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形成三螺旋DNA的寡核苷酸抑制内皮细胞组织因子基因的表达 被引量:2
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作者 李黔宁 应大君 +7 位作者 戴光明 郑健 肖道虹 邓志宽 刘勇 刘立杰 周永琴 任萍 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2002年第3期190-194,共5页
为探讨形成三螺旋DNA的寡核苷酸是否对切应力诱导内皮细胞组织因子基因表达有抑制作用 ,针对内皮细胞组织因子基因启动子内切应力反应元件 ,设计反向脱氧寡核苷酸序列T2 1GTa,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成脱氧寡核苷酸。在脱氧寡核... 为探讨形成三螺旋DNA的寡核苷酸是否对切应力诱导内皮细胞组织因子基因表达有抑制作用 ,针对内皮细胞组织因子基因启动子内切应力反应元件 ,设计反向脱氧寡核苷酸序列T2 1GTa,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成脱氧寡核苷酸。在脱氧寡核苷酸的 3’末端进行硫代磷酸酯修饰。应用电泳迁移分析观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。在ECV30 4内皮细胞株观察γ 32P标记硫代磷酸酯三螺旋DNA寡核苷酸的细胞摄取及其对组织因子基因表达的影响。结果发现 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa ps与靶序列能形成三链DNA ,其Kd值为 3 .6× 1 0 1 0 mol L。在内皮细胞株ECV30 4细胞 ,三螺旋DNA寡核苷酸 ps (T2 1GTa ps)的细胞吸收率为 1 1 .65 % ,主要分布在核沉淀 ,约占吸收总量的 77.2 5 % ,显著降低内皮细胞组织因子基因mRNA表达及组织因子蛋白合成的平均吸光度值 ,显著降低组织因子的促凝活性。此结果提示 ,硫代磷酸酯寡核苷酸T2 1GTa 展开更多
关键词 寡核苷酸 三螺旋型 组织因子基因 基因表达 血管内皮
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人组织因子基因RNA干扰载体的构建与鉴定 被引量:1
2
作者 唐雯 熊石龙 +5 位作者 杨红玲 包杰 杜江 花少栋 孙学刚 封志纯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1065-1067,1070,共4页
目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U... 目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序。将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况。结果测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制。结论成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。 展开更多
关键词 组织因子基因 RNA干扰载体 内皮细胞
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基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因转染血管平滑肌细胞移植对急性心肌梗死后早期心肌重塑的影响 被引量:2
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作者 贾智博 田海 +3 位作者 刘开宇 孙露 蒋树林 李仁科 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期512-516,共5页
目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardialinfarction,AMI)后早期心脏结构变... 目的研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor-3of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对急性心肌梗死(acute myocardialinfarction,AMI)后早期心脏结构变化的影响,并探讨其可能的机制。方法取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。另取61只Wistar雌性大鼠建立左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,将存活的54只大鼠模型随机分为三组,每组18只。于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106个TIMP-3基因转染VSMCs(A组)、1×106个VSMCs(B组)或不含细胞的PBS液(C组)各0.5ml。术后1周,进行心脏形态学检测观察大鼠心脏结构变化,免疫组织化学染色验证TIMP-3基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,Western blot法测定大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)蛋白的含量。结果成功分离、培养VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。术后1周,A组大鼠梗死心肌面积占左室游离壁面积的百分比为28.73%±1.56%,小于B组39.63%±1.84%和C组46.32%±2.16%(P<0.01);B组小于C组(P<0.01)。A组大鼠左室容积指数为5.27±0.21mm3/g,小于B组6.69±0.34mm3/g和C组9.67±0.88mm3/g(P<0.01);B组小于C组(P<0.01)。免疫组织化学染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功植入缺血心肌并在其中存活。Western blot法示A组大鼠缺血心肌TIMP-3蛋白含量为300704.8±3692.8,高于B、C组的195548.8±3014.2及177991.1±2502.1(P<0.01);B组高于C组(P<0.01)。A组MMP-9蛋白含量为594827.4±5708.5,低于B、C组的921461.4±8887.4及1044445.0±8788.6(P<0.01);B组低于C组(P<0.01)。结论将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制AMI后早期心肌重塑。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因 急性心肌梗死 心肌重塑 细胞移植 基因治疗
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α1-抗胰蛋白酶和组织因子途径抑制物基因多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系 被引量:3
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作者 张超贤 郭李柯 +1 位作者 秦咏梅 李光艳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期326-334,共9页
目的:探讨α1-抗胰蛋白酶(α1-antitypsin,α1-AT)基因第5外显子和组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因T287C多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系。方法:选择河南省新乡医学院第一附属医院2011年7... 目的:探讨α1-抗胰蛋白酶(α1-antitypsin,α1-AT)基因第5外显子和组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因T287C多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系。方法:选择河南省新乡医学院第一附属医院2011年7月至2015年7月期间收治的经病理学确诊的大肠癌TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者各180例,以180例TNM 0期患者作为对照组,用PCR-RFLP技术检测各组患者外周血白细胞两基因的多态性,以Hardy-Weinberg平衡检验分析样本的群体代表性,以Khoury和Wagener模型分析两基因多态性的交互作用。ELISA法检测患者血清α1-AT和TFPI蛋白表达,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测α1-AT和TFPI对人结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blotting检测SW480细胞胰蛋白酶、组织因子(tissue factor,TF)和蛋白酶激活受体-2(protease-actieated receptor 2,PAR-2)表达水平。结果:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型者大肠癌侵袭与转移的风险均显著增加,且在α1-AT(MZ)和TFPI(TC)之间、α1-AT(MZ)和TFPI(CC)之间、α1-AT(ZZ)和TFPI(TC)及α1-AT(ZZ)和TFPI(CC)之间均存在正向交互作用(均γ>1)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于0期组,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者之间血清α1-AT(或TFPI)表达也有明显差异(P<0.01)。同一组携带突变基因型个体的血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于携带野生型个体(P<0.01)。体外细胞培养实验显示,α1-AT可明显抑制SW480细胞胰蛋白酶的表达,而TFPI则明显抑制TF表达,而两者均可明显降低细胞PAR-2的表达及细胞迁移和侵袭能力。结论:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型均是大肠癌侵袭与转移的高危因素,基因多态性的交互作用增加了大肠癌侵袭与转移的风险。 展开更多
关键词 大肠癌 α1-抗胰蛋白酶基因 组织因子途径抑制物基因 多态性 侵袭 转移
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组织途径抑制因子-2基因重组腺病毒载体的构建及其抑制喉鳞癌侵袭的研究 被引量:2
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作者 张慧燕 刘鸣 +1 位作者 孙亚男 田霖丽 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期2741-2743,共3页
目的构建载有TFPI-2基因的重组腺病毒载体,探讨其对喉癌侵袭能力的抑制作用。方法将TFPI-2cDNA克隆于腺病毒载体PSG-CMV,得到重组质粒PSG-TFPI-2。将质粒PSG-TFPI-2与5型腺病毒共转染至293细胞,生成带有TFPI-2基因的重组腺病毒载体。重... 目的构建载有TFPI-2基因的重组腺病毒载体,探讨其对喉癌侵袭能力的抑制作用。方法将TFPI-2cDNA克隆于腺病毒载体PSG-CMV,得到重组质粒PSG-TFPI-2。将质粒PSG-TFPI-2与5型腺病毒共转染至293细胞,生成带有TFPI-2基因的重组腺病毒载体。重组腺病毒质粒经过293细胞的扩增和CsCl的纯化,感染Hep-2细胞。运用侵袭实验观察感染后的喉癌细胞侵袭能力的变化。结果经酶切和测序等方法的鉴定,证实了载体构建的正确性,病毒滴度为2.8×1010PFU/mL。侵袭实验显示转染Ad-TFPI-2的喉癌细胞侵袭能力下降。结论成功构建带有TFPI-2的重组腺病毒载体,运用Ad-TFPI-2重组腺病毒能够有效地抑制喉癌细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 组织途径抑制因子-2基因 腺病毒 喉鳞癌
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急性冠状动脉综合征患者组织因子途径抑制物基因V264M的多态性 被引量:1
6
作者 王君 朱铁兵 +2 位作者 杨志健 曹克将 马文珠 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2006年第1期64-66,共3页
目的探讨在中国人群中组织因子途径抑制物基因第9外显子874G→A(V264M)多态性与急性冠状动脉综合征的关系,以及各基因型对血浆游离组织因子途径抑制物水平和冠状动脉病变严重程度的影响。方法选取经冠状动脉造影检查的136例急性冠状动... 目的探讨在中国人群中组织因子途径抑制物基因第9外显子874G→A(V264M)多态性与急性冠状动脉综合征的关系,以及各基因型对血浆游离组织因子途径抑制物水平和冠状动脉病变严重程度的影响。方法选取经冠状动脉造影检查的136例急性冠状动脉综合征患者和106例健康对照者,用聚合酶链反应和限制片长多态性方法分析组织因子途径抑制物(V264M)基因型。利用酶联免疫吸附试验检测部分患者血浆游离组织因子途径抑制物水平。结果急性冠状动脉综合征组血浆游离组织因子途径抑制物水平明显高于正常组(P<0.05),两组的V264M基因型和等位基因的分布趋势相同,差异无显著性(P>0.05)。A等位基因携带者的游离组织因子途径抑制物水平低于GG基因型者(6.9±5.1比14.3±9.5),而冠状动脉病变程度不受V264M基因多态性的影响(χ2=0.413,P>0.05)。结论中国人群中存在V264M多态性,它对血浆游离组织因子途径抑制物水平可能有影响,但未发现V264M多态性与急性冠状动脉综合征发病存在相关性。 展开更多
关键词 内科学 组织因子途径抑制物基因多态性 聚合酶链反应 急性冠状动脉综合征 组织因子途径抑制物基因V264M 基因多态性
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组织因子途经抑制物基因对血管内皮细胞分泌层黏连蛋白的影响 被引量:1
7
作者 白英 史旭波 郭诗东 《临床荟萃》 CAS 2013年第10期1116-1119,F0002,共5页
目的研究组织因子途经抑制物(TFPI)基因转移对大鼠血管内皮细胞层黏连蛋白(LN)表达的影响,探讨TFPI基因抑制再狭窄的机制。方法用丙酮酸钠刺激大鼠血管内皮细胞,比较丙酮酸钠刺激前后大鼠血管内皮细胞表达LN的差异;分别使用携带TFPI基因... 目的研究组织因子途经抑制物(TFPI)基因转移对大鼠血管内皮细胞层黏连蛋白(LN)表达的影响,探讨TFPI基因抑制再狭窄的机制。方法用丙酮酸钠刺激大鼠血管内皮细胞,比较丙酮酸钠刺激前后大鼠血管内皮细胞表达LN的差异;分别使用携带TFPI基因(Ad-TFPI)和携带LacZ基因(Ad-LacZ)的重组腺病毒在体外转染大鼠血管内皮细胞;用X-gal染色法检测外源基因的转染效率,用酶联免疫吸附测定方法检测TFPI基因转染与LAZ基因转染,大鼠血管内皮细胞分泌LN的浓度变化。结果丙酮酸钠可明显刺激大鼠血管内皮细胞分泌LN。TFPI基因转染培养的大鼠血管内皮细胞后,第2天上清中LN表达减少,为(230.73±32.57)μg/L,Ad-LacZ组为(322.87±34.87)μg/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),但是第4天和第6天LN表达,TFPI组与Ad-LacZ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TFPI基因转移可明显抑制大鼠血管内皮细胞分泌LN,随着时间的推移这种抑制作用减弱;TFPI可能通过直接抑制LN的表达抑制再狭窄的发生和发展。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 层黏连蛋白 组织因子途经抑制物基因 基因转移 血管内皮细胞 大鼠
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金属蛋白酶组织抑制因子转染骨髓间充质干细胞静脉输入治疗缺血性心肌病 被引量:2
8
作者 易海波 刘军 蒋丽华 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第36期6724-6729,共6页
背景:金属蛋白酶组织抑制因子1可能通过抑制基质金属蛋白酶活性降低干细胞侵袭能力,提高其归巢修复能力。目的:观察转染金属蛋白酶组织抑制因子1基因骨髓间充质干细胞移植修复损伤心肌的能力。方法:开胸结扎SD大鼠冠状动脉前降支建立心... 背景:金属蛋白酶组织抑制因子1可能通过抑制基质金属蛋白酶活性降低干细胞侵袭能力,提高其归巢修复能力。目的:观察转染金属蛋白酶组织抑制因子1基因骨髓间充质干细胞移植修复损伤心肌的能力。方法:开胸结扎SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,1周后随机分组:空白组经尾静脉内注射DMEM悬液;干细胞组经尾静脉内注射含1×107骨髓间充质干细胞的DMEM悬液;绿色荧光蛋白-干细胞组经尾静脉内注射转染带有绿色荧光蛋白基因慢病毒空载体的骨髓间充质干细胞(1×107)DMEM悬液;TIMP-1-shRNA-干细胞组经尾静脉内注射转染TIMP-1-shRNA的骨髓间充质干细胞(1×107)DMEM悬液。结果与结论:造模后,4组大鼠心脏功能受损,收缩能力下降,治疗4周后心脏功能均有不同程度改善:与空白组比较,干细胞组、绿色荧光蛋白-干细胞组、TIMP-1-shRNA-干细胞组心脏收缩功能明显提高(P<0.05),心肌梗死面积百分比明显缩小(P<0.05),梗死区毛细血管密度明显增加(P<0.05),且TIMP-1-shRNA-干细胞组改善程度优于干细胞组、绿色荧光蛋白-干细胞组(P<0.05)。说明转染金属蛋白酶组织抑制因子1基因的骨髓间充质干细胞移植能够明显改善损伤心肌功能,修复缺血性心肌病。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 金属蛋白酶组织抑制因子1基因 基因转染 心肌梗死 细胞移植 干细胞
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TIMP-3基因转染的血管平滑肌细胞移植对心肌梗死后心脏形态和功能的影响 被引量:2
9
作者 贾智博 田海 +4 位作者 苗宏志 刘开宇 孙露 蒋树林 李仁科 《心脏杂志》 CAS 2009年第6期765-769,共5页
目的: 观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3 (tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死后心脏形态和功能的影响。 方法: 取Wi... 目的: 观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3 (tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3)基因转染的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死后心脏形态和功能的影响。 方法: 取Wistar大鼠胸主动脉采用组织块贴壁法培养VSMCs。应用脂质体转染技术,将TIMP-3-pcDNA3.0重组质粒瞬时转染至VSMCs。另取雌性Wistar大鼠121只(体质量200~250 g),其中93只建立急性心肌梗死模型。将存活的84只随机分成A、B、C 3组(每组28只),即于心肌梗死后3 d,再次开胸并在梗死的心肌中分别注射含有3×106个TIMP-3基因转染的VSMCs(A组)、3×106个VSMCs(B组)或改良Eagle培养基(Dulbeccos modification of Eagles medium Dulbecco,DMEM培养基)(C组)各0.3 ml,121只中剩余的28只大鼠作为正常对照组(D组),不做任何处置。基因转移4周后,进行超声心动图检测心脏的功能,然后获取心脏标本,计算心脏左室容积(left ventricular volume,LVV)和左室容积指数(left ventricular volume index,LVVI),最后进行心脏组织学观察。 结果: 成功分离、培养了VSMCs,纯度达98%,TIMP-3基因成功转入VSMCs中。基因转移4周,超声心动图检查发现,心脏功能的各项指标A组优于B组和C组,B组优于C组;但A、B、C 3组均差于D组(P均〈0.05)。A、B、C和D组心脏LVV分别为(894.4±158.3)mm3、(1 126.5±284.7)mm3、(1 372.8±181.9)mm3和(420.2±39.6)mm3,LVVI分别为(2.957±0.362)mm3/g、(3.604±0.710)mm3/g、(4.538±0.259)mm3/g和(1.009±0.134)mm3/g,A、B、C 3组均明显大于D组,A、B组较C组明显减小,A组较B组明显减小(P均〈0.05)。组织学观察显示,C组呈心肌梗死表现,B组梗死心肌内可见成簇的肌细胞,室壁较C组增厚;A组较B、C组梗死区缩小、室壁增厚,D组无异常。 结论: 大鼠心肌梗死后3 d,将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入梗死心肌内,可明显改善心脏的形态及功能。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶组织抑制因子3基因 心肌梗死 心脏形态 心脏功能 细胞移植 大鼠
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血清TFPI-2基因甲基化在胃癌诊断中的临床价值 被引量:3
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作者 朱立岳 关明 +4 位作者 康志华 高建萍 翁丽贞 章励 胡雷光 《检验医学》 CAS 2014年第7期712-717,共6页
目的通过测定组织及血清组织因子途径抑制物2(TFPI-2)基因甲基化,探讨其作为一种肿瘤标志物对胃癌诊断的临床价值。方法收集32例胃癌、29例萎缩性胃炎作为研究对象,以30例不排除浅表性胃炎的正常对象作为对照。应用甲基化特异性聚合酶... 目的通过测定组织及血清组织因子途径抑制物2(TFPI-2)基因甲基化,探讨其作为一种肿瘤标志物对胃癌诊断的临床价值。方法收集32例胃癌、29例萎缩性胃炎作为研究对象,以30例不排除浅表性胃炎的正常对象作为对照。应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法,测定组织及血清TFPI-2基因甲基化状态。应用电化学发光免疫法测定癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)。结果组织TFPI-2基因甲基化检出率胃癌组为53.13%、萎缩性胃炎组为37.93%、对照组为3.33%。胃癌组明显高于对照组(P<0.05)。血清TFPI-2基因甲基化检出率胃癌组为28.13%,萎缩性胃炎组为6.90%,对照组未检出。胃癌组明显高于萎缩性胃炎组(P<0.05)和对照组(P<0.05)。血清TFPI-2基因甲基化检测灵敏度为28.13%,特异性为96.61%。血清检出阳性占组织检出阳性的比率为37.93%。胃癌组血清TFPI-2基因甲基化与性别、年龄、Borrmann's分期、CEA和CA199检测结果无关(P>0.05)。胃癌组血清TFPI-2基因甲基化与CEA、CA199阳性检出率分别为28.13%、21.88%、18.75%。联合3项阳性检出率为53.13%,显著高于3项各自单独检测(P<0.05)。结论血清TFPI-2基因甲基化来源于组织,其对胃癌诊断特异性较高,但灵敏度较差。联合检测血清CEA、CA199有利于提高其灵敏度。血清TFPI-2基因甲基化测定对胃癌的诊断有一定价值。 展开更多
关键词 组织因子途径抑制物-2基因 甲基化 血清游离DNA 胃癌
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基因多态性的交互作用与食管癌患者血浆凝血酶活性及病理分期的关系 被引量:1
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作者 张超贤 郭李柯 +1 位作者 张利利 韩宇 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期437-444,共8页
目的探讨凝血酶原基因3′非翻译区G20210A与组织因子途径抑制物(TFPI)基因5′非翻译区C399T多态性的交互作用与食管癌患者血浆凝血酶活性及病理分期的关系。方法依据TNM分期,选择新乡医学院第一附属医院2011年5月至2015年8月收治的食管... 目的探讨凝血酶原基因3′非翻译区G20210A与组织因子途径抑制物(TFPI)基因5′非翻译区C399T多态性的交互作用与食管癌患者血浆凝血酶活性及病理分期的关系。方法依据TNM分期,选择新乡医学院第一附属医院2011年5月至2015年8月收治的食管癌TNMⅠ期~Ⅳ期及TNM 0期患者各198例,发色底物法测定血浆凝血酶活性,并应用PCR-RFLP技术检测各组患者的外周血白细胞的凝血酶原基因3′非翻译区G20210A和TFPI基因5′非翻译区C399T多态性,采用非条件Logistic回归分析估算凝血酶原基因3′非翻译区G20210A和TFPI基因5′非翻译区C399T与食管癌浸润与转移风险的调整比值比(OR)及95%可信区间(95%CI),并分析二者多态性的交互作用对血浆凝血酶活性和食管癌浸润与转移的影响。结果Ⅰ期组G20210A(GA)、G20210A(AA)、C399T(CT)和C399T(TT)基因型频率分别为24.24%、26.77%、24.24%和25.76%,Ⅱ期组分别为34.34%、37.37%、34.85%和36.36%,Ⅲ期组分别为39.90%、42.93%、40.41%和41.92%,Ⅳ期组分别为45.45%、46.97%、45.35%和46.46,对照组分别为13.64%、14.14%、13.13%和13.64%,各分期组与0期对照组之间差异均有统计学意义(P均<0.01)。G20210A(GA)和G20210A(AA)基因型患者的食管癌浸润与转移的风险均显著增加,C399T(CT)和C399T(TT)基因型者食管癌浸润的风险也显著增加。基因突变的协同分析发现,G20210A(AA)/C399T(TT)基因型者各分期组和0期组的分布频率分别为7.07%、14.14%、18.18%、21.71%和1.52%,各组之间差异均有统计学意义(P均<0.01)。G20210A(AA)/C399T(TT)基因型者食管癌浸润与转移的风险显著增加,且两基因型在食管癌浸润与转移中存在正向的交互作用(γ均>1),此外,G20210A(GA)和C399T(TT)之间、G20210A(GA)和C399T(CT)之间及G20210A(AA)和C399T(CT)之间均存在正向交互作用(γ均>1)。各分期患者血浆凝血酶活性明显高于0期组,且各分期组患者之间也有明显差异(P<0.01)。突变基因型携带者的血浆凝血酶活性明显高于在同一TNM分期野生型携带者的血浆凝血酶活性(P<0.01)。结论 G20210A和C399T的基因突变均是食管癌浸润与转移的易患因素,基因突变的交互作用增加了食管癌浸润与转移的风险,这可能与其提高血浆凝血酶活性密切相关。 展开更多
关键词 食管癌 凝血酶原基因3′非翻译区G20210A 组织因子途径抑制物基因5′非翻译区C399T 凝血酶活性 多态现象
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胰腺占位性病灶细针穿刺活检标本中ppENK和TFPI-2基因甲基化检测的可行性及其应用 被引量:8
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作者 齐灿 黄强 +3 位作者 刘臣海 吕向微 刘振 汪超 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期86-92,共7页
目的检测胰腺组织ppENK和TFPI-2基因甲基化状态,探讨胰腺占位性病灶细针穿刺活检标本中ppENK和TFPI-2基因甲基化检测的可行性及其应用。方法采用重亚硫酸盐测序PCR(BSP)法检测86例胰腺占位性病变组织中ppENK和TFPI-2基因启动子区CPG岛... 目的检测胰腺组织ppENK和TFPI-2基因甲基化状态,探讨胰腺占位性病灶细针穿刺活检标本中ppENK和TFPI-2基因甲基化检测的可行性及其应用。方法采用重亚硫酸盐测序PCR(BSP)法检测86例胰腺占位性病变组织中ppENK和TFPI-2基因启动子区CPG岛的甲基化状态,采用单因素及多因素回归Logistic回归分析ppENK基因和TFPI基因甲基化检测的诊断价值,以及EUS-FNA联合基因甲基化检测在胰腺占位性病变中的诊断意义。结果本研究86例病例中,甲基化成功率为91.9%(79/86),TFPI-2和ppENK基因的甲基化检测率分别为95.9%(75/79)和91.1%(72/79)。肿瘤组与炎症组以及肿瘤组和对照组的甲基化率差异均有统计学意义(P<0.05),而炎症组与对照组甲基化率差异无统计学意义。受试者工作特征曲线结果显示:TFPI-2基因、ppENK基因甲基化水平诊断胰腺癌的敏感度分别为83.6%、74.6%,特异度分别为81.8%、86.4%,诊断率分别为89.7%、81.2%,以TFPI-2基因或ppENK基因甲基化水平诊断胰腺癌的敏感度为92.5%,特异度为79.8%,而以基因TFPI-2和ppENK甲基化水平进行诊断,其敏感度为74.6%,特异度为91.7%。结论TFPI-2和ppENK基因在胰腺肿瘤组织中具有高甲基化水平,且具有良好的敏感性和特异性,是胰腺癌的有利诊断指标,结合EUS-FNA,能够有效提高胰腺占位性病变的术前诊断。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 胰腺癌 前脑啡肤肽基因 组织因子途径抑制物-2基因 甲基化 超声内镜
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基于芯片数据库Oncomine分析CTGF基因在多发性骨髓瘤中的表达和临床意义 被引量:2
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作者 刘洪文 陈锦成 +1 位作者 朱国涛 徐杰 《中国临床新医学》 2019年第7期725-728,共4页
目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因在多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)及正常组织中的表达和临床意义。方法检索Oncomine数据库中所有关于CTGF的数据集,对其在MM中的作用进行Meta分析。结果Oncomin... 目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因在多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)及正常组织中的表达和临床意义。方法检索Oncomine数据库中所有关于CTGF的数据集,对其在MM中的作用进行Meta分析。结果Oncomine数据库中共收集了456项不同肿瘤中关于CTGF的研究,与正常组织相比,其表达差异具有统计学意义的共52项,其中CTGF表达增高28项,表达降低24项。共4项研究中的8个数据集包含379例样本涉及CTGF在MM组织与正常组织中的表达,与正常组织相比,5个数据集中CTGF在癌组织中呈显著高表达(P<0.05),2个数据集中其表达差异无统计学意义(P>0.05),1个数据集中其统计值P=1.000。Meta分析结果显示,CTGF在癌组织与正常组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);进一步分析发现,GTGF表达量与预后无显著关联性(P>0.05)。结论CTGF在正常组织和MM组织中表达无明显差异,不能作为MM的一个潜在的标志物,不能对预后进行预测。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 结缔组织生长因子基因 Oncomine数据库
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TFPI-2基因的表达调控及其在疾病中的作用
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作者 张勤 金红 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第11期1209-1211,共3页
组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)是一种Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂,在动脉粥样硬化、肿瘤浸润转移和血管新生等病理生理过程中发挥重要作用。细胞外信号可通过调节启动子或信号传导通路等多种因素调节TFPI-2基因的表达,其调控机制成为近... 组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)是一种Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂,在动脉粥样硬化、肿瘤浸润转移和血管新生等病理生理过程中发挥重要作用。细胞外信号可通过调节启动子或信号传导通路等多种因素调节TFPI-2基因的表达,其调控机制成为近几年的研究热点之一。 展开更多
关键词 组织因子途径抑制物-2 组织因子途径抑制物-2基因 基因表达调控 动脉粥样硬化 肿瘤
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组织因子途径抑制物-2基因与非小细胞肺癌关系的研究进展 被引量:1
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作者 梁江水(综述) 董永强 殷桂林(审校) 《肿瘤研究与临床》 CAS 2013年第10期714-716,共3页
组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶在内的多种蛋白酶.TFPI-2可通过维持细胞外基质的完整、调节肿瘤血管生成、调控肿瘤细胞凋亡等机制调节非小细胞肺癌的侵袭... 组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶在内的多种蛋白酶.TFPI-2可通过维持细胞外基质的完整、调节肿瘤血管生成、调控肿瘤细胞凋亡等机制调节非小细胞肺癌的侵袭转移,并成为肿瘤基因治疗的新靶点. 展开更多
关键词 非小细胞肺 组织因子途径抑制物-2基因
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Identification of a Novel snoRNA Gene in Arabidopsis thaliana L.
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作者 徐玲 胡娜 +1 位作者 刘仁荣 裘雪梅 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第4期47-49,153,共4页
[ Objective] To identify a novel snoRNA gene in Arabidopsis thalianan. [ Method ] Genome sequence of Arabidopsis thalianan was screened by using bioinformatics methods, and the sequence structure, organization form an... [ Objective] To identify a novel snoRNA gene in Arabidopsis thalianan. [ Method ] Genome sequence of Arabidopsis thalianan was screened by using bioinformatics methods, and the sequence structure, organization form and function of typical candidate gene were analyzed. [ Result] The identified snR95 box H/ACA snoRNA had conservative component and structural features of box C/D snoRNA family, possessed two more than 10 nt long rRNA antisense elements. The result revealed that the novel snoRNA is a partial counterpart of the rice Z270, named box C/D snoRNA -AthZ270. [ Conclusion ] Z270 snoRNA in Arabidopsis thalianan has different function with common snoRNA. 展开更多
关键词 Arabidopsis thalianan SNORNA AthZ270
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Expression of tissue factor in pancreatic adenocarcinoma is associated with activation of coagulation 被引量:9
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作者 Stephan L Haas Ralf Jesnowski +6 位作者 Michael Steiner Frank Hummel Jrg Ringel Christine Burstein Horst Nizze Stefan Liebe J Matthias Lhr 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第30期4843-4849,共7页
AIM: To study expression of tissue factor (TF) in pancreatic cancer and its role in the development of thromboembolism.METHODS: TF expression was studied in eight human pancreatic carcinoma cell lines by Northern ... AIM: To study expression of tissue factor (TF) in pancreatic cancer and its role in the development of thromboembolism.METHODS: TF expression was studied in eight human pancreatic carcinoma cell lines by Northern blot and indirect immunofluorescence. Expression of alternatively spliced TF (asTF) was assessed by RT-PCR. In addition, TF expression was determined by immunofluorescence in pancreatic tissues of 19 patients with pancreatic adenocarcinoma (PCa), 9 patients with chronic pancreatitis (CP) and 20 normal controls. Plasma samples (30 PCa-patients, 13 CP-patients and 20 controls) were investigated for soluble TF levels and coagulation activation markers [thrombin-antithrombin Ⅲ complex (TAT), prothrombin fragment 1 + 2 (F1 + 2)]. RESULTS: All pancreatic carcinoma cell lines expressed TF (8/8) and most of them expressed asTF (6/8). TF expression at the protein level did not correlate with the differentiation of the carcinoma cell line. All but two pancreatic cancer tissue samples stained positive for TF (17/19). In all samples of CP weak staining was restricted to pancreatic duct cells, whereas only a few subendothelial cells were positive in 9/20 of normal controls. TF and TAT levels in PCa patients were significantly elevated compared to controls whereas elevated F1 + 2 levels did not reach statistical significance compared to controls. In CP patients TAT and F1 + 2 levels proved to be significantly elevated compared to controls, although TAT elevation was less pronounced than in PCa patients. CONCLUSION: We conclude that in addition to the upregulated expression of TF on the cell membrane, soluble TF might contribute to activation of the coagulation system in pancreatic cancer. 展开更多
关键词 Coagulation activation Pancreatic carcinoma THROMBOEMBOLISM THROMBOSIS Tissue factor
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Connective tissue growth factor hammerhead ribozyme attenuates human hepatic stellate cell function 被引量:9
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作者 Run-Ping Gao David R Brigstock 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第30期3807-3813,共7页
AIM: To determine the effect of hammerhead ribozyme targeting connective tissue growth factor (CCN2) on human hepatic stellate cell (HSC) function.METHODS: CCN2 hammerhead ribozyme cDNA plus two self-cleaving se... AIM: To determine the effect of hammerhead ribozyme targeting connective tissue growth factor (CCN2) on human hepatic stellate cell (HSC) function.METHODS: CCN2 hammerhead ribozyme cDNA plus two self-cleaving sequences were inserted into pTriEx2 to produce pTriCCN2-Rz. Each vector was individually transfected into cultured LX-2 human HSCs, which were then stimulated by addition of transforming growth factor (TGF)-β1 to the culture medium. Semiquantitative RT-PCR was used to determine mRNA levels for CCN2 or collagen I, while protein levels of each molecule in cell /ysates and conditioned medium were measured by ELISA. Cell-cycle progression of the transfected cells was assessed by flow cytometry.RESULTS: In pTriEx2-transfected LX-2 cells, TGF-β1 treatment caused an increase in the mRNA level for CCN2 or collagen I, and an increase in produced and secreted CCN2 or extracellular collagen I protein levels, pTriCCN2-Rz-transfected LX-2 cells showed decreased basal CCN2 or collagen mRNA levels, as well as produced and secreted CCN2 or collagen I protein. Furthermore, the TGF-β1-induced increase in mRNA or protein for CCN2 or collagen I was inhibited partially in pTriCCN2-Rz-transfected LX-2 cells. Inhibition of CCN2 using hammerhead ribozyme cDNA resulted in fewer of the cells transitioning into S phase.CONCLUSION: Endogenous CCN2 is a mediator of basal or TGF-β1-induced collagen I production in human HSCs and regulates entry of the cells into S phase. 展开更多
关键词 Connective tissue growth factor FIBROSIS Hepatic stellate cell Transforming growth factor-β1
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The expression of Elf-1 and Ki-67 and their correlations in non-small-cell lung cancer 被引量:2
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作者 Lijun Kong Yuan Yu +4 位作者 Hengyun Yu Lisha Zhang Lixia Zhang Xuhan Wang Liqing Kong 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2014年第6期249-253,共5页
Objective: Elf-1 is a member of the proto-oncogenes Ets-related transcription factor family and over-expressed in many human tumors, Ki-67 is an important nuclear antigen associated with cell proliferation. This study... Objective: Elf-1 is a member of the proto-oncogenes Ets-related transcription factor family and over-expressed in many human tumors, Ki-67 is an important nuclear antigen associated with cell proliferation. This study investigated the expression of Elf-1 and Ki-67 in non-small-cell lung cancer(NSCLC) and studied their correlation with the clinicopathological features. Methods: Tissue microarray from 64 cases lung cancer tissue and 10 cases normal lung tissue was constructed, immunohistochemical method was used to evaluate the protein expressions of Elf-1 and Ki-67, correlations of the expression of Elf-1 and Ki-67 to clinicopathological features of NSCLC were analyzed. Results: Expression of Elf-1 and Ki-67 in NSCLC tissues were significantly higher than in normal lung tissues(P < 0.05), the positive rate of Elf-1 and Ki-67 was 73.44% and 64.06% in NSCLC group, Overexpression of Elf-1 in NSCLC was significantly related to histopathological grading, different clinical staging and the intensity of ELF-1 expression was significantly higher in the group with lymph node metastasis than that without(P < 0.05). Overexpression of Ki-67 was also closely related to tumor differentiation, clinical stages and lymph node metastasis(P < 0.05). In addition positive correlation was found between the expressive intensity of Elf-1 and Ki-67(τ = 0.295, P = 0.018). Conclusion: The high expression and positive correlation of Elf-1 and Ki-67 in NSCLC suggest that they probably play a role in onset and progression of lung cancer, united detecting their expression could be used as an valuable molecular biological index for predicting the malignant behavior and early diagnosis of NSCLC. 展开更多
关键词 Elf-l KI-67 IMMUNOHISTOCHEMISTRY correlation non-small-cell lung cancer (NSCLC)
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Prevention of Autoimmune Diabetes by Pentoxifylline is Associated with Target Tissue Modulation of Cytokines and the Expression of Fas-FasL
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作者 刘云峰 章毅 +2 位作者 任如枫 孙辽 张志利 《Journal of Microbiology and Immunology》 2004年第1期56-61,共6页
The effect of Pentoxifylline (PTX) on type 1 diabetes was investigated by means of the studies on the expressions of cytokine mRNA in pancreas and the Fas-FasL on islet cells of NOD mice. NOD mice were treated with PT... The effect of Pentoxifylline (PTX) on type 1 diabetes was investigated by means of the studies on the expressions of cytokine mRNA in pancreas and the Fas-FasL on islet cells of NOD mice. NOD mice were treated with PTX from 4-6?wk, and then from 8-12?wk. After treatment, it was found that the incidence of diabetes in NOD mice at ages of 30?wk was reduced to 25% in group of mice treated with PTX, in comparison to 73.3% in case of mice injected with PBS, and the degree of insulitis in the PTX treated mice was lower than that of the PBS injected mice. RT-PCR analysis revealed down-regulatory effect on the expressions of IFN-γ and TNF-α mRNA in PTX treated mice, but there was no any effect on the expression of IL-10. As to the expression of Fas, there was marked decrease in the mean cytoplasmic integral optical density (IOD) in PTX treated mice, but there was little difference between PTX and PBS groups in the expression of FasL. These results indicated that PTX could prevent the development of diabetes in NOD mice, which might be related to the regulation of Th1/Th2 imbalance and the decreased expression of Fas in islet cells. 展开更多
关键词 PENTOXIFYLLINE DIABETES CYTOKINE FAS-FASL
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