组正交超饱和设计在发酵罐手工清洗方法开发中的应用

目的开发一种适用于发酵罐手工清洗方法。方法采用组正交超饱和设计方法(15个因素2个水平),试验因素包括9个实际影响发酵罐清洗因素和6个假因素;评价指标为发酵罐清洗后淋洗水电导率与总有机碳(total organic carbon,TOC)含量;通过标准最小二乘法拟合试验结果获得较优清洗条件,从而建立发酵罐手工清洗方法,进而通过试验验证发酵罐淋洗水电导率和TOC含量的实际值是否与预测值具有等效性。结果获得发酵罐手工清洗条件如下:预清洗次数1次,预清洗温度25℃;枸橼酸洗涤浓度5 g/L,枸橼酸洗涤次数1次,枸橼酸清洗温度25℃,酸洗涤剂去除清洗次数1次;氢氧化钠洗涤浓度5 g/L,氢氧化钠洗涤次数3次,碱洗涤剂去除清洗次数5次。验证试验淋洗水电导率和TOC含量检测结果均高于预测值,数据中位数均低于《中华人民共和国药典》2020版(四部)注射用水标准。结论此手工清洗方法对于发酵罐的清洗结果有效,且淋洗水检测结果理想。

应用QbD原则优化GO-SSD发酵罐混合清洗工艺的开发

文章开发了一种适用于发酵罐混合模式的清洗方法。采用组正交超饱和设计方法,以发酵罐排水口在线电导率值、发酵罐淋洗水澄明度和发酵罐内部洁净程度作为评价指标。通过标准最小二乘法和蒙特卡洛模拟获得发酵罐混合模式清洗工艺参数和设计空间,采用获得的设计空间的最劣工艺参数进行连续5次验证试验来验证清洗方法的有效性。最终获得清洗工艺设计空间如下:纯化水清洗循环次数2~3次,注射用水清洗循环次数2~3次,注射用水清洗吹扫时间3~5 min,其余清洗工艺参数采用组正交超饱和设计低水平条件。进行5批混合模式清洗验证,结果显示评价指标均符合标准,证明研究建立的清洗方法对发酵罐污染物清洗结果有效,且评价指标结果较优。