寡精和严重少精患者精子线粒体ATPase6基因突变的研究

目的:探讨线粒体ATPase6基因突变与男性不育的关系。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphism,PCR-SSCP)检测寡精和严重少精患者线粒体ATPase6基因,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)筛查突变,测序验证、酶切鉴定及基因分型。结果:男性不育患者中A8784G、C8829T突变率均为9%,正常已育男性对照组没有检测到突变。结论:推测两点中性突变可能通过降低ATPase6翻译效率,影响精子产能和精液质量,确切机制有待于进一步研究。

高血压患者及大鼠线粒体ATPase 6基因的克隆、表达与突变研究

目的：研究正常血压与高血压鼠以及正常血压与高血压患者的差异基因。方法：用差别杂交法（Differentialhybridization）筛选正常人心脏cDNA文库的部分克隆，得到多个在自发性高血压鼠（SHR）心肌和高血压患者外周白细胞中高表达的线粒体基因。重组质粒，PCR－SSCP和测序，进行基因突变分析。结果：SHR鼠心肌线粒体ATPase6基因构象改变,8701位碱基由G→A（G8701A），编码的第59位氨基酸密码子由丙氨酸变成苏氨酸；A8708G，编码的第61位氨基酸由组氨酸变成精氨酸。高血压病患者外周血白细胞线粒体ATPase6基因8584位碱基突变（G8584A），编码的第20位氨基酸由丙氨酸变成苏氨酸，这一变化与SHR线粒体ATPase6基因改变相一致。结论：高血压病患者外用血白细胞线粒体ATPase6基因G8584A突变很可能在高血压病心肌肥厚的发生、发展中具有意义，并可能是高血压病的特异性改变。

失血性休克肠上皮细胞线粒体DNA ATPase6,8亚基基因的改变

目的 观察失血性休克大鼠肠上皮细胞mtDNAATPase 6,8亚基基因的改变。方法 将 6只Wistar大鼠分成单纯手术组、休克组。分别提取mtDNA ,采用PCR技术扩增后测序 ,检测突变点。结果 Wistar大鼠mtDNAATPase 6,8亚基基因存在多态性 ,休克组存在A 7797缺失和一定数量点突变 :A7863G ,G795 0T ,C82 94G ,T85 0 5G。结论 失血性休克 5h ,肠上皮细胞mtDNAATPase 6,8亚基基因会发生突变 ,由此可导致所编码的氨基酸的改变 。

缺血再灌注大鼠肠上皮细胞线粒体DNA ATPase 6, 8亚基基因的改变(英文)

提要:目的观察缺血再灌注大鼠肠上皮细胞mtDNA ATPase 6,8亚基基因的改变情况。方法将6只Wistar大鼠分成对照组、缺血再灌注组。分别提取mtDNA,采用PCR技术扩增后测序,检测突变点。结果Wistar大鼠mtDNA ATPase 6,8亚基基因存在多态性,在缺血再灌注组存在a7 797缺失和一定数量点突变:A7 779T,T8 515G,T8 520G,C8 535G。结论缺血再灌注后,肠上皮细胞mtDNA ATPase 6,8亚基基因存在损伤,由此可能导致所编码的氨基酸改变。

从ATPase8-6基因研究杂交多倍体鱼线粒体母性遗传(英文)

异源四倍体鲫鲤是世界上首例人工培育的两性可育并形成群体的且能自然繁殖的四倍体鱼。本文采用质粒克隆测序法测定了红鲫、异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和三倍体湘云鲤的ATPase8和ATPase6基因全序列 ,结合鲤鱼、日本白鲫和斑马鱼的同源序列 ,对不同倍性水平鲤科鱼类的ATPase8和ATPase6基因进行了比较 ,分析了碱基组成、变异情况以及核苷酸和氨基酸序列差异。红鲫、鲤鱼、异源四倍体鲫鲤、日本白鲫、三倍体湘云鲫和三倍体湘云鲤之间的序列差异为 0 0 % - 1 3 4 % ,它们与外群斑马鱼之间的序列差异为 2 7 9% -31 0 %。用MEGA软件中的MP法、ME法、NJ法和UPGMA法构建分子系统树 ,得到了相似的拓扑结构。结果分析表明 ,人工杂交多倍体异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和三倍体湘云鲤在线粒体ATPase8和ATPase6基因上具有严格的母性遗传特征。值得注意的是 ,异源四倍体鲫鲤经过 1 1代的繁育后 ,与其原始母本红鲫仍然保持了非常高的同源性 ,说明了新的异源四倍体基因库在线粒体ATPase8和ATPase6基因上拥有稳定的遗传特性。对不同倍性鲤科鱼类线粒体ATPase8和ATPase6基因的研究表明 。

低氧对喜马拉雅旱獭线粒体ATPase6基因表达的影响

目的探讨低氧下喜马拉雅旱獭与平原地区同种动物(松鼠)线粒体ATPase基因表达的差异,试图说明低氧下低氧适应性动物的有氧代谢能力增强,以适应低氧环境。方法酚氯仿法分别提取样品和对照动物全基因组,RT-PCR获得线粒体ATPase6基因片段,通过灰度比较探讨喜马拉雅旱獭线粒体ATPase6基因表达的差异。结果高原动物ATPase6基因的表达高于平原动物。结论低氧下高原动物为维持生理代谢,其基础代谢的水平要高于平原动物,而这种基础代谢水平的升高与ATPase6基因结构的改变及其表达的改变是呈相关性的。

^(60)Coγ射线对人线粒体COXI和ATPase6表达水平的影响

目的观察60Coγ射线对人外周血线粒体COXI和ATPase6基因和蛋白质水平表达的影响,探讨线粒体编码基因用于辐射生物剂量估算的可行性。方法采用60Coγ射线照射正常人离体外周血,照射剂量率为1.013 Gy/min,剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 Gy,。照后6小时,用RT-PCR技术检测基因的表达水平,用流式细胞仪检测蛋白质的表达水平,分别拟合最佳回归方程,建立剂量-效应曲线。结果(1)0~3.0 Gy,COXI基因表达水平的最佳回归方程为Y=0.629+0.256D(r2=0.920,p<0.01),ATPase6基因表达水平的最佳回归方程为Y=0.221+0.805D(r2=0.912,p<0.01)。(2)0~5.0 Gy,COXI蛋白质表达水平的最佳回归方程为Y=1.054+0.595D(r2=0.919,p<0.01);ATPase6蛋白质表达水平与照射剂量间的关系不明显,不能拟合出最佳回归方程。结论60Coγ射线照射人离体外周血,随着照射剂量的增加,线粒体COXI的基因与蛋白质表达水平一致,呈增加趋势,且有良好的线性关系,有望用于辐射生物剂量的估算。

线粒体DNA序列分析封闭群小鼠遗传稳定性

目的分析ICR小鼠线粒体ATPase6和D—Loop基因多态性及封闭群ICR小鼠遗传稳定性。方法在一个亲本雌鼠100只繁殖产生的共1000只后代群体中随机取12周龄雄鼠20只，提取小鼠睾丸生殖细胞DNA，PCR扩增小鼠线粒体ATPase6和D-Loop基因，产物纯化后测序，测序结果与小鼠线粒体标准序列比对，比较20只小鼠的序列差异。结果检测的20只小鼠ATPase6和D—Loop基因序列完全一致，且与小鼠线粒体标准序列完全一致。结论ICR小鼠群体内未检测到ATPase6和D—Loop基因的多态性变异，该群体具有较好的线粒体遗传稳定性。

Leigh综合症和Leigh样综合症研究进展

Leigh综合症是一种破坏性很大的神经系统变性疾病,是婴幼儿最常见的线粒体疾病。本文对Leigh综合症和Leigh样综合症在遗传背景、致病力、诊断、治疗和预后方面的最新进展进行综述。