脊髓背角MCP-1-JAK2/STAT3信号转导参与大鼠2型糖尿病神经病理性痛的机制研究

目的:探讨脊髓背角MCP-1-JAK2/STAT3信号转导是否参与大鼠2型糖尿病神经病理性疼痛(DNP)的形成与发展。方法:雄性SD大鼠高糖高脂饲养8周,通过腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠2型DNP模型。将2型DNP大鼠随机分为4组,每组16只:DNP组、DNP+MCP-1抑制剂组(DM组)、DNP+JAK2抑制剂AG490组(DA组)和溶剂对照组(SC组)。DA、DM和SC组分别于注射STZ 14 d后蛛网膜下腔置管,3 d后DM、DA和SC组分别给予MCP-1中和抗体10μL(0.1 mg/L)、AG490 10μL(1 mmol/L)和3.5%DMSO 10μL,每天1次,连续14 d。DNP组不做任何处理。另取16只大鼠为对照(control,C)组,普通饲料喂养。蛛网膜下腔给药后第1、3、7和14天时测定机械缩足阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL),各组随机取4只大鼠处死,取L4-6脊髓膨大,采用Western blot法检测p-JAK2和p-STAT3的表达。结果:与C组比较,DNP和SC组第1、3、7和14天时MWT降低,TWL缩短,脊髓背角p-JAK2和p-STAT3表达上调(P<0.05);与DNP组比较,DM和DA组第1、3、7和14天时MWT升高和TWL延长,脊髓背角p-JAK2和p-STAT3表达下调(P<0.05);DNP组与SC组各指标比较差异无统计学意义。结论:脊髓背角MCP-1-JAK2/STAT3信号转导参与大鼠2型DNP的产生和维持。

重组人糖基化尿型纤溶酶原尿激活剂中糖链的组成研究

重组人糖基化尿型纤溶酶原激活剂(RHU-PA)是一种溶血栓药物。研究了使单糖从RHU-PA中定量释放的酸解条件和纯化单糖的方法。应用气相色谱技术测定了RHU-PA上的糖链由岩藻糖、甘露糖、半乳糖和N-乙酰氨基葡萄糖组成,相对摩尔比为1.0∶3.9∶1.1∶3.4。酸解法测得的总糖含量与酶解法测得的结果一致。

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1通过糖原合成酶激酶-3β/信号转导和转录激活因子3通路调控高糖诱导的心肌成纤维细胞纤维化的研究

目的 探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)通过糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路调控高糖诱导的心肌成纤维细胞(CFs)纤维化的相关机制。方法 分离、培养及鉴定CFs,构建LOX-1 RNAi慢病毒载体(LV-LOX-1)及慢病毒空载体(LV-Con)并感染CFs。将细胞分为正常对照(NC)组、25 mmol/L葡萄糖的高糖(HG)组、高渗(HPG)组、LV-LOX-1组和LV-Con组,LV-LOX-1及LV-Con感染CFs后加入HG培养24h,记为HG+LV-LOX-1组和HG+LV-Con组,分别使用10μmol/LSB216763和10μmol/L STATTIC处理HG+LV-LOX-1、HG+LV-Con组24h,记为HG+LV-LOX-1+SB216763组、HG+LV-Con+SB216763组、HG+LV-LOX-1+STATTIC组和HG+LV-Con+STATTIC组。CCK-8法检测CFs活力,q RT-PCR和Western blot法检测LOX-1、I型胶原(COL-I)、硫氧还蛋白5(TXNDC5)、GSK-3β、STAT3、p-GSK-3β、p-STAT3 mRNA和蛋白表达。结果 获得LV-LOX-1感染的CFs,荧光显微镜下呈绿色。与HG、HG+LV-Con组比较,HG+LV-LOX-1组LOX-1、COL-I、TXNDC5m RNA表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+SB216763、HG+LV-LOX-1+STATTIC组COL-I、TXNDC5 mRNA表达降低(P<0.05)。与HG、HG+LV-Con组比较,HG+LV-LOX-1组p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05),LOX-1、p-STAT3、COL-I、TXNDC5蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-LOX-1组比较,HG+LV-LOX-1+SB216763组p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05),HG+LV-LOX-1+SB216763、HG+LV-LOX-1+STATTIC组p-STAT3、COL-I、TXNDC5蛋白表达降低(P<0.05)。结论 LOX-1、GSK-3β、STAT3、TXNDC5、COL-I参与高糖诱导的CFs纤维化,LOX-1通过GSK-3β/STAT3通路促进TXNDC5和COL-I表达,抑制LOX-1可抑制高糖诱导的CFs纤维化。

中药复方WCAP及拆方对人胰腺癌皮下移植瘤裸小鼠模型及IL⁃6/STAT3信号通路的影响

目的观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响。方法建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平。结果①与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05)。②与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的mRNA表达均降低(P<0.05)。③与空白对照组比较,5-FU组、复方组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因涉及的c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2蛋白表达均降低(P<0.05),软坚散结组c-myc、MMP-2和IL-6蛋白表达均降低(P<0.05)。结论WCAP复方可抑制人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤的生长,其机制与抑制IL-6/STAT3通路并调节其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的表达水平有关;与各拆方相比,WCAP复方在抑瘤率、小鼠体质量及IL-6/STAT3通路及其下游靶基因调控方面作用更好。

芹菜素对哮喘小鼠转录激活蛋白3及Th_2型细胞因子抑制作用的实验研究

目的研究芹菜素对哮喘小鼠2型辅助性T细胞(Th2)优势应答的抑制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只:正常组(A组)、哮喘组(B组)、芹菜素高剂量治疗组〔C组,20 mg/(kg.d)〕、芹菜素低剂量治疗组〔D组,2 mg/(kg.d)〕。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。药物治疗组以芹菜素溶于1%二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射。小鼠末次雾化吸入24 h后,用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清总IgE、BALF液中Th2型细胞因子〔白细胞介素(IL)4、IL-13〕;免疫印迹(Western blot)测定肺组织中信号转导和转录激活蛋白3(GATA-3)表达水平。结果与正常组比较,哮喘组Ach气道阻力、气道炎症、BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数、血清总IgE、BALF中IL-4、IL-13以及肺组织GATA-3蛋白表达明显增高(P<0.05)。与哮喘组比较,芹菜素治疗组各项指标均明显降低(P<0.05),而且高、低剂量组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素通过降低肺组织GATA-3和Th2细胞因子的表达而降低哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景。

rt-PA静脉溶栓联合舒血宁治疗对急性缺血性脑卒中患者两面神激酶2/信号转导及转录活化因子3信号通路的影响

目的探讨重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓联合舒血宁治疗急性缺血性脑卒中临床疗效以及对患者两面神激酶2/信号转导及转录活化因子3信号通路的影响。方法将100例急性缺血性脑卒中患者按随机数字表法分为实验组与对照组,每组50例,均予以调脂、控制血糖、血压、维持水电解质平衡、预防并发症等综合治疗,同时予以重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗,实验组在此基础上联合舒血宁治疗,观察14d。治疗后比较两组中医疗效;治疗前后采用美国国立卫生研究院卒中量表评定神经功能缺损程度,同时检测血液流变学指标(纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数、红细胞比积、血浆黏度)、疾病相关因子(血管性血友病因子、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-8)及pJAK2、pSTAT3蛋白表达,结果经治疗14d后实验组与对照组比较:(1)总有效率(96.0%)显著高于对照组(74.0%)(P<0.01);(2)美国国立卫生研究院卒中量表评分显著低于对照组(P<0.01);(3)血液流变学指标纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数、红细胞比积、血浆黏度水平显著低于对照组(P<0.01);(4)疾病相关因子血管性血友病因子、基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-8水平显著低于对照组(P<0.01),血管内皮生长因子水平显著高于对照组(P<0.01);(5)pJAK2、pSTAT3蛋白表达显著低于对照组(P<0.01)。结论重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓联合舒血宁治疗急性缺血性脑卒中患者具有协同增效作用.能显著提高临床疗效,减轻炎症反应,改善神经功能及内皮功能,降低pJAK2、pSTAT3蛋白表达。

尿激酶型纤溶酶原激活剂和糖原合成酶激酶-3β磷酸化在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(Urokinase-type plasminogen activator,uPA)和糖原合成酶激酶-3β磷酸化(Phosphorylation-glycogen synthase kinase 3β,P-GSK3β)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法:选取39例胃癌组织样本、31例萎缩性胃炎组织样本及25例癌旁正常组织样本。采用免疫组化法检测组织中uPA与P-GSK3β阳性表达。分析uPA与P-GSK3β表达与胃癌临床病理特征的关系。结果:胃癌组织中uPA与P-GSK3β阳性表达率显著高于癌旁正常胃组织及萎缩性胃炎组织,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);癌旁正常胃组织及萎缩性胃炎组织的uPA与P-GSK3β阳性表达率比较无统计学差异(P>0.05)。胃癌组织中uPA和P-GSK3β阳性表达与患者性别、年龄无关(P>0.05),与临床TNM分期、病理分级及是否伴发淋巴结转移有关(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织中uPA和P-GSK3β阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论:uPA与P-GSK3β在胃癌组织中呈高表达,并与胃癌临床分期、病理分级及淋巴结转移密切相关。

α_vβ_3整合素信号转导与破骨细胞研究进展

αvβ3整合素是破骨细胞膜上一种重要的蛋白,影响破骨细胞的运动及骨吸收能力。αv3β抗体、核因子-κB受体激活剂配体和巨噬细胞集落刺激因子可通过αvβ3整合素调控破骨细胞的分化及功能。αvβ3激活后,与富含脯氨酸的酪氨酸激酶2、酪氨酸蛋白家族(c-Src)形成复合物,诱导信号蛋白Cb1磷酸化使细胞信号得以传递。αvβ3的结构、β亚基重要位点的变异影响其信号的传递。以αvβ3及其信号转导途径为靶点开发的药物,在类风湿性疾病、某些肿瘤和骨质疏松的临床治疗上有一定应用前景。

信号转导与转录活化蛋白STAT3在肿瘤发生中的作用

STAT3是信号转导与转录活化蛋白(STAT)家族的一个重要成员,也是一个可以被多种调控细胞增殖、分化、发育、存活和炎症的细胞因子、生长因子及肿瘤蛋白所激活的关键信号转导蛋白。在多种肿瘤细胞、细胞性状转化过程和肿瘤形成过程中可以检测到组成性激活的STAT3。我们从STAT3在肿瘤细胞中组成性激活的机制、STAT3作为转录因子对肿瘤细胞调控的机制等方面对STAT3在肿瘤发生中的作用进行简要综述。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血清CMKLR1、 STAT3表达与肝纤维化的关系

目的探究血清趋化因子样受体1(CMKLR1)、信号转导激活转录因子3(STAT3)表达与2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝纤维化的关系。方法选取2020年3月至2022年11月于该院接受治疗的94例2型糖尿病合并NAFLD患者为观察组,根据肝纤维化程度分为轻中度组52例和重度组42例。选取同期在该院收治的102例2型糖尿病患者为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测血清CMKLR1、STAT3水平,采用化学发光法测定肝纤维化指标Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平。采用Pearson相关性分析检验2型糖尿病合并NAFLD患者血清CMKLR1、STAT3水平与肝纤维化指标的相关性。绘制受试者工作特征曲线分析血清CMKLR1、STAT3水平对2型糖尿病合并NAFLD患者肝纤维化程度的预测效能。采用多因素Logistic回归分析检验影响2型糖尿病合并NAFLD患者肝纤维化程度的因素。结果观察组血清CMKLR1、STAT3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组CMKLR1、STAT3及肝纤维化指标PⅢP、LN、CⅣ高于轻中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。2型糖尿病合并NAFLD患者血清CMKLR1、STAT3水平与PⅢP、LN、CⅣ呈正相关(P<0.05)。血清CMKLR1、STAT3水平单独及联合预测2型糖尿病合并NAFLD患者肝纤维化发展为重度的曲线下面积分别为0.867、0.818、0.922。CMKLR1、STAT3是影响2型糖尿病合并NAFLD患者肝纤维化发展为重度的独立危险因素(P<0.05)。结论2型糖尿病合并NAFLD患者血清CMKLR1、STAT3升高可能与肝纤维化有关。

miR-373调控JAK3/STAT6信号通路抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化对肺癌细胞的影响

目的:探究miR-373调控JAK3/STAT6信号通路抑制肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)M2极化对肺癌细胞的影响。方法:利用佛波酯及IL-4诱导M2-TAMs分化;将miR-NC和miR-373分别转染M0/M2-TAMs并检测M2-TAMs特征性基因mRNA和miR-373水平;将M0/M2-TAMs与A549、H1299细胞共培养;CCK-8、划痕实验、Transwell实验分别检测肺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力;双荧光素酶实验验证miR-373与JAK3的调控关系;RT-qPCR检测细胞JAK3、STAT6 mRNA水平;Western blot检测细胞Ki67、MMP-2/9、p-JAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6水平。30只裸鼠尾静脉注射已转染慢病毒的A549细胞悬液;检测裸鼠肺组织病理变化;RT-qPCR检测肺组织JAK3、STAT6 mRNA水平;Western blot检测CD31、VEGFA、M2-TAMs特征性基因及pJAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6蛋白水平。结果:成功诱导M2-TAMs中CD206及IL-10、Mrc1、Arg1、Ym1、Fizz1、CCL2 mRNA表达增加;与M2+miR-NC组相比,M2+miR-373组IL-10、Mrc1、Arg1、Ym1、Fizz1、CCL2 mRNA和Ki67、MMP-2/9蛋白表达明显降低,A549、H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05);JAK3、STAT6 mRNA和p-JAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6蛋白水平明显降低(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-373组裸鼠肺部病理损伤明显缓解;M2-TAMs特征性基因蛋白水平明显降低;JAK3、STAT6 mRNA和p-JAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:miR-373通过抑制JAK3/STAT6信号通路抑制TAMs向M2极化,从而抑制肺癌细胞增殖、侵袭、转移和血管生成。

DA、CARM1、25-(OH)-D 3在糖尿病患者外周血中的表达及与NAFLD发生的关系

目的探讨多巴胺(DA)、共激活剂相关精氨酸甲基转移酶1(CARM1)、25-羟维生素D 3[25-(OH)-D 3]在糖尿病患者外周血中的表达及与非酒精性脂肪肝(NAFLD)发生的关系。方法选取2021年5月至2023年2月在该院治疗的2型糖尿病(T2DM)合并NAFLD患者70例作为T2DM合并NAFLD组,同时选取单纯T2DM患者66例作为T2DM组,选取体检健康者70例作为健康组,比较各组外周血DA、CARM1、25-(OH)-D 3水平,同时分析T2DM合并NAFLD组不同血糖控制、严重程度患者外周血DA、CARM1、25-(OH)-D 3水平。采用Pearson相关分析外周血DA、CARM1、25-(OH)-D3水平与糖化血红蛋白(HbA1c)、受控衰减参数(CAP)的相关性,受试者工作特征曲线分析外周血DA、CARM1、25-(OH)-D 3诊断重度NAFLD的价值。结果T2DM合并NAFLD组外周血DA和25-(OH)-D 3水平明显低于T2DM组和健康组(P<0.05),而CARM1水平明显高于T2DM组和健康组(P<0.05);T2DM组外周血DA和25-(OH)-D 3水平明显低于健康组(P<0.05),而CARM1水平明显高于健康组(P<0.05)。T2DM合并NAFLD组血糖控制差者DA和25-(OH)-D 3水平明显低于血糖控制好者(P<0.05),而CARM1水平明显高于血糖控制好者(P<0.05)。重度患者DA和25-(OH)-D 3水平明显低于轻中度患者(P<0.05),而CARM1水平明显高于轻中度患者(P<0.05)。外周血DA、25-(OH)-D 3水平与HbA1c、CAP呈负相关(P<0.05),CARM1水平与HbA1c、CAP呈正相关(P<0.05)。CARM1、25-(OH)-D 3、DA诊断重度NAFLD的曲线下面积分别为0.858(95%CI 0.768~0.948)、0.922(95%CI 0.856~0.989)、0.571(95%CI 0.427~0.715)。结论DA和25-(OH)-D 3水平在T2DM患者外周血中降低,而CARM1水平升高,尤其在T2DM合并NAFLD患者中变化更加明显;DA、CARM1、25-(OH)-D 3水平与血糖控制、NAFLD严重程度存在相关性,其中CARM1、25-(OH)-D 3水平在诊断重度NAFLD方面有一定应用价值。

Janus激酶／信号转导和转录激活因子3对重症急性胰腺炎大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的体外作用研究

目的探讨Janus激酶／信号转导和转录激活因子3（JAK／STAT3）信号转导通路在重症急性胰腺炎（SAP）肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用。方法用牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型，取血清备用。将经原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞随机分组，对照组加入不含SAP大鼠血清的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）培养液；SAP组加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液；SAP＋AG490组用JAK激酶抑制剂AG490预处理细胞，加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液。用电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测STAT3活化状态；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测mRNA表达；蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）检测蛋白水平；流式细胞技术检测肺泡表面活性物质相关蛋白C（SP—C）表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡。结果与对照组比较，SAP组STAT3活性增强，STAT3 mRNA和蛋白表达均增强，SP—C蛋白表达下降（2hSP—C荧光指数0．69±0．02比1．02±0．03，P〈0．01），肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[（11．55±1．10）％比（5．30±0．36）％，P〈0．053；与SAP组比较，SAP＋AG490组STAT3活性减弱，STAT3mRNA和蛋白表达减弱，SP—C蛋白表达下降（2hSP—C荧光指数0．48±0．10比0．69±0．02，P〈0．01），肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[（13．92±0．82）％比（11．55±1．10）％，P〈O．05]。结论提示JAK／STAT3信号转导通路参与了SAP肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的病理生理过程。

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白JAK2和STAT3表达的影响

目的探讨血管紧张素1型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)与信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型,每日灌胃氯沙坦10mg/kg。采用蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测肾小球细胞JAK2、STAT3和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白的表达,免疫沉淀和Westernblot检测磷酸化JAK2(pJAK2)情况,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测肾小球细胞JAK2和STAT3mRNA的表达。结果在2周和4周时,糖尿病组较对照组肾小球JAK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3蛋白及其JAK2和STAT3mRNA表达明显增强(P均<0.01)。氯沙坦治疗组较糖尿病组pJAK2和pSTAT3表达降低(P<0.05)。氯沙坦对JAK2和STAT3蛋白及其mRNA的表达无明显影响。结论JAK2和STAT3信号蛋白可能参与了糖尿病早期肾脏的发病过程,氯沙坦对肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK/STAT信号途径的激活而实现的。

布地奈德早期干预对哮喘小鼠呼吸道炎症和白细胞介素-6/信号转导与转录激活因子3信号通路的影响

目的观察布地奈德(BUD)早期干预对哮喘小鼠呼吸道炎症的影响,以及BUD干预对呼吸道IL-6/信号转导与转录激活因子(STAT3)信号通路表达及活化的影响,探讨呼吸道IL-6/STAT3信号通路是否为BUD的作用靶点。方法 40只Balb/c小鼠随机分为正常对照组(n=10)、未干预组(n=10)、BUD干预组(n=10)、AG490干预组(n=10)。卵白蛋白(OVA)致敏制备小鼠哮喘模型,光镜下观察其肺组织结构改变,支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞分类计数,ELISA法检测其BALF中IL-4、IL-5、IL-6水平。Western blot检测各组小鼠肺组织STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平。结果 1.BUD干预组BALF中总细胞数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、EOS%、IL-4、IL-5水平均低于哮喘未干预组(Pa<0.05),与AG490干预组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.BUD干预组BALF中IL-6水平低于哮喘未干预组和AG490干预组,差异均有统计学意义(Pa<0.05)。3.BUD干预组肺组织STAT3和p-STAT3水平均低于哮喘未干预组(Pa<0.05),与AG490干预组p-STAT3水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论吸入糖皮质激素早期干预可减轻OVA致敏的哮喘小鼠呼吸道炎症,并下调呼吸道IL-6、STAT3的表达和抑制STAT3的活化,呼吸道IL-6/STAT3信号转导通路可能是吸入糖皮质激素防治哮喘的潜在作用靶点之一。

维甲酸对转化生长因子β1诱导的HFL-I细胞Ⅲ型胶原、STAT3和PIAS3表达的影响

目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅲ型胶原(collagenⅢ)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和活化STAT3蛋白抑制剂(PIAS3)表达的影响。方法:体外培养HFL-I细胞,5μg/L TGF-β1诱导0 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h后,RT-PCR法检测colla-genⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,诱导0 d、1 d、3 d和5 d后,Western blotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。不同浓度维甲酸干预,24 h后用RT-PCR法检测collagenⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,3 d后用Westernblotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。结果:TGF-β1诱导后,HFL-I细胞中collagenⅢ和STAT3 mRNA表达明显上调,PIAS3 mRNA表达明显下调,STAT3和p-STAT3蛋白表达明显上调(P<0.05)。各浓度ATRA都下调TGF-β1诱导的HFL-I细胞中collagenⅢ、STAT3 mRNA和STAT3、p-STAT3蛋白的表达,上调PIAS3 mR-NA表达(P<0.05)。结论:ATRA可通过抑制TGF-β1诱导的HFL-I细胞collagenⅢ和STAT3表达、上调PIAS3表达而起到抗肺纤维化作用。

寻常型银屑病皮损中磷酸化STAT3 EGFR的表达

银屑病是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病，以表皮过度增殖和异常分化以及炎细胞浸润为特征，与遗传、免疫等多种因素相关，其中寻常型占99％。近年来有学者人为信号转导和转录激活因子3（signal transduction and activators of transcription 3，STAT3）可能参与了银屑病的病理过程。它将细胞外信号传递到核内，参与细胞的分化、增殖、迁移以及凋亡。

肝癌细胞BEL-7402中STAT3的组成性活性及对细胞迁移影响的研究

信号转导和转录激活因子(STATs,Signaltransducersandactivatorsoftranscription)是JAK-STATs信号途径中一类重要的DNA结合蛋白,其异常表达和活化与多种肿瘤相关。本文研究发现,在肝癌细胞BEL-7402中STAT3具有组成性活性,能够持续地磷酸化,并转移入细胞核中行使功能。同时,我们成功构建了绿色荧光蛋白(GFP)标记的STAT3野生型(WT)/突变体(CYF)融合质粒,将其转入细胞,以荧光素酶报告系统验证了融合蛋白的活性;通过测定绿色荧光为标记的细胞迁移距离的方法证实,过表达野生型STAT3对肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移有促进作用,而突变体STAT3能够降低癌细胞的迁移。

戊型肝炎病毒ORF3介导的IL-6及STAT3的表达

目的戊型肝炎病毒ORF3蛋白在信号传导中的功能尚未确定,本研究对其是否激活STAT3分子及作用进行探讨。方法采用前期已构建的p EGFP-ORF3真核表达载体转染Hep G2细胞;荧光定量PCR方法检测各组IL-6及STAT3的m RNA表达量;ELISA法检测各组上清中IL-6的分泌量;Western blot检测各组STAT3的蛋白表达。结果和对照组比较,转染I型和Ⅳ型ORF3真核表达质粒的Hep G2细胞组IL-6以及STAT3 m RNA水平明显升高,培养上清中IL-6分泌增加,STAT3蛋白表达水平无显著性差异,但p-STAT3蛋白表达水平显著增加。结论 HEV引起的病毒性肝炎中,ORF3介导的STAT3及IL-6起着重要的作用。

HMGB1、TLR4、STAT3在抗肾小球基底膜型肾小球肾炎小鼠模型中的表达及意义

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体-4(TLR4)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)在抗肾小球基底膜型肾小球肾炎小鼠模型中的表达及意义。方法收集30只小鼠,随机分为正常小鼠组(对照组)、抗肾小球基底膜型肾小球肾炎建模组(试验组),每组15只。采用对氨基水杨酸(PAS)染色观察肾小球基底膜变化,实时荧光定量聚合酶链反应(RTPCR)法检测肾组织中的HMGB1、p-STAT3mRNA,采用Western blot法检测肾组织中的HMGB1、TLR4、STAT3、p-STAT3。结果与对照组比较,试验组小鼠肾小球基底膜明显增厚,小鼠肾组织中HMGB1、TLR4、STAT3、p-STAT3及HMGB1mRNA、p-STAT3mRNA的相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组小鼠肾组织中HMGB1与TLR4,TLR4与p-STAT3,HMGB1与p-STAT3,HMGB1mRNA与p-STAT3mRNA的表达水平之间呈正相关(r=0.401,P=0.005;r=0.399,P=0.005;r=0.412,P=0.004;r=0.398,P=0.005)。结论 HMGB1在抗肾小球基底膜型肾小球肾炎小鼠中的致炎作用,可以通过结合其受体TLR4而激活STAT3,从而实现抗肾小球基底膜型肾小球肾炎发生。