L／R）的保护作用。方法建立大鼠肺I／R模型，随机设立假手术（sham）组、I／R组、DE组、线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-羟基葵酸（5-HD）组，每组10只，观察各组肺组织病理形态学变化，测定肺湿／干质量比，检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与sham组比较，I／R组肺组织出现明显损伤性病理形态学变化，肺湿／干质量比明显增加（P〈0．05），肺组织MPO活性显著增高、MDA含量显著增加和SOD活性显著降低（P〈0．05）。与I／R组比较，DE组肺组织损伤明显减轻，肺湿／干质量比降低（P〈0．05），肺组织MPO活性降低、MDA含量减少、SOD活性增高（P〈0．05）。5-HD组各观察指标与I／R组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论线粒体ATP敏感钾通道开放剂DE可通过抑制中性粒细胞聚集、减少自由基产生、增强抗氧化能力对大鼠肺缺血-再灌注损伤产生明显保护作用，该保护作用可被线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-HD所拮抗。

PI3K/Akt在线粒体ATP敏感性钾通道开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞FKN表达中的作用

目的观察PI3K/Akt信号在线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)fractalkine(FKN)表达中的作用。方法培养SD大鼠离体MMECs,建立缺氧复氧损伤模型24皿,随机分为4组(n=6):正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(DZ组)、LY294002+二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(LY294002+DZ组)。DZ组加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,LY294002+DZ组在加入100μmol/L LY294002预处理2h后再加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,然后和缺氧复氧组同样进行缺氧2h、复氧2h。Hoechst染色观察凋亡细胞显微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,RT-PCR检测Akt和FKNmRNA水平,Western blotting检测Akt蛋白水平。结果与N组比较,H/R组细胞增殖率显著降低(P<0.01)、凋亡率显著升高(P<0.01),FKN mRNA和FKN蛋白表达显著增加(P<0.01)、Akt mRNA和Akt蛋白升高(P<0.05)。与H/R组比较,DZ组细胞增殖率显著升高(P<0.01)、凋亡率显著降低(P<0.01),AktmRNA和蛋白显著升高(P<0.01和P<0.05),FKN mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与DZ组比较,LY294002+DZ组Akt mRNA和蛋白显著降低(P<0.01)、FKN mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论mito-KATP开放通过PI3K/Akt信号调节下游FKN mRNA的转录及表达,促使细胞增殖,抑制细胞凋亡,实现对缺氧复氧MMECs损伤的保护。

心血管系统ATP敏感性钾离子通道的结构和功能

1983年Noma在豚鼠的心肌细胞中首次发现了一种特殊的钾离子通道,这种通道的开放受到细胞内的ATP浓度的调控,命名为ATP敏感性钾离子通道（ATP-sensitive potassium channel,KATP通道）。随后发现这类通道广泛分布于其它细胞中,如：神经细胞、平滑肌细胞、胰岛β细胞和骨骼肌细胞等。KATP通道直接由细胞内的ATP来调控,因此将细胞代谢与细胞电活动联系起来。

开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究开放线粒体 ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。方法 采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,将 38只大鼠随机分成 4组 :假手术组 (S)、缺血组 (I)、缺血 +二氮嗪组 (D)、缺血 +二氮嗪 +5 - HD组 (DH)。观察各组脑梗死体积和线粒体标志酶活性变化。结果 与 I组比较 ,D组脑梗死体积明显减少 (自 2 3.5 7± 7.83%减至 8.16± 3.81% ) ,线粒体标志酶活性明显增高 ,差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,DH组与 I组比较无明显差异 (P>0 .0 5 )。结论 二氮嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ,其机制与开放线粒体 ATP敏感性钾通道 。

线粒体ATP敏感性钾通道开放预防脑缺血-再灌注引起的神经细胞凋亡

目的 通过观察凋亡蛋白酶 (caspase 3)活性的变化 ,探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放预防脑缺血 再灌注引起的神经细胞凋亡的机制。方法 选择雄性SD大鼠 18只 ,随机分为三组 :C组 (n =6 ) ,单纯行大脑中动脉栓死 (MCAO) ;D组 (n =6 ) ,MCAO前 30min给予二氮嗪 5mg/kg腹腔注射 ;H组 (n =6 ) ,先给予二氮嗪阻断剂 (5 HD) 10mg/kg静脉注射 ,15min后再给予二氮嗪 5mg/kg腹腔注射 ,30min后行MCAO。所有大鼠缺血 2h再灌注 2 2h后行神经功能学评估 ,取大脑梗死灶半影区组织 ,提取胞浆液 ,酶标法测Caspase 3活性。 结果 D组与C组、H组相比神经功能学评分显著提高 [(11 88± 2 70 )、(8 0 0± 1 79)、(8 38± 1 0 6 ) ](P <0 0 1) ,Caspase 3的活性明显降低[(9 5 7± 3 80 )、(2 9 80± 17 6 9)、(16 2 5± 6 76 )FU·μg 1·min 1](P <0 0 5 )。结论 线粒体ATP敏感性钾通道开放通过抑制Caspase 3活性预防神经细胞凋亡的发生 ,对脑缺血

ATP敏感性钾离子通道在脑缺血缺氧中的双重作用

ATP敏感性钾离子通道(KATP)是一种微弱的内向整流性钾离子通道。该通道对钾离子具有选择性,能量的消耗可以使其激活,通过将细胞代谢和细胞电活动联系在一起,从而在细胞功能的调节中起到重要的作用。目前已有关于KATP在脑缺血缺氧中作用的报道,但大部分研究将重心放在该通道在脑缺血缺氧早期所起的保护作用方面,而其在后期引起的损伤作用并未引起足够的重视。