不同时期大蒜中多糖组分C的含量测定

目的对不同时期的大蒜多糖组分C进行提取纯化并测定其含量。方法用无水丙酮提取的方法分离纯化大蒜多糖组分C，以苯酚-硫酸显色后用紫外分光光度计测定吸光度，测定波长486nm。结果在4．0～10．0μg／ml范围内，浓度与吸光度呈良好线性关系，回归方程A=0．0694C-0．0049（R=0．9996，n=7）。不同时期的大蒜中多糖组分C的含量：2月份的含量87．82％，4月份的含量88．52％，6月份的含量93．61％，7月份的含量94．28％，11月份的含量85．17％。结论6—7月份大蒜多糖组分C的糖含量最高。

眼镜蛇毒组分C对小鼠实验性肝癌细胞生长影响的探讨

ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹水型肝癌细胞与眼镜蛇毒组分Ｃ在无菌条件下混合后接种于昆明种小鼠右前肢腋下，在２５℃条件下饲养１２天。结果表明，组分Ｃ能明显抑制小鼠肝癌细胞的生长（ＩＣ５０为５９．０８μｇ／ｍｌ），当肝癌细胞膜被人为造成损伤时，组分Ｃ对其生长的抑制作用则显著增强（ＩＣ５０为６．７２μｇ／ｍｌ）。此外，组分Ｃ能显著延长荷瘤小鼠的生存时间。对体外培养的小鼠肝癌细胞，组分Ｃ也具有很强的杀伤作用，且这种杀伤作用受组分Ｃ的浓度、组分Ｃ与肝癌细胞孵育的时间及孵育的温度的影响。病理组织检查发现，给组分Ｃ后，镜下可见肝癌细胞生长受到明显抑制，肝癌细胞未向皮肤及附件浸润。

中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL-7402细胞凋亡及端粒酶活性的影响

目的 :研究中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL 74 0 2细胞凋亡和端粒酶活性的影响 ,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法 :用不同浓度的中华眼镜蛇毒组分C分别处理人肝癌细胞株BEL 74 0 2 ,采用MTT法、流式细胞仪法、TRAP -ELISA、透射电镜等观察其对肝癌细胞的细胞毒、细胞凋亡、细胞周期及端粒酶活性的影响。结果 :中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL 74 0 2有明显的抑制作用 ,且呈时间依赖性及剂量依赖性。用流式细胞仪分析发现中华眼镜蛇毒组分C可诱导BEL 74 0 2肝癌细胞发生凋亡 ,肝癌细胞明显阻滞于G0 /G1 期 ,在G1 峰前出现明显的亚二倍体凋亡峰 ,且其凋亡率随蛇毒浓度的升高而呈上升的趋势。用TRAP ELISA法同步测得蛇毒作用BEL 74 0 2肝癌细胞 8h后的端粒酶活性值明显下降 ,其抑制作用与剂量呈正相关 (r =0 .96 4 ,P <0 0 5 )。在电镜下 ,可观察到肝癌细胞出现明显的凋亡特征性改变 :细胞膜完整、核染色质固缩 ,核碎裂、凋亡小体形成。结论 :中华眼镜蛇毒组分C可显著抑制人肝癌细胞株 (BEL 74 0 2 )的增殖 ,在诱导肿瘤细胞发生凋亡的同时也下调瘤细胞的端粒酶活性 ,这可能是FC抗肿瘤的重要机制之一。

感染异育银鲫补体组分C3·C4表达研究

[目的]了解补体组分在感染性鱼类疾病中的作用,为鱼类疾病的诊断和治疗提供参考。[方法]采用不同浓度(2×106、4×106CFU/ml)的嗜水气单胞菌感染异育银鲫,利用半定量RT-PCR技术检测感染不同时间后肝脏中补体组分C3和C4的表达量。[结果]感染后4、5 h时,异育银鲫肝脏中C3的表达量均显著高于对照组。在感染后4 h时,不同浓度组之间C3的表达量无显著差异。而在感染后5 h时,感染浓度1组(注射2×106 CFU/ml嗜水气单胞菌)中C3的表达量显著高于感染浓度2组(注射4×106 CFU/ml嗜水气单胞菌)。异育银鲫肝脏中C4的表达水平远低于C3。在感染后5 h时,感染浓度1组C4的表达量显著高于对照组,其余处理组与对照组均无显著差异。[结论]补体组分C3在鱼类免疫防御系统中具有非常重要的意义。

中华眼镜蛇毒组分C与传统化疗药物体外抑制人胶质瘤株作用的对比研究

目的研究中华眼镜蛇毒组分C(FC)体外对人胶质瘤细胞株U251的抑制作用。方法培养箱孵育U251与正常人胶质细胞;加入不同浓度的FC、阿霉素(ADM)和尼莫斯汀(ACNU)。采用细胞毒实验(MTT法),通过细胞生长抑制率评价FC、ACNU和ADM的细胞毒作用。结果FC对胶质瘤细胞的抑制作用突出,24h和48h的IC50分别为2.95μg/ml和2.21μg/ml,而ADM与ACNU远未达到此抑制率。FC对正常胶质细胞的24h、48hIC50分别为8.60μg/ml和6.61μg/ml,两细胞株间存在显著性差异(P<0.05)。结论人胶质瘤细胞对FC的细胞毒性作用是敏感的。FC对胶质瘤细胞的抑制作用优于ADM和ACNU。

眼镜蛇毒及其组分C对小鼠实验性肝癌抗癌作用的病理学研究

目的 观察眼镜蛇毒及其组分 Ｃ 抗小鼠肝癌的病理学改变。 方法 采用不同剂量眼镜蛇毒及其抗癌活性组分 Ｃ 与 Ｂ Ａ Ｌ Ａ／ｃ 小鼠腹水型肝癌细胞体外孵育， 空白对照组用生理盐水与肝癌细胞孵育， 然后取孵育液接种于小鼠前肢腋下， 接种后第 １０ｄ 处死， 解剖取出瘤结， 进行病理组织学研究。 结果 空白对照组瘤结较大， 显微镜下见瘤细胞生长活跃、核大、核仁明显、核分裂多见， 而坏死灶少见， 且瘤细胞向周围浸润扩散； 治疗组瘤体较小， 瘤细胞固缩、核仁不明显、核分裂少见， 而坏死灶多见， 瘤细胞周围有纤维组织增生围绕， 限制了瘤细胞向周围蔓延浸润。 结论 眼镜蛇毒及其组分 Ｃ 对小鼠实验性肝癌的体外抗癌作用是明显的， 不同剂量及不同孵育时间的抗癌作用亦显著不同， 其中组分 Ｃ 对抗癌作用最强。

眼镜蛇毒组分C的抗瘤活性及其对肿瘤细胞存活率的影响

目的观察眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２的抑瘤作用及其体外对肝癌Ｈ２２细胞存活率的直接影响。方法通过半体内实验，观察眼镜蛇毒组分Ｃ对小鼠腹水型肝癌Ｈ２２的抑瘤率；通过细胞培养，以细胞存活率为指标观察中华眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞在体外的直接杀伤作用。结果眼镜蛇毒组分Ｃ能明显抑制ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞的生长，其抑瘤作用随剂量增大而增强，ＩＣ５０为９５ｍｇ／Ｌ。在体外，眼镜蛇毒组分Ｃ的浓度对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞存活率的影响随其作用剂量的增大而增强，ＩＣ５０为９ｍｇ／Ｌ；同时，这种影响还随其作用时间的延长而增强。结论眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２有显著的抑瘤作用。

HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质含量

目的为硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质建立质控方法。方法采用HPLC-ELSD方法,色谱柱:GRACEApollo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(96:4,V/V),流速0.6 mL/min;柱温30℃;进样量20μL;Waters低温分流型蒸发光散射检测器,载气流量40 psi,漂移管温度55℃。结果所建方法通过方法学验证,庆大霉素C组分与各杂质间分离完全,庆大霉素、西索米星和小诺霉素分别在0.5~6 mg/mL、25~100μg/mL和25~100μg/mL的浓度范围内,各浓度的对数值与对应色谱峰面积的对数值呈现出良好的线性。采用所建方法对市售16家生产企业43批次硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊样品进行测定,获得该制剂产品中各组分及有关物质的数据。结论所建方法是在中国药典方法基础上优化并验证适用于硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊C组分及有关物质的含量测定,方法简便准确,专属性强,稳定性好。由获得的实验数据可知,该复方制剂中C组分及有关物质的含量在各厂家间或同厂家不同批次间差异显著,可能存在影响用药安全的潜在隐患,建议在该剂型质量标准中增加相关质控项。

庆大霉素C组分测定误差的比较分析

中国药典自１９９０版收载庆大霉素Ｃ组分ＨＰＬＣ检查法以来，不同实验室间的测定误差一直相对较大，为此，９个药品检验所协同开展工作，寻找不同实验室间相对误差较大的原因及有效控制不同实验室间测定误差的方案。研究结果表明，Ｃ１组分前后多个不能和Ｃ１峰达到基线分离的小杂质峰组分，可使得在不同条件下积分测得的Ｃ１组分的含量明显不同，导致各实验室利用规一化法测定庆大霉素Ｃ１组分的相对含量结果差异较大。采用英国药典和欧洲药典已收载的相对峰高法测定庆大霉素Ｃ组分的含量。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分

目的:建立一种理想的庆大霉素C组分分析方法,为克服现行药典方法的不足提供新思路。方法:应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分。色谱条件为:Diamonsil(钻石)C_(18)色谱柱,规格:150 mm×4.6 mm,5 μm;流动相:0.2mol·L^(-1)三氟醋酸水溶液-甲醇(94:6),流速为0.6mL·min^(-1);检测器条件:漂移管温度为110℃,载气流速为2.80L·min^(-1)。应用随行标准曲线法确定庆大霉素C组分组成。结果:庆大霉素中的4个主要组分C_(1a),C_2,C_(2a),C_1在上述色谱条件下能完全分离,分析时间仅需30 min;精密度优于1.0％;庆大霉素各组分在蒸发光散射检测器中的响应因子一致。庆大霉素标准品采用本法测定结果(C_(1a):29.4％;C_2:26.5％;C_(2a):13.1％;C_1:31.1％)与BP方法标化结果(C_(1a):30.1％;C_2:24.9％;C_(2a):14.1％;C_1:30.9％)一致。结论:本法操作简单,方法的精密度、准确性、重现性均能很好地满足质量控制的要求,能有效克服现行药典方法的不足,是一种比较理想的庆大霉素C组分分析方法。

基于CNCPS模型的14种饲料瘤胃非降解蛋白组分小肠消化率研究

CNCPS体系的氨基酸子模型是估计反刍动物十二指肠氨基酸流量的3种主要模型之一,该模型认为过瘤胃C蛋白组分在小肠中不能消化,但有研究表明一些非饲草类饲料的过瘤胃C蛋白组分具有较高的小肠消化率。本研究测定了14种饲料各蛋白组分的含量、各蛋白组分的瘤胃动态降解率和过瘤胃蛋白组分的CP小肠消化率,用这些数据按照推导的方程对各蛋白组分的小肠消化率进行了最小二乘估计。在以过瘤胃B1蛋白组分的小肠消化率100%为约束条件时得到了可信的估计结果,结果表明CNCPS模型设定过瘤胃B1、B2、B3蛋白组分小肠消化率分别为100%、100%和80%是可行的,但有8种饲料具有较高的过瘤胃C蛋白组分小肠消化率估计值,其中包括4种饲草类饲料,说明需要对CNCPS模型的过瘤胃C蛋白组分小肠消化率参数的合理性做进一步研究。

HPLC-ELSD测定硫酸庆大霉素有关物质及其C组分质量标准改进

目的建立HPLC—ELsD测定硫酸庆大霉素有关物质及改进C组分的测量方法。方法色谱柱采用耐酸的c18柱（pH适应范围0．8-8．0），流动相为0．2mol／L的三氟醋酸-甲醇（92：8）；流速为0．6mL／min；用蒸发光散射检测器检测，漂移管温度110℃，载气为2．8L／min。结果硫酸庆大霉素各组分与有关物质分离完全，可用外标法测定硫酸小诺霉素和西索米星的含量及庆大霉素C组分的含量。结论所用方法准确，灵敏度高，重现性好，可有效地控制药品的质量。

柱切换HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的研究

目的建立柱切换高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分含量,并对2017年国家评价性抽验190批次样品进行检测。方法采用配置切换六通阀的高效液相色谱仪,GRACE Apollo C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.2mol/L三氟乙酸溶液:甲醇(96:4,V/V),柱温35℃,流速0.6mL/min,进样量25μL,ELSD漂移管温度110℃,载气流量2.5L/min,增益1。结果采用新建的柱切换HPLC-ELSD法可有效去除辅料蔗糖等对测定的干扰,庆大霉素C组分(C1、C1a、C2、C2a)的平均回收率分别为98.9%、102.0%、100.1%和98.6%,RSD(n=9)分别为0.5%、0.4%、0.3%和0.6%,线性范围分别为0.0517~0.6465、0.0538~0.6729、0.0651~0.8136和0.0299~0.3738mg/mL。190批次样品中12批次样品的庆大霉素C1偏低,2批次样品的庆大霉素总C组分含量偏低,3批次样品的庆大霉素总C组分含量偏高。结论新建方法准确简便,专属性良好,可为硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的控制提供参考。

用核磁共振方法测定庆大霉素C组分比率

利用核磁共振氢谱 (1HNMR)峰面积积分法建立了一种测定庆大霉素C组分比率的新方法 ,可以通过计算准确、快速地得到C1、C1a和C2 各组分的比率。C1、C1a和C2 的相对标准偏差分别为 0 .5 8% ,0 .5 1%和 0 .5 0 %。与常用的高效液相色谱法相比 ,此法具有简单、方便、无需标准品等优点 ,为庆大霉素的质量控制提供了一种新的有效方法。

眼镜蛇毒C组分对白血病细胞中基质金属蛋白酶-2、9表达的影响

目的探讨眼镜蛇毒C组分对白血病细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达和活性的影响。方法用10 ng/mL的眼镜蛇毒C组分对白血病细胞进行0、12、24、48 h处理。用ELISA、明胶酶谱法和荧光RT-PCR法检测不同时间处理后白血病细胞MMP-2和MMP-9的表达水平。结果与处理0 h相比,白血病细胞经10 ng/mL的眼镜蛇毒C组分分别处理12、24、48 h后,用ELISA检测结果显示MMP-2、MMP-9活性下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);明胶酶谱法检测结果显示MMP-2、MMP-9活性下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);荧光定量RT-PCR检测结果显示,MMP-2、MMP-9 mRNA相对含量下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 10 ng/mL眼镜蛇毒C组分对白血病细胞MMP-2和MMP-9的表达均有抑制作用,眼镜蛇毒C组分对白血病细胞的抑制作用可能与其抑制MMP-2和MMP-9表达和活性相关。

庆大霉素C组分和有关物质测定的HPLC-柱后衍生化法与脉冲安培电化学法的比较研究

目的：参考《欧洲药典》的HPLC-脉冲安培电化学法建立高效液相色谱-柱后衍生化法测定庆大霉素C组分含量及其有关物质,同时与电化学法进行比较研究。方法：采用亲水性Hydrosphere C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以含0.7%三氟乙酸及0.025%五氟丙酸的50 mmol·L-1氢氧化钠溶液（pH 2.6）-乙腈（98.5∶1.5）为流动相。衍生化法反应温度30℃,荧光激发波长340 nm,发射波长430 nm。电化学法采用脉冲安培检测器,金电极为工作电极,四电位波形工作模式。结果：两种方法测定的庆大霉素C组分（C1a,C2,C2a和C1）分别在5.82~233.00,6.92~277.00,4.00~160.00和6.23~249.00μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r均≥0.999 3）,检测限和定量限范围分别为0.92~3.28 ng和1.37~5.19 ng。结论：两种方法的检测结果无明显差异。

江浙蝮蛇毒C_4组分的分离纯化及药理性质研究

目的:分离筛选江浙蝮蛇毒的C4组分,研究其毒性、机体耐受性和依赖性等药理学性质。方法:采用离子交换和分子筛,以柱层析法分离蛇毒C4组分,并用急性毒性实验和自然戒断实验、耐受性实验考察其毒性、依赖性和耐受性。结果:经分离筛选后得到C4组分,并获得蛇毒C4组分的毒性作用、机体耐受性和依赖性等性质。结论:C4组分作为江浙蝮毒中的一个有效组分,在一定剂量范围内安全性良好,未发现耐受性和依赖性,值得进一步开发利用。

高效液相色谱法测定庆大霉素C组分的不同检测方式测定结果的比较

各国药典中关于庆大霉素C组分的测定方法均为高效液相色谱法,但检测方式及分离效果不同。为此采用直观推导式演进特征投影法(HELP),对高效液相色谱-二极管阵列检测采集的庆大霉素C组分色谱数据进行解析,分辨出各物质的色谱曲线,在扣除了未分离的杂质峰对庆大霉素C1组分的干扰后,对柱前邻苯二醛衍生化-二极管阵列检测法及目前中国药典2005版收载的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法测定庆大霉素C组分的准确性进行了比较,并运用柱切换技术,证明二者测定结果的一致性。

C_(6+)组分对管输天然气相特性的影响

为提高对管输天然气相特性的预测精度,特别是针对含有C6+重组分的管输天然气,开展C6+组分特征化分析。使用PR状态方程,结合气-液闪蒸计算,对管输天然气的相特性进行预测分析。通过对室内实验测定的管输天然气烃露点数据验证表明,用不同C6+组分特征化分析方法对管输天然气相特性进行预测的结果存在一定偏差,但与将C6+组分合并为己烷近似分析相比较,其预测精度更贴近实测的烃露点。

江浙蝮蛇毒C_4组分的中枢镇痛作用及其机理研究

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的中枢镇痛作用并初步探讨其镇痛机理。方法:通过侧脑室给药、脊髓化鼠镇痛实验和足跖定压刺激试验研究C4组分的镇痛作用部位;通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用,研究其与乙酰胆碱受体、阿片受体间的作用关系。结果:C4组分的镇痛部位主要在脑中枢,且C4组分不通过乙酰胆碱受体作用,而与阿片受体相关。结论:江浙蝮蛇毒C4组分镇痛通过中枢起效,提示江浙蝮蛇毒C4组分可能与增加内源性阿片肽系统的活动有关。