秦川牛宰后成熟过程中线粒体Tu翻译延长因子对牛肉持水性的影响

探究秦川牛宰后成熟过程中线粒体Tu翻译延长因子(mitochondrial Tu translation elongation factor,TUFM)表达对肉的持水性影响。以秦川牛背最长肌为研究对象,测定4℃不同成熟时间下的pH值、贮藏损失、离心损失、蒸煮损失、水分分布、肌原纤维蛋白等指标变化情况,测定不同成熟时间(0、96、192 h)下TUFM表达量及其含量、Beclin1蛋白表达量。结果显示:在秦川牛宰后成熟期间,肌原纤维蛋白发生降解,TUFM的表达量与Beclin1蛋白表达量和牛肉的持水性存在密切关系,其中蛋白质组学测定的TUFM表达量变化与TUFM含量变化趋势一致,Beclin1蛋白表达量、贮藏损失、离心损失、蒸煮损失整体均呈先上升后下降趋势,pH值呈先下降后上升趋势;Pearson相关性分析表明,牛背最长肌中TUFM表达量与低场核磁共振峰面积比P_(2b)、Beclin1蛋白表达量呈极显著正相关(P<0.01),与贮藏损失、离心损失、蒸煮损失呈显著正相关(P<0.05),与P_(21)呈极显著负相关(P<0.01),与P_(22)呈显著负相关(P<0.05),与pH值无显著相关性(P>0.05)。通过蛋白质组学鉴定出23种与TUFM相关的差异蛋白,通过基因本体论、京都基因与基因组百科全书通路分析发现,差异蛋白可通过多种途径参与能量代谢,进而介导细胞自噬;对差异蛋白和持水性指标进行Pearson相关性分析发现,有5种差异蛋白(ATP5F1D、EEF1A2、GSPT1、NDUFB5、SUCLG1)与持水性指标具有显著相关性(P<0.05、P<0.01)。分析可知,包括TUFM在内,共6种蛋白主要通过能量代谢和氧转运等途径正向或负向影响细胞自噬,从而影响肉的持水性。

秦川牛宰后成熟过程中线粒体翻译延长因子Tu与能量代谢的关联性分析

目的:线粒体翻译延长因子Tu(mitochondrial Tu translation elongation factor,TUFM)已被证明参与秦川牛宰后成熟过程中的细胞自噬活动,实验探究该过程中TUFM表达与能量代谢变化的关系。方法:以秦川牛背最长肌为研究对象,测定4℃不同成熟时间(0、2、12、24、48、96、144、192 h)TUFM表达量及含量、葡萄糖(glucose,GLU)、乳酸(lactic acid,LA)、腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、单磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)6种物质含量以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,TPI)、苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)、细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)5种酶活性的变化情况。结果:在秦川牛宰后成熟期间,GLU、ATP、ADP、AMP含量和LDH、SDH、TPI活性均呈下降趋势,TUFM表达量、MDH活性及LA和TUFM含量均呈先上升后下降趋势,COX活性呈先下降后上升再下降趋势。能量代谢各指标和TUFM蛋白主要在宰后初期发挥作用,对宰后初期及宰后中后期分别进行Pearson相关性分析,结果表明,在宰后初期牛背最长肌中TUFM表达量与MDH、LA呈极显著正相关(P<0.01),与ATP、ADP、AMP、LDH、SDH、TPI、COX、GLU呈极显著负相关(P<0.01)。在宰后中后期,TUFM表达与所有指标(GLU、LA、ATP、ADP、AMP、LDH、MDH、SDH、TPI、COX)均呈极显著正相关(P<0.01)。结论:在宰后初期TUFM表达量逐渐增加,可为肌肉细胞提供能量从而用于能量代谢途径,该过程可能是TUFM正向参与细胞自噬所致。在宰后中后期能量短缺时,TUFM可能抑制细胞自噬,优先将能量用于除细胞自噬外的其他重要途径(如能量代谢途径)以维持细胞稳态。综上,在宰后成熟过程中TUFM具有双重作用,可调节细胞自噬为能量代途径提供能量,有助于维持宰后能量代谢持续的时间。

线粒体蛋白质翻译延伸因子(TUFM)在不同毒力新城疫病毒感染的鸡胚成纤维细胞中的表达水平

为研究线粒体蛋白质翻译延伸因子Tu(TUFM)在不同毒力新城疫病毒(NDV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达水平的变化,运用比较蛋白质组技术分析感染了NDV的CEF差异表达的蛋白点。与24 h的阴性对照组相比,感染NDV后24 h时TUFM表达量在毒力最弱的WX-10-07-Pi感染组中显著升高;毒力最强的JS-5-05-Go引起宿主表达TUFM量随感染时间增加逐渐增强。推测TUFM的表达水平与NDV毒力强弱具有一定相关性。

沉默TUFM通过AMPK/mTOR信号通路调控线粒体自噬对肺源性心脏病模型大鼠肺动脉高压的影响

目的探讨线粒体翻译延伸因子Tu(TUFM)通过线粒体自噬促进肺动脉高压(PAH)血管重塑的作用机制。方法2022年1月—2023年6月于辽宁省人民医院中心实验室进行实验。将36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照(Ctrl)组、模型(PAH)组、TUFM过表达(OE)组、OE阴性对照(OE-NC)组、短发夹RNA(Sh)敲除TUFM(Sh)组和Sh-NC阴性对照(Sh-NC)组,每组6只。除Ctrl组外,其余大鼠均一次性腹腔注射1%野百合碱(60 mg/kg)诱导心源性肺水肿PAH大鼠模型;大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)在低氧(3%O 2)条件下培养24 h模拟体内肺动脉高压微环境,分为常氧(Norm)组、低氧(Hyp)组、小干扰RNA(SiRNA)-1组、SiRNA-2组、Si-NC组、OE-NC组和OE组。右心导管插管和脉冲多普勒超声检测大鼠肺血流动力学;苏木素-伊红染色检测肺小动脉病理结构;免疫荧光共染检测TUFM组织定位;细胞计数法检测细胞增殖;透射电镜观察线粒体结构和自噬小体;蛋白免疫印迹检测TUFM、自噬、凋亡和磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达。结果与Ctrl组比较,PAH组大鼠TUFM蛋白表达升高,且主要与PASMC标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肺小动脉内膜存在共定位,而与内皮细胞标志物CD31无共定位,肺动脉收缩压(PASP)升高,肺动脉血流加速时间(PAAT)缩短,远端肺小动脉管壁呈向心性增厚,管腔狭窄几乎堵塞,TUFM、苄氯素1重组蛋白(BECN1)、人微管相关蛋白轻链3(LC3)II/I和B淋巴细胞瘤2(Bcl2)蛋白表达升高,P62、Bcl2相关X蛋白(Bax)和凋亡酶激活因子(Apaf)蛋白表达降低(P<0.05);与PAH组比较,OE组PASP升高,PAAT缩短,肺小动脉管壁厚度升高,肺动脉TUFM、BECN1、LC3II/I和Bcl2表达升高,P62、Bax和Apaf表达降低(P<0.05);与PAH组比较,Sh组PASP降低,PAAT延长,肺小动脉管壁厚度和管腔狭窄度有所改善,TUFM、BECN1、LC3II/I和Bcl2表达降低,P62、Bax和Apaf表达升高(P<0.05)。与Norm组比较,Hyp组PASMC细胞TUFM蛋白表达升高;与Si-NC组细胞相比,SiRNA-1和SiRNA-2组P62、Bax蛋白表达升高,BECN1、LC3II/I、Bcl2、TUFM表达降低,线粒体结构完整,PASMC细胞增殖活性降低,细胞p-AMPK表达降低,p-mTOR表达升高(P<0.05);与OE-NC组比较,OE组细胞P62和Bax蛋白表达降低,BECN1、LC3II/I、Bcl2和TUFM表达升高,部分线粒体损伤崩解,嵴断裂消失,PASMC细胞增殖活性明显升高,细胞p-AMPK表达升高,p-mTOR表达降低(P<0.05)。结论沉默TUFM可通过激活AMPK/mTOR信号通路促进线粒体自噬加速PAH肺动脉平滑肌细胞凋亡。

线粒体翻译延伸因子Tu对烧伤大鼠心肌氧化损伤的影响

严重烧伤后，心脏自身的。肾素一血管紧张素系统迅即激活并引起心肌局部血流量下降，这一变化导致烧伤早期缺血缺氧性心肌损伤。前期研究显示，心肌局部血流量于烧伤后10min开始下降，并在伤后1、3h显著减少。烧伤后1h起心肌力学参数即显著下降，提示心肌损害。由于心脏是循环动力器官，心肌损伤促进了严重烧伤后其他器官的缺血缺氧损伤。线粒体是心肌组织中的重要细胞器，执行细胞包括能量生成、代谢调控、离子稳定、活性氧簇（ROS）产生等在内的核心功能。正常情况下，线粒体内0．2％～2．0％的氧在代谢过程中会转变为过氧化物，

颞叶癫痫患者脑部病理改变与EF-Tu_(mt)、EF-Ts_(mt)表达情况分析

目的探讨颞叶癫痫患者脑部病理改变、线粒体蛋白质翻译延长因子Tu和Ts(mitochondrial translation elongation factor Tu and Ts,EF-Tu_(mt)和EF-Ts_(mt))的表达情况,为临床治疗及预后改善提供有效的理论依据。方法选取2013年1月至2016年1月本院收治的40例颞叶癫痫患者(颞叶癫痫组)和20例颅脑外伤患者(对照组)为研究对象。取所有患者颞叶皮层脑组织,行脑组织病理学观察、脑组织EF-Tu_(mt)和EF-Ts_(mt)免疫组织化学检查及免疫电镜检查。结果颞叶癫痫组患者病理组织呈现神经元分布不均、脑皮质分层紊乱;胞质少,细胞核呈现空泡状;病灶组织小血管充血、增生;小血管及胶质细胞增生;有淋巴套形成。颞叶癫痫组患者脑组织中EF-Tu_(mt)和EF-Ts_(mt)阳性表达颗粒数和细胞数均显著多于对照组(P<0.05)。结论颞叶癫痫患者脑组织出现明显的病理改变,且EF-Tu_(mt)和EF-Ts_(mt)表达水平均显著升高,但其机制尚不明确。

EF-Tumt及EF-Tsmt在颞叶内侧癫痫患者脑组织的表达

目的：探讨EF—Tumt及EF—Tsmt在颞叶内侧癫痫患者脑组织的表达。方法：选取2013年1月～2015年1月湖南省脑科医院神经外科住院进行前颞叶切除手术治疗的颞叶内侧癫痫患者62例作为病例组，选取同期本院神经外科住院治疗的48例脑外伤患者作为对照组，检测两组EF—Tumt及EF—Tsmt并进行比较。结果：本研究通过电镜观察发现病例组及对照组颞叶内侧脑组织线粒体和胞浆中都可以看到EF—Tumt蛋白阳性表达颗粒、EF—Tsmt蛋白阳性表达颗粒，而且病例组EFTumt蛋白阳性表达颗粒及EF—Tsmt蛋白阳性表达颗粒数量均高于对照组（均P〈0．05）；通过光镜观察发现病例组及对照组颞叶内侧脑组织颞叶神经元和胶质细胞中都可以看到EF—Tumt蛋白阳性细胞、EF—Tsmt蛋白阳性细胞，而且病例组EF—Tumt蛋白阳性细胞及EF—Tsmt蛋白阳性细胞数量均高于对照组（均P〈0．05）。结论：颞叶内侧癫痫患者EF—Tumt、EF—Tsmt表达量高于非癫痫患者，EF—Tumt、EF—Tsmt在颞叶内侧癫痫中有着重要的作用。

基于肿瘤公共数据库分析TUFM基因在肺癌中的表达及预后意义

目的基于肿瘤公共数据库分析线粒体翻译延伸因子Tu(TUFM)基因在肺癌组织及正常肺组织中的表达,进一步探讨TUFM基因对肺癌患者的预后意义。方法检索Oncomine数据库、GCBI数据库和GEPIA数据库,分析TUFM基因在人体常见肿瘤中的表达,对TUFM基因在正常肺组织及肺癌中的表达差异进行分析。通过检索人类蛋白质图谱(HPA)数据库得到TUFM基因在正常肺组织和肺癌组织表达的免疫组化结果。通过KaplanMeier Plotter数据库分析TUFM基因表达水平与肺癌患者预后关系。结果Oncomine数据库、GCBI数据库和GEPIA数据库检索结果证实,TUFM基因在人体常见的多种癌症中呈现高表达,与正常肺组织相比较,TUFM基因在肺癌中表达增高。HPA预测结果发现,正常的肺组织和肺癌组织TUFM基因IHC染色后,结果存在明显区别。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果表明,TUFM高表达的肺癌患者的首次进展生存期(first-progression survival,FP)、总生存期(overall survival,OS)、复发后生存期(post-progression survival,PPS)均显著优于低表达患者(P<0.05)。结论TUFM基因在肺癌组织中比正常肺组织中表达增高,肺癌患者中TUFM高表达组的预后明显优于TUFM低表达组。