外周血干扰素调节因子-8和组织因子途径抑制剂-2甲基化水平可以作为肝细胞癌的早筛和预后存活的预测因子

目的探究外周血干扰素调节因子-8(IRF-8)和组织因子途径抑制剂-2(TFPI-2)甲基化水平对肝细胞癌的预测作用以及与预后的相关性分析研究。方法以58例肝细胞癌患者为实验组,16例体检健康者作为对照组。抽取入组者的清晨血,利用试剂盒检测血清中的IRF-8和TFPI-2的甲基化水平。同时收集患者的临床相关资料,利用Logistic回归分析肝细胞癌的易感因素,随访2年后患者的存活率,比较IRF-8和TFPI-2启动子甲基化水平与预后的关系。结果58例肝细胞癌患者外周血中发现865918个CpG位点中的2180个(0.25%)在肿瘤组织中差异甲基化。与数据库对比,发现干扰素调节因子-8(IRF-8)和组织因子途径抑制剂-2(TFPI-2)启动子甲基化水平变化最大。Logistic回归分析结果显示,年龄,BMI,HBsAg阳性,肝硬化病史,IRF-8甲基化水平和TFPI-2甲基化与肝细胞癌发病密切相关(P<0.05)。外周血中IRF-8启动子甲基化和TFPI-2启动子甲基化情况与年龄、HBsAg阳性、肝硬化、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、卫星灶等呈正相关(P<0.05)。2年随访中存活患者的外周血中IRF-8和TFPI-2甲基化状态与未存活患者比较具差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血中IRF-8和TFPI-2甲基化水平可以作为肝细胞癌患者的早筛和预后的预测因子。

急性冠状动脉综合征患者组织因子途径抑制物基因V264M的多态性

目的探讨在中国人群中组织因子途径抑制物基因第9外显子874G→A(V264M)多态性与急性冠状动脉综合征的关系,以及各基因型对血浆游离组织因子途径抑制物水平和冠状动脉病变严重程度的影响。方法选取经冠状动脉造影检查的136例急性冠状动脉综合征患者和106例健康对照者,用聚合酶链反应和限制片长多态性方法分析组织因子途径抑制物(V264M)基因型。利用酶联免疫吸附试验检测部分患者血浆游离组织因子途径抑制物水平。结果急性冠状动脉综合征组血浆游离组织因子途径抑制物水平明显高于正常组(P<0.05),两组的V264M基因型和等位基因的分布趋势相同,差异无显著性(P>0.05)。A等位基因携带者的游离组织因子途径抑制物水平低于GG基因型者(6.9±5.1比14.3±9.5),而冠状动脉病变程度不受V264M基因多态性的影响(χ2=0.413,P>0.05)。结论中国人群中存在V264M多态性,它对血浆游离组织因子途径抑制物水平可能有影响,但未发现V264M多态性与急性冠状动脉综合征发病存在相关性。

组织因子和组织因子途径抑制物与动脉粥样斑块形成关系的研究进展

动脉粥样硬化的发生与局部血栓形成密切相关,已知组织因子(tissue factor,TF)是血栓形成的起始因子,组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)是TF的生理抑制剂,它有两种同族异形体,TFPI-1和TFPI-2。TFPI-1在抑制血栓形成和血管重塑等方面发挥重要作用;TFPI-2则可能与动脉粥样斑块的稳定性有关。近年来TF和TFPI在动脉粥样硬化发生和发展过程中的作用得到广泛关注,现就此方面的研究进展综述如下。

冠状动脉内药物支架与非药物支架置入对组织因子和组织因子途径抑制物的影响

目的:了解冠状动脉内支架置入对组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)的影响;药物支架(雷帕霉素洗脱支架)和非药物支架对TF和TFPI影响是否存在差别。方法:将53例临床特征相似的急性冠状动脉综合征患者分成置入药物支架组(n=24)和非药物支架组两组(n= 29),测定置入支架前、置入后即刻、24小时后、48小时后血液中TF和TFPI的浓度,比较同组中不同时点TF和TFPI的变化以及药物支架组和非药物支架组对应时点的TF和TFPI的变化。结果:药物支架组和非药物支架组患者在置入支架后TF均显著升高;非药物支架组介入后即刻TFPI升高,以后降低至基线值以下,药物支架组也有类似趋势,但两组间对应时点TF和TFPI差别无统计学意义。结论:在现有的药物治疗基础上,置入药物支架和非药物支架对凝血和抗凝系统的影响类似,并不促进系统高凝状态的发生。

组织因子途径抑制物对兔急性心肌梗死再灌注后无复流的影响

目的研究组织因子途径抑制物(TFPI)对兔心肌梗死再灌注后无复流的影响,探讨TFPI改善心肌梗死再灌注后无复流的作用机制。方法 30只日本大耳白兔随机分为假手术组、盐水对照组和TFPI组。建立兔急性心肌梗死再灌注后无复流模型。用硫黄素S活体染色,观察兔心肌无复流范围;伊文斯蓝、四氮唑红染色,评估兔心肌缺血及梗死范围。免疫组化法检测心肌组织梗死及周围区组织因子(TF)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果心肌梗死再灌注后90min,盐水对照组兔IL-6和TF水平明显高于TFPI组和假手术组(P均<0.05)。各组TNF-α的表达无统计学差异(P>0.05)。TFPI组与盐水对照组结扎区心肌范围相似(P>0.05),但无复流范围及坏死心肌范围明显小于盐水对照组(P<0.05,P<0.01)。结论兔心肌梗死缺血60min再灌注90min可发生无复流现象;TFPI可缩小无复流及坏死范围,其机制可能与抑制血栓形成和炎性反应有关。

不同剂量辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者组织因子和组织因子途径抑制物的影响

目的观察不同剂量的辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者血浆组织因子和组织因子途径抑制物的影响。方法将88例急性冠状动脉综合征患者分为对照组28例、辛伐他汀20 mg组29例和辛伐他汀40 mg组31例,在入院第2天和在平均治疗8天以后清晨空腹采血,用酶联免疫吸附法测定血浆中的组织因子活性和组织因子途径抑制物的水平。结果辛伐他汀治疗的两个组组织因子活性较治疗前明显降低,分别从0.47±0.58 IU/L下降到0.20±0.30 IU/L和从0.59±0.77 IU/L下降到0.36±0.55 IU/L(P<0.05),对照组组织因子活性无变化;辛伐他汀40 mg组组织因子途径抑制物的水平增高,从263±203μg/L增加到369±279μg/L(P<0.05),但其他两组组织因子途径抑制物水平在治疗前后无差异。结论20 mg和40 mg辛伐他汀短期治疗急性冠状动脉综合征患者均能使组织因子活性降低,40 mg辛伐他汀治疗时使组织因子途径抑制物水平增高,提示他汀对组织因子和组织因子途径抑制物的作用可能是其抗栓机理之一。

宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2表达变化及其与VEGF表达、微血管密度的相关性

目的探讨宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)表达变化,及其与宫颈癌组织血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管密度(MVD)的相关性。方法选取80例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本为宫颈癌组,50例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者CIN组织标本为CIN组,20例正常体检者的正常宫颈组织标本为对照组。采用免疫组化SP法对三组标本行TFPI-2、VEGF、CD34染色,半定量观察TFPI-2、VEGF表达情况,用CD34染色切片测算微血管密度(MVD)。结果宫颈癌组、CIN组、对照组TFPI-2阳性表达率分别为21.25%(17/80)、52.00%(26/50)和85.00%(17/20),宫颈癌组TFPI-2阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组TFPI-2阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组VEGF阳性表达率分别为72.50%(58/80)、42.00%(21/50)和10.00%(2/50),宫颈癌组VEGF阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组VEGF阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组MVD分别为(22±8)、(10±2)、(6±2)条/HP,宫颈癌组MVD与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组MVD与对照组相比,P均<0.05。Spearman等级相关性分析结果显示,宫颈癌组标本TFPI-2和VEGF蛋白表达、MVD均呈负相关(r分别为-0.632、-0.685,P均<0.05)。结论宫颈癌组织中TFPI-2蛋白低表达。宫颈癌组织中TFPI-2表达与VEGF表达和MVD呈负相关。宫颈癌组织中TFPI-2可能通过下调VEGF表达抑制肿瘤新生血管形成。

组织因子途径抑制物2对卵巢癌细胞迁徙和浸润能力的影响

背景与目的:组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor-2,TFPI-2)是一种新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制包括纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶在内的多种蛋白酶,而对尿激酶、组织型纤溶酶原激活剂以及凝血酶没有抑制作用。研究发现在多种肿瘤发生、发展过程中,TFPI-2常表达减少。本研究旨在探讨TFPI-2表达与卵巢癌细胞迁徙、浸润之间的关系。方法:脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞株A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR),Westernblot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2mRNA以及相应蛋白质表达水平;利用Boyden小室检测转染前后卵巢癌细胞穿膜的细胞数,此细胞数作为评价卵巢癌细胞迁徙、浸润能力的指标。结果:转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2mRNA和相应蛋白质的表达;与未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞体外浸润能力显著下降(穿膜细胞数为59.3±6.5vs109.7±5.5,P<0.01);而迁徙能力无明显变化(穿膜细胞数为114.7±8.6vs127.3±7.1,P>0.05)。结论:TFPI-2表达可显著抑制卵巢癌细胞的浸润,为进一步开展肿瘤基因治疗提供实验依据。

组织因子途径抑制物2在胰腺癌中表达的实验研究

目的 组织因子途径抑制物 2 (TFPI- 2 )是一丝氨酸蛋白酶抑制物 ,在维持细胞外基质完整性和调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。分析TFPI- 2和在人类胰腺癌中表达情况 ,探讨TFPI- 2与胰腺癌恶性程度之间的相互关系 ,为临床判断胰腺癌预后及后期的基因治疗奠定基础。方法 采用WesternBlot及RT -PCR方法 ,检测TFPI- 2在 2 0例临床胰腺癌标本及 8例正常胰腺组织中的表达情况 ,HPIAS图像分析仪分析各组标本相对密度 ,t检验各组相对密度差异 ,秩和检验TFPI- 2与胰腺癌恶性程度的相关性。结果 随着胰腺癌恶性程度的加深 ,TFPI- 2表达逐渐下降 ,两者之间存在着显著的负相关性。结论 TFPI- 2与胰腺癌恶性程度之间存在着负相关性 ,可能成为胰腺癌预后的判断指标之一 ,并为基因治疗胰腺癌提供新的方向。

急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子、组织因子途径抑制物、因子Ⅶ的检测及临床意义

目的探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义。方法观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子VII等指标。血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子VII(FVII)促凝活性测定采用一期凝固法,FVIIa水平测定采用重组可溶性组织因子法。结果与对照组相比,急性心肌梗死患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原均显著增加(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P>0.05),但FⅦa显著增加(P<0.05);急性脑梗死患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均<0.05),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa显著增加(P均<0.05)。两病例组相比,急性心肌梗死组TF活性、抗原升高更为显著(P均<0.05);急性心肌梗死组TFPI活性、抗原增加,而急性脑梗死组均降低,差异具有显著性意义(P均<0.05);FⅦ:C在急性脑梗死组显著升高(P<0.05),而FⅦa两组差异并无显著性(P>0.05)。结论急性心肌梗死和急性脑梗死患者均存在组织因子途径的启动,血栓形成风险增加,测定上述指标对了解疾病发展趋势具有辅助作用。

组织因子途径抑制物-2在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,评价其与肺癌恶性程度的关系。方法:收集非小细胞肺癌石蜡标本、临床资料和临床分期,采用免疫组化法检测TFPI-2蛋白在60例非小细胞肺癌和15例正常肺组织中的表达水平,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:TFPI-2在非小细胞肺癌中的表达指数为60.0%,低于正常肺组织的89.5%。Ⅰ、Ⅱ期及无转移的非小细胞肺癌组织中TFPI-2表达指数(70.9%)及AI值[(9.58±4.52)%]均高于Ⅲ、Ⅳ期[48.3%、(6.36±1.98)%]及有转移的非小细胞肺癌组织[57.1%、(6.10±2.68)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TFPI-2在正常肺组织中的表达水平明显高于非小细胞肺癌组织,TFPI-2可能在诱导非小细胞凋亡中起到重要作用。

参脉注射液对不稳定型心绞痛的治疗作用及其对组织因子途径抑制物2的影响

目的研究参麦注射液对不稳定型心绞痛治疗疗效并了解其机制。方法入选178例不稳定型心绞痛患者,分为治疗组和对照组,治疗组为常规西药治疗基础上加用参麦注射液,对照组常规西药治疗加极化液注射注射。观察心绞痛症状及心电图缓解情况,并检测治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2的浓度。结果治疗组及对照组基线情况基本相同。治疗组及对照组症状缓解率分别为84.3%和69.7%,心电图好转率分别为74.5%和61.8%,两者比较均差异具有显著(P<0.05)。治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2均有下降,但前后差值治疗组下降明显,两者比较差异具有显著性(P<0.01)。结论在常规西药治疗基础上加用参麦注射液可有效缓解不稳定型心绞痛的发作,参脉注射液对不稳定型心绞痛的治疗作用可能与不稳定型心绞痛患者血浆组织因子途径抑制物2水平变化相关。

心肺复苏后血浆组织因子和组织因子途径抑制物的变化及银杏达莫的干预研究

目的探讨大鼠心肺复苏后血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)含量改变以及银杏达莫干预后对其影响。方法成年雄性SD大鼠120只,随机分为对照组(A组)、复苏组(B组)、银杏达莫组(8 mL/kg)(C组),再分别按气管切开后(对照组)或自主循环恢复(ROSC)后(复苏组和银杏达莫组)0.5、3、6、9和24 h分为五个亚组,每组8只。建立窒息型大鼠心肺复苏模型,分别于各时间点取血,使用ELISA法测定各组大鼠血浆中TF和TFPI的含量。结果B组心肺复苏后各时间点血浆TF较A组显著升高(P<0.01),9 h达到峰值;C组心肺复苏后各时间点血浆TF含量较A组显著升高(P<0.01),较B组分别在6、9、24 h显著下降(P<0.01)。B组各时间点TFPI含量较A组均无显著变化(P>0.05),C组24 h TFPI较A组升高(P<0.05)。结论心肺复苏后血浆TF含量显著升高,但同期TFPI并无明显变化,存在明显的凝血和抗凝作用失衡;银杏达莫注射液可降低心肺复苏后血浆TF含量,提高TFPI含量,恢复凝血和抗凝的平衡。

瑞舒伐他汀对内皮细胞中组织因子途径抑制物表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对组织因子途径抑制物(TF-PI)表达的调节作用及机制。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),给予多种剂量的瑞舒伐他汀和(或)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)抑制剂与激活剂处理细胞,利用实时定量PCR、Western blot技术检测内皮细胞中TFPI表达的变化。结果 TNF-α下调内皮细胞中TFPI的的表达水平,而这一作用被瑞舒伐他汀所阻断。而且,瑞舒伐他汀呈时间及剂量依赖性上调TFPI的mRNA与蛋白水平。AMPK抑制剂———Compoud C则可逆转瑞舒伐他汀对TFPI表达的上调作用,而AMPK激动剂———Aicar则具有与瑞舒伐他汀相似的上调TFPI的作用。结论瑞舒伐他汀通过激活AMPK途径上调血管内皮细胞中TFPI的表达。

外源性硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导组织因子和组织因子途径抑制物表达的影响

目的研究外源性硫化氢对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)表达的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分别以不同浓度NaHS(25、50、100及200μmol/L)和50 mg/L ox-LDL共孵育,RT-PCR和ELISA分别检测TF和TFPI mRNA表达和蛋白含量。结果用50mg/L ox-LDL孵育HUVEC 24 h后,TF mRNA表达上调8倍,蛋白含量增加7倍(P<0.01);而TFPI mRNA表达降低73%,蛋白含量减少65%(P<0.01)。用25、50、100及200μmol/L NaHS预孵育HUVEC 1 h,再与ox-LDL共同孵育,与ox-LDL组相比,加入不同浓度NaHS组TF mRNA分别降低12%、31%、63%和80%(P<0.05),蛋白含量分别降低13%、30%、62%和77%;TFPI mRNA表达分别升高0.6、1.2、2.0和2.6倍,蛋白含量分别升高0.3、0.7、1.1和1.6倍。结论 NaHS能抑制ox-LDL对内皮细胞TF表达的诱导作用,减轻ox-LDL对内皮细胞TFPI表达的抑制作用。

人组织因子途径抑制因子基因转染对移植静脉新生内膜的影响

目的为减少冠状动脉旁路移植术后移植静脉再狭窄,探讨人组织因子途径抑制因子(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因转染对移植静脉内膜增生的影响。方法构建真核表达质粒pCMV-(Kozak)TFPI。将48只日本大耳白兔随机分为3组,每组16只,即TFPI转染组、空载体对照组和空白对照组。建立颈总动脉旁路移植模型。吻合前,TFPI转染组移植静脉内采用阳离子脂质体pCMV-(Kozak)TFPI(400μg)和腔内加压灌注法(30min)转染,空载体对照组以空质粒pCMV(400μg)代替pCMV-(Kozak)TFPI,空白对照组不予干预。术后3d,用RT-PCR、Western-blot和免疫组织化学法检测外源基因在移植静脉中的表达。术后30d,血管多普勒测量移植静脉管腔内径和管壁厚度;组织病理标本测量内膜面积和中膜面积,并计算其比值;透射电镜观察移植静脉新生内膜的细胞构成。结果TFPI转染组移植静脉中有人TFPI基因mRNA和蛋白表达,两对照组未见表达。TFPI转染组移植静脉管腔内径为(2.68±0.32) mm,大于空载体对照组(2.41±0.23)mm和空白对照组(2.38±0.21)mm,差异均有统计学意义(P<0.05)。TFPI转染组管壁厚度为(1.09±0.11) mm,小于空载体对照组(1.28±0.16)mm和空白对照组(1.34±0.14)mm,差异均有统计学意义(P<0.01)。TFPI转染组移植静脉内膜面积和内膜、中膜面积比值分别为(0.62±0.05)mm2及0.51±0.08,均小于两对照组的(0.70±0.05) mm2、0.58±0.06及(0.72±0.04) mm2、0.59±0.08(P<0.05);中膜面积各组差异无统计学意义(P>0.05)。透射电镜观察,TFPI转染组移植静脉内膜未见平滑肌细胞,两对照组均见平滑肌细胞。结论人TFPI基因转染减少移植静脉内膜增生。

组织因子途径抑制物基因转移对血管平滑肌细胞迁移的影响

目的研究组织因子途径抑制物基因转移对兔血管平滑肌细胞迁移的影响,探讨其抑制再狭窄的机制。方法将含有人组织因子途径抑制物基因的重组腺病毒和含β-半乳糖苷酶基因的重组腺病毒在体外分别转染兔血管平滑肌细胞,用X-gal染色法检测腺病毒的转染率,用逆转录聚合酶链反应方法检测转染后平滑肌细胞中组织因子途径抑制物mRNA的表达,于第13、、5及7天用玻片法检测血管平滑肌细胞迁移距离。结果感染指数为100,腺病毒的转染率可达到95%;基因转移后3天在血管平滑肌细胞中检测到组织因子途径抑制物mRNA的表达;同一浓度下转染组织因子途径抑制物基因重组腺病毒组和对照组相比迁移距离显著减少(P<0.001),并具有浓度依赖性。结论腺病毒具有较高的转染培养的血管平滑肌细胞的能力,组织因子途径抑制物基因转移能够显著抑制体外培养的兔血管平滑肌细胞迁移,并且这种抑制作用具有浓度依赖性。

胎盘早剥产妇、新生儿血及脐血中组织因子和组织因子途径抑制物的变化

目的:检测胎盘早剥产妇血、新生儿血及脐血组织因子及组织因子途径抑制物蛋白的变化,以及这些变化对其凝血功能的影响。方法:收集2006-10/2007-04在中山大学附属第一医院产科的胎盘早剥产妇血(足月或早产不限)、分娩胎儿的脐带血及新生儿血标本各11例,4例为足月产,其余均为胎龄29～36周早产标本,男婴5份,女婴6份。正常对照15份来自同期广州市妇婴医院产妇及分娩胎儿。标本收集时间母亲血为分娩前24h内、脐血为分娩即刻、新生儿血为出生后2h内抽取,排除标准为产妇本次分娩前无血液系统疾病史,未使用过对凝血功能产生影响的药物,采用酶联免疫吸附方法测定血浆组织因子及组织因子途径抑制物抗原水平,并与正常分娩产妇对照组进行比较。病理及正常标本均经产妇及家属知情同意后获得。结果:①胎盘早剥产妇血、新生儿血及脐血血浆中组织因子测定值明显高于正常对照组(P<0.05)。②胎盘早剥产妇血、新生儿血浆及脐血中组织因子途径抑制物测定值较正常分娩产妇降低,差异具有显著性意义(P<0.01)。③胎盘早剥产妇血、新生儿和脐血组织因子途径抑制物/组织因子比值均较正常分娩产妇明显降低(P<0.01)。结论:胎盘早剥时产妇血、脐血及新生儿血促凝血活性增强,抗凝血活性降低,与其高凝状态相关。

α1-抗胰蛋白酶和组织因子途径抑制物基因多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系

目的:探讨α1-抗胰蛋白酶(α1-antitypsin,α1-AT)基因第5外显子和组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因T287C多态性的交互作用及其与大肠癌侵袭和转移的关系。方法:选择河南省新乡医学院第一附属医院2011年7月至2015年7月期间收治的经病理学确诊的大肠癌TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者各180例,以180例TNM 0期患者作为对照组,用PCR-RFLP技术检测各组患者外周血白细胞两基因的多态性,以Hardy-Weinberg平衡检验分析样本的群体代表性,以Khoury和Wagener模型分析两基因多态性的交互作用。ELISA法检测患者血清α1-AT和TFPI蛋白表达,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测α1-AT和TFPI对人结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blotting检测SW480细胞胰蛋白酶、组织因子(tissue factor,TF)和蛋白酶激活受体-2(protease-actieated receptor 2,PAR-2)表达水平。结果:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型者大肠癌侵袭与转移的风险均显著增加,且在α1-AT(MZ)和TFPI(TC)之间、α1-AT(MZ)和TFPI(CC)之间、α1-AT(ZZ)和TFPI(TC)及α1-AT(ZZ)和TFPI(CC)之间均存在正向交互作用(均γ>1)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于0期组,且Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者之间血清α1-AT(或TFPI)表达也有明显差异(P<0.01)。同一组携带突变基因型个体的血清α1-AT(或TFPI)表达明显低于携带野生型个体(P<0.01)。体外细胞培养实验显示,α1-AT可明显抑制SW480细胞胰蛋白酶的表达,而TFPI则明显抑制TF表达,而两者均可明显降低细胞PAR-2的表达及细胞迁移和侵袭能力。结论:α1-AT(MZ)、α1-AT(ZZ)、TFPI(TC)和TFPI(CC)基因型均是大肠癌侵袭与转移的高危因素,基因多态性的交互作用增加了大肠癌侵袭与转移的风险。

急性冠脉综合征患者组织因子、组织因子途径抑制物、肿瘤坏死因子-α的变化及其相关性

目的观察急性冠脉综合征(ACS)患者组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与TF活性的变化,分析它们之间的相关性,探讨凝血与炎症在冠心病病程中的临床意义。方法选择ACS组患者36例,稳定性心绞痛(SAP)组患者32例,正常对照组28例,采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA法)测定血浆TF、TFPI水平,放射免疫分析法测定血清TNF-α水平,采用发色底物法测定TF活性。结果ACS组TF、TFPI、TNF-α水平及TF活性均显著高于SAP组与正常对照组(P<0.01),SAP组TF、TFPI水平与TF活性也显著高于正常对照组(P<0.01),但TNF-α在两组之间无显著性差异(P>0.05),ACS组患者血浆TF活性与血浆TFPI水平显著正相关(γ=0.524,P<0.01),血浆TF活性与血清TNF-α水平显著正相关(γ=0.462,P<0.01)。结论TF、TFPI、TNF-α水平及TF活性在ACS中可作为反映凝血异常和炎症状态的指标之一。