程序性死亡受体1和T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3在乳腺癌肿瘤微环境中的表达、分布及其与临床病理特征的关系

目的探讨程序性死亡受体1（PD-1）、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（TIM．3）在乳腺癌肿瘤微环境中的表达、分布特征，并分析两者之间的相关性及其与临床病理特征的关系。方法收集嘉兴市第一医院乳腺病科2016年6月至2017年5月收治的30例浸润性乳腺癌确诊患者术后肿瘤组织标本及癌旁组织标本，将标本沿中心分为两份，一份经包埋、冷冻切片后，采用免疫荧光组织染色法观察肿瘤组织中PD-1、TIM-3蛋白表达情况及分布特征，另一部分标本经剪碎、消化后，采用非连续密度梯度离心法提取肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs），通过实时荧光定量PCR技术（qRT—PCR）测定TILs中PD-1、TIM-3的mRNA相对表达量，同时通过Western blotting技术测定其蛋白表达量。分析PD-1、TIM-3的表达与乳腺癌临床病理参数的关系，并对PD-1、TIM-3之间进行相关性分析。结果免疫荧光结果可见相对于癌旁组织，肿瘤组织中观察到了较多的PD-1、TIM-3阳性细胞。qRT-PCR显示TILs中PD-1、TIM-3mRNA表达量均显著高于癌旁组织淋巴细胞（3．09±0．38比1．26±0．23、3．42±0．31比1．57±0．29，t=4．16、4．37，均P〈0．05）。蛋白水平上，肿瘤组织淋巴细胞中PD-1、TIM-3的表达水平（0．66±0．08、0．80±0．11）均明显高于癌旁组织（0．10±0．01、0．26±0．02）（t=6．79、4．57，均P〈0．05）。病理资料分析，在肿瘤组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移方面，患者肿瘤组织淋巴细胞PD-1、TIM-3mRNA表达水平差异均有统计学意义（t=2．22-2．99，均P〈0．05）。相关性分析显示，肿瘤组织中PD-1、TIM3的表达之间呈显著正相关（r=0．616，P〈0．01）。结论在乳腺癌肿瘤微环境中，PD-1、TIM-3介导的信号通路对于乳腺癌的发生发展中发挥着重要作用，为乳腺癌的组合靶向治疗提供新的依据。