中国人组织因子途径抑制物-2基因的真核表达载体的构建

目的 构建组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）-pcDNA3．1的表达载体，为进一步研究其表达和蛋白功能奠定基础。方法 设计带有BamHⅠ和XhoⅠ的上、下游引物，从TFPI-2-pcDNA2．1克隆载体中扩增TFPI-2基因片段，PCR产物电泳、胶回收。将回收产物与BamHⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA3．1表达载体连接，用酶切鉴定其长度和方向并正、反测序鉴定。结果 TFPL2成功插入pcDNA3．1表达载体，酶切鉴定其长度和方向均正确，测序结果也证实其正确的载人。结论 通过上述方法能成功构建TFPI-2-pcDNA3．1表达载体，为进-步研究其功能奠定基础。

组织因子途径抑制物2对卵巢癌细胞迁徙和浸润能力的影响

背景与目的:组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor-2,TFPI-2)是一种新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶在内的多种蛋白酶,而对尿激酶、组织型纤溶酶原激活剂以及凝血酶没有抑制作用。研究发现在多种肿瘤发生、发展过程中,TFPI-2常表达减少。本研究旨在探讨TFPI-2表达与卵巢癌细胞迁徙、浸润之间的关系。方法:脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞株A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR),Westernblot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2mRNA以及相应蛋白质表达水平;利用Boyden小室检测转染前后卵巢癌细胞穿膜的细胞数,此细胞数作为评价卵巢癌细胞迁徙、浸润能力的指标。结果:转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2mRNA和相应蛋白质的表达;与未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞体外浸润能力显著下降(穿膜细胞数为59.3±6.5vs109.7±5.5,P<0.01);而迁徙能力无明显变化(穿膜细胞数为114.7±8.6vs127.3±7.1,P>0.05)。结论:TFPI-2表达可显著抑制卵巢癌细胞的浸润,为进一步开展肿瘤基因治疗提供实验依据。

组织因子途径抑制物2在胰腺癌中表达的实验研究

目的 组织因子途径抑制物 2 (TFPI- 2 )是一丝氨酸蛋白酶抑制物 ,在维持细胞外基质完整性和调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。分析TFPI- 2和在人类胰腺癌中表达情况 ,探讨TFPI- 2与胰腺癌恶性程度之间的相互关系 ,为临床判断胰腺癌预后及后期的基因治疗奠定基础。方法 采用WesternBlot及RT -PCR方法 ,检测TFPI- 2在 2 0例临床胰腺癌标本及 8例正常胰腺组织中的表达情况 ,HPIAS图像分析仪分析各组标本相对密度 ,t检验各组相对密度差异 ,秩和检验TFPI- 2与胰腺癌恶性程度的相关性。结果 随着胰腺癌恶性程度的加深 ,TFPI- 2表达逐渐下降 ,两者之间存在着显著的负相关性。结论 TFPI- 2与胰腺癌恶性程度之间存在着负相关性 ,可能成为胰腺癌预后的判断指标之一 ,并为基因治疗胰腺癌提供新的方向。

参脉注射液对不稳定型心绞痛的治疗作用及其对组织因子途径抑制物2的影响

目的研究参麦注射液对不稳定型心绞痛治疗疗效并了解其机制。方法入选178例不稳定型心绞痛患者,分为治疗组和对照组,治疗组为常规西药治疗基础上加用参麦注射液,对照组常规西药治疗加极化液注射注射。观察心绞痛症状及心电图缓解情况,并检测治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2的浓度。结果治疗组及对照组基线情况基本相同。治疗组及对照组症状缓解率分别为84.3%和69.7%,心电图好转率分别为74.5%和61.8%,两者比较均差异具有显著(P<0.05)。治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2均有下降,但前后差值治疗组下降明显,两者比较差异具有显著性(P<0.01)。结论在常规西药治疗基础上加用参麦注射液可有效缓解不稳定型心绞痛的发作,参脉注射液对不稳定型心绞痛的治疗作用可能与不稳定型心绞痛患者血浆组织因子途径抑制物2水平变化相关。

宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2表达变化及其与VEGF表达、微血管密度的相关性

目的探讨宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)表达变化,及其与宫颈癌组织血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管密度(MVD)的相关性。方法选取80例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本为宫颈癌组,50例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者CIN组织标本为CIN组,20例正常体检者的正常宫颈组织标本为对照组。采用免疫组化SP法对三组标本行TFPI-2、VEGF、CD34染色,半定量观察TFPI-2、VEGF表达情况,用CD34染色切片测算微血管密度(MVD)。结果宫颈癌组、CIN组、对照组TFPI-2阳性表达率分别为21.25%(17/80)、52.00%(26/50)和85.00%(17/20),宫颈癌组TFPI-2阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组TFPI-2阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组VEGF阳性表达率分别为72.50%(58/80)、42.00%(21/50)和10.00%(2/50),宫颈癌组VEGF阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组VEGF阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组MVD分别为(22±8)、(10±2)、(6±2)条/HP,宫颈癌组MVD与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组MVD与对照组相比,P均<0.05。Spearman等级相关性分析结果显示,宫颈癌组标本TFPI-2和VEGF蛋白表达、MVD均呈负相关(r分别为-0.632、-0.685,P均<0.05)。结论宫颈癌组织中TFPI-2蛋白低表达。宫颈癌组织中TFPI-2表达与VEGF表达和MVD呈负相关。宫颈癌组织中TFPI-2可能通过下调VEGF表达抑制肿瘤新生血管形成。

组织因子途径抑制物2表达抑制卵巢癌细胞浸润能力的实验研究

目的 本研究旨在探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞体外、体内浸润能力的影响。方法 脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo／TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),Western blot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质表达情况;利用Boyden小室比较转染前后卵巢癌细胞穿膜的细胞数,通过接种BALB／c裸鼠,观察转染前后卵巢癌细胞在裸小鼠体内浸润转移范围的变化。结果 转染成功的卵巢癌细胞证实有TF-PI-2 mRNA和相应蛋白质的表达;转染TFPI-2的细胞体外浸润能力显著下降(59.3±6.5 vs 109.7±5.5,P<0.01),在裸小鼠体内浸润范围也明显缩小。结论TFPI-2表达可显著抑制卵巢癌细胞体外、体内的浸润能力,为进一步开展卵巢癌基因治疗提供实验依据。

组织因子途径抑制物-2在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,评价其与肺癌恶性程度的关系。方法:收集非小细胞肺癌石蜡标本、临床资料和临床分期,采用免疫组化法检测TFPI-2蛋白在60例非小细胞肺癌和15例正常肺组织中的表达水平,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:TFPI-2在非小细胞肺癌中的表达指数为60.0%,低于正常肺组织的89.5%。Ⅰ、Ⅱ期及无转移的非小细胞肺癌组织中TFPI-2表达指数(70.9%)及AI值[(9.58±4.52)%]均高于Ⅲ、Ⅳ期[48.3%、(6.36±1.98)%]及有转移的非小细胞肺癌组织[57.1%、(6.10±2.68)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TFPI-2在正常肺组织中的表达水平明显高于非小细胞肺癌组织,TFPI-2可能在诱导非小细胞凋亡中起到重要作用。

组织因子途径抑制物2诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡及其机制研究

目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质表达情况;利用流式细胞仪检测转染前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;通过Western blot技术检测转染前后凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的变化情况。结果转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2 mRNA和相应蛋白质的表达;转染TFPI-2后细胞凋亡率明显增加[(62.32±3.72)%vs(0.56±0.17)%,P<0.01],且Caspase-3、Caspase-9比转染前高表达。结论 TFPI-2可通过增加Caspase-3、Caspase-9的活性,诱导卵巢癌细胞的凋亡,为进一步开展卵巢癌基因治疗提供实验依据。

组织因子途径抑制物-2对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:检测人胰腺癌组织中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测43例胰腺癌及9例正常胰腺组织中TFPI-2及Ki-67蛋白的表达。结果:胰腺癌中TFPI-2的表达低于正常胰腺组织,其表达水平与胰腺癌临床分期及转移有关,于Ⅰ、Ⅱ期及无转移的胰腺癌组织中的表达高于Ⅲ、Ⅳ期及有转移的胰腺癌组织(P<0.05)。其表达水平与胰腺癌细胞增殖活性呈负相关(rs=-0.339,P<0.05)。结论:TFPI-2基因在胰腺癌中呈低表达,能抑制肿瘤细胞的增殖,可能参与了胰腺癌细胞周期的调控。

老年急性冠状动脉综合征早期血浆组织因子及其途径抑制物2的变化规律

目的观察老年急性冠状动脉综合征(ACS)患者在病程早期的血浆组织因子(TF)、基质金属蛋白酶(MMP)-1水平,以及组织因子途径抑制物(TFPI)-2的变化规律,探讨TFPI-2在ACS发病机制及病情监测中的意义。方法连续入选2008年3月—2009年3月在复旦大学附属华山、华东医院住院,年龄≥60岁的患者,根据临床表现、冠状动脉造影检查结果分别入选ACS组及稳定型心绞痛(SAP)组。冠状动脉造影检查正常的老年健康者入选正常组。ACS组分别于入院24h内及发病后2、4周采集外周静脉血,SAP、正常组于入院24h内采集外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验检测血浆TF、TFPI-2及MMP-1水平,计算TF/TFPI-2比值。结果共纳入176例患者,ACS组96例,SAP组50例及正常组30例。各组间年龄,性别构成,高血压、吸烟、糖尿病构成比,低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油水平,他汀类药物及血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂使用率的差异均无统计学意义(P值均>0.05),ACS组的高密度脂蛋白胆固醇、左心室射血分数(LVEF)均显著低于SAP组和正常组(P值均<0.05),而血肌酐(sCr)、超敏C反应蛋白(hsCRP)均显著高于SAP组和正常组(P值均<0.05)。发病24h时,与SAP组和正常组相比,ACS组的TFPI-2水平显著降低(P值均<0.05),而TF、MMP-1水平及TF/TFPI-2比值均显著升高(P值均<0.05)。ACS组中,TF水平随病程的延长而逐步降低(P值均<0.05),TFPI-2水平随病程的延长而先升高,然后降低(P值均<0.05)。Logistic多元回归分析显示,血浆TFPI-2和LVEF下降以及血浆TF、MMP-1和hsCRP水平升高与ACS的发病相关(P值均<0.05)。结论老年ACS患者在病程早期的血浆TFPI-2水平较低,而TF、MMP-1水平较高,提示TFPI-2的分泌不足可能参与ACS的发病。

参麦注射液治疗急性非ST段抬高型心肌梗死及对组织因子途径抑制物-2的影响

目的探讨参麦注射液对急性非ST段抬高型心肌梗死治疗疗效并了解其机制。方法选非ST段抬高型心肌梗死患者170例随机分观察组及对照组各85例,对照组常规西药治疗,观察组在对照组的基础上应用参麦注射液。观察临床症状及心电图缓解情况,并检测治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2的浓度。结果临床治疗效果观察组总有效率90.59%,心电图改善总有效率91.67%高于对照组的76.47%、77.64%。两组治疗前组织因子途径抑制物-2水平无显著性差异(P>0.05);治疗以后观察组(7.79±1.112)ng/mL低于对照组的(8.86±1.29)ng/mL,差值为(2.24±0.78)ng/mL高于对照组的(1.14±0.60)ng/mL(P<0.05)。结论参麦注射液可有效提高急性非ST段抬高型心肌梗死治疗效果及心电图改善,参麦注射液对急性非ST段抬高心肌梗死的治疗作用可能与组织因子途径抑制物-2水平变化相关。

组织因子途径抑制物2的研究进展

组织因子途径抑制物2（TFPI-2）是相对分子质量为32×10^3的基质相关的库尼（Kun itz）型丝氨酸蛋白酶抑制剂。TFPI-2大部分来自细胞外基质中的内皮细胞（60%～90%）。在体内,TFPI-270%～75%与细胞外基质结合。TFPI-2被认为在细胞外基质的降解和重塑中起重要作用。目前来说TFPI-2在生理、病理中的作用还没有准确完整结论,但在许多方面已经有了使人感兴趣的进展,值得进一步的研究。本文对相关的研究予以总结。

组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)在动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用

组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)是一种含Kunitz型结构域的丝氨酸蛋白酶抑制剂,其生理功能和病理作用尚不清楚。由于TFPI-2在抑制恶性肿瘤侵袭转移中的重要作用及肿瘤侵袭转移与动脉粥样硬化斑块不稳定破裂的原因相似,研究者的目光开始转向TFPI-2对斑块稳定性的作用。本文就TFPI-2在动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用作一综述。

角膜基质细胞基质金属蛋白酶1,2活性与组织因子途径抑制物2的效应(英文)

背景:有研究表明,基质金属蛋白酶所参与的细胞外基质降解在角膜新生血管形成过程中起关键作用,组织因子途径抑制物2是新近发现的一种新型的丝氨酸蛋白酶抑制物,能有效抑制基质金属蛋白酶的活性。目的:观察组织因子途径抑制物2对体外角膜基质细胞表达基质金属蛋白酶活性的关系。方法:在体外对兔角膜基质细胞进行原代及传代培养,用脂质体介导的人类组织因子途径抑制物2真核表达载体转染兔角膜基质细胞,G418筛选阳性细胞。结果与结论:RT-PCR,Western blot及明胶酶谱法分析结果显示,转染后角膜基质细胞组织因子途径抑制物2 mRNA和蛋白质的表达均上调(P<0.05),而基质金属蛋白酶1,2的活性下降(P<0.05)。结果提示,组织因子途径抑制物2可明显抑制角膜基质细胞中基质金属蛋白酶1,2的活性。

组织因子途径抑制物-2在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察组织因子途径抑制物(TFPI)-2在正常宫颈、宫颈上皮内肿瘤(CIN)和宫颈鳞癌组织中表达的差异及TFPI-2对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2009~2010年在该院妇产科住院治疗的68例宫颈鳞癌患者,48例CIN患者及12例宫颈正常患者的宫颈组织标本,免疫组化染色检测宫颈组织中TFPI-2的表达。取生长状态良好的宫颈癌Hela细胞,应用基因转染的方法建立TFPI-2高表达细胞系,Real-time PCR和Western印迹方法检测基因转染前后细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测各组细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 1免疫组化染色显示,正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中TFPI-2表达逐渐降低,三者间比较差异有统计学意义(P<0.01)。2体外观察发现,转染pc DNA3.1-TFPI-2的Hela-TFPI-2组细胞TFPI-2 mRNA和蛋白表达明显高于转染空白质粒组和空白对照组(P<0.01);MTT结果显示,Hela-TFPI-2组细胞增殖速度明显低于空白对照组和空白质粒组,且随着培养时间的延长,这种抑制作用更明显(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Hela-TFPI-2组细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白质粒组(P<0.05)。结论 TFPI-2表达随着宫颈病变的进展逐渐降低;同时过表达的TFPI-2可明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖,促进其凋亡。提示TFPI-2的表达减少可能是宫颈癌发生发展的机制之一,TFPI-2可能是治疗宫颈癌的新靶点。

原位转染组织因子途径抑制物2基因抑制兔角膜新生血管形成(英文)

背景：有研究表明，基质金属蛋白酶所参与的细胞外基质降解在角膜新生血管形成过程中起关键作用，组织因子途径抑制物2是新近发现的一种新型的丝氨酸蛋白酶抑制物，能有效抑制基质金属蛋白酶的活性。选用组织通道途径抑制物组织因子途径抑制物2作为治疗基因，是否能对角膜新生血管形成产生影响？目的观察局部转染组织因子途径抑制物2基因对实验兔角膜新生血管形成的影响。设计：随机对照观察。单位：武汉协和医院外科实验室和中山大学附属第三医院中心实验室。材料：本实验于2004—06／2006—03在武汉协和医院外科实验室及中山大学附属第三医院中心实验室完成。选用健康纯种成年新西兰大白兔60只，体质量2、5～3．0kg，雌雄不限。术前经裂隙灯检查均无明显眼前段病变。pBos-Cite-neo，组织因子途径抑制物2质粒（由协和医院血液科仲任博士惠赠），过氧化物酶阻断剂、非免疫性羊血清、鼠抗人MMP-1，2，3单克隆抗体、生物素标记的羊抗鼠IgG二抗（Santacruz公司）。方法：实验干预：硝酸银烧灼法建立各组实验兔兔角膜新生血管模型，随机摸球法将模型兔分为Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组，每组20只，分别结膜下注射生理盐水、空白质粒和真核表达质粒pBos-Cite-neo／组织因子途径抑制物2。实验评估：采用裂隙灯显微镜下观察角膜新生血管生长情况；采用RT-PCR方法检测造模2周后各组实验兔角膜组织组织因子途径抑制物2的表达；采用免疫组织化学测定造模后3，5，7，9，14d角膜组织基质金属蛋白酶蛋白的表达。主要观察指标：①各组实验兔角膜新生血管生长情况。②实验兔角膜组织组织因子途径抑制物2及基质金属蛋白酶的表达情况。结果：纳入实验兔60只均进入结果分析。①角膜新生血管生长情况：Ⅲ组原位转染组织因子途径抑制物2后兔角膜新生血管形成及生长明显受抑制。②角膜组织因子途径抑制物2及基质金属蛋白酶表达：Ⅲ组实验兔角膜组织组织因子途径抑制物2基因表达高于Ⅰ，Ⅱ组（P＜0．01）；Ⅲ组角膜组织MMP-1，2，3表达较Ⅰ，Ⅱ组降低，以MMP-1，3下降显著。结论：质粒pBos-Cite-neo／组织因子途径抑制物2含有组织因子途径抑制物2基因，局部转染后角膜组织表达组织因子途径抑制物2升高，通过抑制基质金属蛋白酶的活性而抑制角膜新生血管生长。

组织因子途径抑制物-2影响人前列腺癌细胞侵袭能力的实验研究

目的:探讨人组织因子途径抑制物2(TFPI2)对基因转染入人前列腺癌细胞株PC3M体外和体内侵袭转移能力的影响。方法:通过Boyden小室体外侵袭转移模型,评价转染成功的PC3MTFPI2细胞和未转染的PC3M迁徙和侵袭能力的强弱;并且分别进行裸鼠接种实验,观察两组间其形成的局部新生物相对体积、组织浸润程度,以及有无远处转移的差异。结果:转染成功的PC3MTFPI2细胞中,证实有TFPI2mRNA和相应蛋白质的表达,转染成功的PC3MTFPI2细胞较未转染的PC3M体外侵袭能力明显下降,接种PC3MTFPI2组细胞的裸鼠较接种未转染的PC3M的裸鼠形成的新生物肌层浸润明显减少。结论:人TFPI2基因真核表达载体成功转染人PC3M并可以在PC3M中得到表达,TFPI2的表达可以抑制PC3M的体外和体内的侵袭能力。

组织因子途径抑制物-2与妇科肿瘤

组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)属于库尼(Kunitz)型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白,是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物。大量研究表明,TFPI-2通过抑制和降解基质金属蛋白酶,抑制肿瘤新生血管生成,抑制TF-FVIIa复合物介导的信号转导途径以及诱导肿瘤细胞凋亡等机制调控某些恶性肿瘤细胞的侵袭和转移。就TFPI-2的分子生物学特点、与恶性肿瘤侵袭转移的关系,及其与妇科肿瘤关系的研究进展综述。

组织因子途径抑制物2对角膜基质细胞表达MMPs的影响

目的:探讨组织因子途径抑制物(TFPI-2)与体外角膜基质细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的关系。方法:体外兔角膜基质细胞原代、传代培养;脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染基质细胞,G418筛选阳性细胞,RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后三组角膜基质细胞(转染TFPI-2基因组K-TFPI-2、转染空载体组K-V、未转染组K-P)中TFPI-2mRNA以及相应蛋白质的表达水平;利用明胶酶谱法分析比较转染前后三组角膜基质细胞表达MMPs的活性差异。结果:K-TFPI-2组角膜基质细胞TFPI-2mRNA和蛋白质的表达较K-P和K-V组显著上调(mRNA:0.79±0.02vs0.51±0.03和0.48±0.02,P=0.000和P=0.000;蛋白质:24.5±0.8vs15.5±0.5和14.9±0.9,P=0.000和P=0.000);与K-P和K-V组相比,K-TFPI-2组细胞表达MMP-1,2的活性下降(MMP-1:12.3±0.7vs16.7±1.2和15.9±0.7,P=0.001和P=0.003;MMP-2:15.4±1.3vs18.2±1.1和17.8±1.1,P=0.027和P=0.046)。结论:TFPI-2表达可明显抑制角膜基质细胞表达MMPs的活性,为进一步开展角膜新生血管性疾病的基因治疗提供实验依据。

组织因子途径抑制物-2影响多发性骨髓瘤血管内皮生长因子表达的研究

目的研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因对多发性骨髓瘤(MM)细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法通过脂质体转染技术将pcDNA3.0/TFPI-2或pcDNA3.0导入多发性骨髓瘤细胞株,分别设为实验组和对照组,用ELISA法测定实验组和对照组上清液中VEGF水平以及骨髓基质细胞(BMSCs)与实验组和对照组细胞共同培养分泌的VEGF蛋白的差异,以实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RQ-PCR)法测定实验组和对照组细胞内VEGF mRNA的表达。结果实验组VEGF、细胞内VEGF mRNA的表达未见明显差异,实验组与骨髓基质细胞共同培养的VEGF水平低于对照组。结论TFPI-2基因可能间接抑制BMSCs产生和分泌VEGF。