脂肪组织分泌物中蛋白浓度对诱导脂肪干细胞成脂的影响

目的观察胎牛血清(FBS)对体外培养获取的脂肪组织分泌物(ATE)诱导大鼠脂肪干细胞(ADSCs)成脂能力有无影响,并探讨ATE中不同蛋白浓度对诱导大鼠ADSCs成脂、细胞增殖和迁移能力的影响。方法培养大鼠ADSCs并传代,对ADSCs成骨和成神经诱导,采用茜素红染色和神经丝蛋白(NF)免疫荧光检测鉴定。含有FBS和无FBS的培养基对脂肪组织块进行培养并收集ATE,对第4代ADSCs进行诱导,第7d时油红染色鉴定并计算成脂率;收集无FBS培养基获取的ATE,分为不同蛋白质量浓度组(100μg/mL、250μg/mL、500μg/mL组),对第4代ADSCs进行成脂诱导,观察各组成脂率;并观察不同蛋白质量浓度组对ADSCs细胞增殖和迁移的影响。结果培养的ADSCs成骨和成神经诱导后茜素红染色和NF免疫荧光染色阳性;获取ATE时添加或不添加FBS,在第3d时均能诱导ADSCs成脂,第7d时的成脂率差异无统计学意义;ATE 500μg/mL组较100μg/mL、250μg/mL组成脂率高(P均<0.05),细胞培养2d后,3个不同蛋白质量浓度组均抑制细胞增殖,不同蛋白质量浓度间细胞抑制率差异无统计学意义(P均>0.05);ATE中不同蛋白质量浓度对细胞的迁移无影响。结论无FBS的培养基获取的ATE,短期内对ADSCs成脂能力没有影响;ATE蛋白浓度与ADSCs成脂率有关。

各生理因素对山苍子茎段插穗生根成活的影响

【目的】为进一步促进山苍子扦插生根成活提供参考。【方法】采取单因素随机试验,在山苍子扦插过程中分别随机抽取新鲜、有愈伤组织(未生根)、半枯、生根(愈伤组织生根型)的插穗茎段为研究对象,测定和分析4种插穗的营养物质及其分泌物含量,探究影响山苍子扦插成活的主要生理因素。【结果】山苍子插穗扦插初期消耗N、可溶性糖和可溶性淀粉为生根诱导提供能量,并且三者均为新鲜插穗中含量最高(P<0.05),分别为14.14、74.38、100.85 mg/g;在愈伤组织诱导期,插穗中黄酮、多酚含量上升,不利于其生根成活,此阶段半枯插穗的黄酮含量显著高于愈伤组织插穗和生根插穗(P<0.05);在愈伤组织形成阶段,插穗的全K和可溶性蛋白消耗量增加,此阶段插穗的全K和可溶性蛋白含量显著降低(P<0.05),分别为2.42、0.51 mg/g;在插穗生根后,其营养物质含量增加,黄酮、多酚含量降低,此时生根插穗的全K、可溶性蛋白、可溶性糖、可溶性淀粉含量均显著高于愈伤组织插穗(P<0.05),而黄酮和多酚含量显著降低(P<0.05),分别为3.66、6.93 mg/g。在4种插穗的组织分泌物中共鉴定出67种化合物。其中11种化合物(如十二甲基环六硅氧烷、二十五烷、十二甲基五硅氧烷等)可能对扦插生根成活具有促进作用,29种化合物(如芥酸酰胺、6,7-二甲氧基-1-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉、二十烷等)可能具有抑制作用。【结论】插穗中高含量的N、可溶性糖和可溶性淀粉有利于山苍子插穗的生根诱导,而插穗中积累过量的黄酮、多酚不利于或抑制愈伤组织形成和插穗成活;分泌物中11种化合物可能促进插穗生根成活,29种化合物可能抑制插穗生根成活。