组成型雄烷受体与公猪膻味物质代谢关系的研究进展

饲养不去势公猪较去势公猪而言具有很多优势,但导致公猪膻味物质雄烯酮和粪臭素一直是限制其饲养的主要瓶颈。作者综述了组成型雄烷受体对膻味物质雄烯酮和粪臭素代谢关系的研究,为寻求一种较合适的方法减少公猪膻味提供参。

中草药对孕烷X受体和组成型雄烷受体等核受体通路影响的研究进展

孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)是核受体亚家族的成员之一,参与大量的外源性和内源性化学物质的生物转化,能被多种中草药激活,调节下游靶基因的表达,在药物代谢酶和转运体的调节中起重要作用。组成型雄烷受体(constitutive androstane receptor,CAR)和PXR一样能与外源性配体结合调节CYP2B6、CYP3A4、CYP2C19、UGT1A1的表达,共同参与CYP药物代谢酶的调节,成为药物作用的靶标。

孕烷X受体及组成型雄烷受体在药物代谢和研发中的应用

为保护机体免受外源性化学物质和内源性毒性脂质损伤,孕烷X受体及组成型雄烷受体在代谢调节中调控对毒性物质的解毒和清除,本文从这两个核受体的作用机制入手,对两者在药物代谢的调节、药物研发中的应用及其对药物相互作用的影响做了比较详细的阐述,并进一步分析目前有待解决的问题及未来的发展趋势。

小鼠肝脏内组成型雄烷受体基因表达剪切突变体的研究

目的:研究组成型雄烷受体(CAR)在小鼠肝脏内是否存在剪切突变体。方法:以小鼠的肝脏为原料提取核酸,采用逆转录的方法获得小鼠的组成型雄烷受体的cDNA序列,并将其构建到T载体中进行测序分析。结果:实验发现CAR在小鼠肝脏内有不同的剪切体存在。结论:剪切体的不同主要集中在受体结合部位,估计这种不同与不同外源性物质对受体的调节功能不同有关。

猪组成型雄烷受体激动剂高通量药物筛选模型的建立

构建猪组成型雄烷受体(pgCAR)激动剂体外高通量筛选模型。利用RT-PCR技术从猪肝脏总RNA中扩增出pgCAR基因序列,将测序后正确的pgCAR片段连接到pcDNA 3.1 vector上构建表达载体pcDNA 3.1-CAR;将合成的5个拷贝NR1(Nuclear receptor sites)插入PGL3-TK-promoter构成报告质粒(NR1)5-TK-luc,与PRL-TK报告质粒构成双荧光报告系统。用PEI转染技术将表达载体与报告质粒共转染HepG 2细胞株中,通过检测荧光素酶基因表达状况评价具有生物活性配体化合物对pgCAR激动活性。阳性药苯妥英钠明显提高荧光素酶的表达,最大上调倍增数可达约2.53倍,并且在一定浓度下阳性药与相对荧光酶的活性表达有较好量效关系。

组成型雄烷受体人源化小鼠模型的构建与验证

目的:构建组成型雄烷受体(constitutive androstane receptor,CAR)人源化小鼠模型,进行活化特性有效性验证。方法:应用转录激活因子样效应物核酸酶技术构建CAR基因敲除小鼠模型;应用细菌人工染色体大片段序列转基因方法构建人源CAR全长序列转基因小鼠模型。对杂交后获得的CAR人源化小鼠模型进行测序鉴定和基因扩增片段鉴定,并分析人源CAR剪接体肝组织丰度特征。比较野生小鼠、CAR基因敲除小鼠、CAR人源化小鼠肝、肠组织CAR表达水平,采用荧光定量聚合酶链反应法检测给予物种特异性激活剂后肝组织靶基因细胞色素P4502B、3A相对表水平。结果:测序鉴定CAR基因敲除小鼠基因缺失10个碱基对序列,人源CAR序列整合进入小鼠基因组。CAR人源化小鼠剪接体肝组织丰度与人肝组织相同,对小鼠特异性激活剂无应答,给予人特异性激活剂后肝组织细胞色素P4502B、3A表达显著升高(P<0.01)。结论:构建的CAR人源化小鼠模型在肝组织生理表达水平、剪接体丰度和物种特异性激活剂应答方面均符合人源化特征。

外源化合物对孕烷X受体和组成型雄烷受体介导的细胞色素P4503A4和2B6转录调节共转染体系的优化

目的优化孕烷X受体(hPXR)和组成型雄烷受体(hCAR)介导的细胞色素P450(CPY)3A4和CYP2B6诱导共转染体系,提高检测系统的灵敏度。方法利用invitrogen脂质体2000共同转染表达质粒hPXR/hCAR、报告基因质粒CPY3A4/CYP2B6和内参质粒pRL-TK到HepG-2细胞中。系统以hPXR的激动剂利福平,hCAR的激动剂CITCO为阳性对照组,以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂阴性对照组。通过调整3种质粒的转染比例,以利福平/DMSO和CITCO/DMSO的比活值,即阳性药物的诱导倍数作为优化系统灵敏度的指标,分别获得最大比值以表示系统具有最佳灵敏度。结果当共转染体系比例为hPXR/hCAR表达质粒150ng、CPY3A4/CYP2B6报告基因质粒600ng、PLR-TK内参质50ng时,转染体系的检测灵敏度最高。结论针对所使用的转染细胞系和共转染质粒,通过优化质粒的转染比例可提高系统的灵敏度,优化的共转染系统可用于药物代谢酶诱导机制的研究。

酒精性肝病模型小鼠胆红素清除通路变化以及组成型雄烷受体的表达的研究

目的研究酒精性肝病模型小鼠胆红素清除通路变化以及胆红素代谢调控因子组成型雄烷受体的表达情况。方法采用Lieber-De Carli酒精饲料以及等卡热的对照饲料予小鼠自由饮食4周构建酒精性肝病小鼠模型。检测总红素、直接胆红素水平,采用Western blot法、RT-PCR、免疫荧光法分析胆红素摄取转运体OATP1a1、OATP1a4、OATP1b2,葡萄糖醛酸转移酶UGT1A1、泵出转运体MRP2以及胆红素代谢调控因子CAR的表达。结果慢性酒精摄入提高血浆胆红素水平,在转录及翻译水平诱导UGT1A1表达、下调MRP2以及OATP1a1。此外,酒精性肝病小鼠肝核蛋白CAR表达明显抑制而肝总蛋白CAR未见明显改变。结论慢性酒精摄入选择性抑制胆红素清除通路,伴随胆红素代谢调控因子CAR易位损伤。

核受体组成型雄烷受体在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用

背景：非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）出现肝损伤．演变为非酒精性脂肪性肝炎 （ nonalcoholicsteatohepatitis, NASH ）是很常见的．但其发生的病理生理学机制目前仍不清楚。

组成型雄烷受体CAR在肝再生中的作用

组成型雄烷受体（Constitutive Androstane Receptor，CAR）是生物体内重要的核受体分子。CAR主要在肝脏和肠组织中表达，在药物代谢的表达调节过程中发挥重要作用。大量研究表明，CAR有促进肝细胞增殖的作用，长期激活CAR可引起肝肿大，甚至肝癌的发生。

植物药-化疗药物相互作用的研究进展

很多癌症患者在接受化疗药物的同时都会使用一些植物药。化疗药物的治疗窗都比较窄,因此有可能发生有害的药物相互作用。植物药诱导药物代谢酶和ATP结合的盒式膜转运蛋白是它们发生相互作用的主要机制之一。近年来一些研究表明,孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、组成型雄烷受体(constitutive andro-stane receptor,CAR)、维生素D结合受体(vitamin D-binding receptor,VDR)在代谢酶和药物转运蛋白的诱导中扮演着重要角色。现主要就植物药-化疗药物在药动学方面的相互作用作一简单综述,主要关注药物相互作用发生的机制。

SRC-3在CAR调节肝细胞增殖和药物代谢中起重要作用

孕烷X受体和组成型雄烷受体（CAR）等核受体（NR）在药物代谢中起重要作用，包括P450酶代谢、外源性代谢调节以及肝细胞增殖，然而CAR独自绑定到NR的应答元件不足以激活基因表达。因此，我国厦门大学的Chen等通过研究类固醇激素受体辅助激活因子（SRC）家族成员，旨在阐明其在CAR介导的肝细胞增殖和药物代谢中的作用。

细胞色素P450286启动子多态性与孕烷X受体活化对细胞色素P450286诱导的协同作用

细胞色素P450286（CYP286）参与许多临床药物的代谢转化过程，具有遗传多态性和诱导性。CYP286在群体间表达水平的个体差异主要归因于遗传多态性或化学物通过激活核受体孕烷X受体（PXR）和（或）组成型雄烷受体（CAR）介导的诱导表达。