组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型

肺癌对人类的健康构成了严重的威胁,人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立对于肺癌的研究是一项重要的工具.建立肺癌移植瘤模型的方法主要有细胞培养移植法、组织块移植法和匀浆液移植法.组织块移植法建立的模型能最大限度地模拟人体内环境,是一种理想的模型.就组织块移植法建模的操作方法及当前研究进展作一综述.

细胞注射法及组织块移植法在构建异位妊娠动物模型比较

目的：比较滋养细胞悬液注射法与绒毛组织块移植法在异位妊娠动物模型中的可行性。方法：收集新鲜宫内妊娠绒毛标本30例,其中20例培养成滋养层细胞,并将传代细胞分别植入BALB/c裸鼠腹部皮下（A组）、腹壁下（B组）、宫角（C组）;另外10例绒毛组织块分别植入裸鼠盆腔内（D组）,每组6只。观察种植后第7天、第15天肿块大小的变化;第7天,各组随机选取2只成瘤裸鼠处死,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测;第15天处死全部裸鼠,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测。结果：第7天：（1）瘤体观察：A组有2只裸鼠未见瘤体形成;B组有1只未见瘤体形成;C组全部未见瘤体形成;D组全部见瘤体,组织块瘤体与机体部分融合。（2）形态学检测：A组：皮下囊肿,包膜完整,内部可见移植的细胞;B组：皮下可见移植的细胞;C组：未见种植细胞;D组：边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。（3）免疫组化：A组：CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;B组：CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组：未见种植细胞;D组：CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。第15天：（1）瘤体观察：A组：有2只分别在第8天、第10天死亡,剩余2只,未见瘤体形成;B组：有1只在第8天死亡,剩余3只,有1只未见瘤体形成,另2只瘤体较前增大;C组：剩余4只,全部未见瘤体形成;D组：剩余4只,全部见瘤体,组织块瘤体增大明显;（2）形态学检测：A组：未见移植的细胞;B组：皮下可见移植的细胞;C组：未见种植细胞;D组：边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰;（3）免疫组化：A组：未见种植细胞;B组：CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组：未见种植细胞;D组：CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。结论：细胞注射法难以建立可靠、稳定的异位妊娠动物模型;组织块移植法可以建立较可靠的动物模型。

第二趾多组织块移植修复多指复合组织缺损

目的探讨将第二趾分离为多块游离组织,修复多个手指复合组织缺损的新方法。方法 18例多手指复合组织缺损患者,根据损伤手指指体皮肤、骨关节、肌腱、血管的缺损情况,将第二趾分离为多块游离复合组织,采用多种血管吻合组织移植等方法重建血液循环,再造与修复多个手指。结果 18例中17例再造指完全成活,1例部分成活。随访1～5年,以末节再造指外形及功能恢复最好;第二趾拇侧嵌入趾腓侧皮瓣者,外形更接近手指;中节或指间关节毁损者再造指多数有不同程度的关节僵直。结论选用第二趾分离为多组织块进行移植(或桥接)再造可最大限度恢复手部功能并修复多个手指,此方法具有手术创伤小,一趾多用的优点,并减少患者多次手术的痛苦、节省医疗费用,减少供区损伤。

细胞注射法和组织块移植法在构建血管瘤动物模型中的比较

目的比较原代细胞注射法和组织块植入法在血管瘤动物模型建立中的可行性。方法收集新鲜增殖期婴幼儿血管瘤标本,取50%组织块植入12只BALB/c裸鼠双侧腋下为组织块组,另外50%组织块培养血管瘤内皮细胞,并将传代细胞植入12只BALB/c裸鼠双侧腋下为细胞组,观察不同生长时期瘤体变化,观察至第7、30、60天分别切取移植瘤组织,HE染色并进行病理学检查。结果第7天,细胞组瘤体小,质软,镜下细胞增殖旺盛,有少量血管生成。组织块组瘤体与机体融合,质软,镜下有大量小血管;第30天,细胞组瘤体体积变大,质稍硬,镜下细胞继续增殖,大量血管生成。组织块组瘤体体积未变化,质硬,有大量的炎细胞,仅残存少量血管;第60天,细胞组瘤体变小,质硬,镜下血管开始萎缩、减少。组织块组瘤体变小,质软,镜下大部分已脂肪化,仅血管周围有少量移植物残留。结论组织块移植法难以建立可靠、稳定的血管瘤模型;原代血管瘤内皮细胞裸鼠皮下注射可以建立可靠的血管瘤模型。

儿童型创伤性脾破裂脾切除并脾组织块大网膜移植术疗效观察

研究临床儿童创伤性脾破裂脾切除术后脾组织块移植对机体恢复的帮助。方法 我院在2013 年5 月至2016 年8月临床随机遇到的10 例未成年人脾破裂患者行全脾切除术后加做脾组织块自体移植术的患者,相比于其他未行脾移植术的患者。结果 本组10 例患儿,行全脾切除同时加做健康脾组织块大网膜移植术,术后只出现短暂的血小板增高,但是仅仅三周后就开始下降恢复正常,治疗期间无迁延发热、无爆发性感染、无血管内血栓形成等并发症。术后复查脾脏移植成活率100%。结论 考虑脾脏在机体不可替代的功用,对于低龄组创伤性脾破裂患者手术治疗时应尽可能行保脾手术,如果不得已需切除全脾脏,建议行健康脾组织块自体大网膜移植术。

移植性人骨肉瘤OS-732裸鼠模型的建立

目的建立移植性人骨肉瘤裸鼠模型,为骨肉瘤的提供研究实验模型。方法采取皮下细胞悬液注射法与组织块植入接种法,建立人骨肉瘤裸鼠模型。人成骨肉瘤OS-732细胞株体外传代培养后,将1×107细胞悬液注入裸鼠腋后皮下(10只裸鼠),或将已成瘤的瘤组织块接种于裸鼠腋后皮下(10只裸鼠),观察肿瘤生长情况。接种后4周处死裸鼠,剥瘤称重,行病理鉴定。比较两种方法的成瘤率、终末瘤体积及瘤重、肿瘤相对增长率;大体观及病理组织学。结果两组裸鼠接种2周后均有局部肿瘤形成,细胞悬液组成瘤率70%,组织块组成瘤率100%,两组成瘤率差异无显著性(P>0.05);两组终末瘤体积及瘤重差异具有显著性(均P<0.05)。细胞悬液组相对增长率高于组织块组,接种后第16天开始两组肿瘤增长率具有显著性差异(P<0.05)。病理组织学鉴定符合骨肉瘤镜下特点。结论成功建立了移植性人骨肉瘤裸鼠模型,为临床研究提供了可靠方法。

首例人胚腺垂体培养细胞移植术患儿的护理

垂体移植的研究国外开展已久,但目前尚停留在实验室阶段,国内有垂体组织块移植的报道,而人胚腺垂体培养细胞悬液优于垂体组织块移植,容易解决移植物的来源,可准确掌握移植细胞的数量,利于减轻排斥反应,提高移植物成活率。我科于1994年3月30日为1例15岁垂体侏儒患儿成功地施行了国内外首例人胚腺垂体培养细胞移植术。术后加强观察,正确应用免疫抑制剂预防排斥反应,抗感染,是保证手术成功、提高疗效的重要环节。现将护理体会报告如下。

两种建立人睑板腺癌动物模型的方法比较

目的研究建立人睑板腺癌动物模型的方法,对比不同的方法对成瘤率的影响,为睑板腺癌的体内实验提供平台。方法分别采用细胞悬液法和组织块移植法接种人睑板腺癌于BALB/C裸鼠体内,细胞悬液组和组织块组各接种裸鼠30只。观察两组移植瘤的成瘤率及生物学特性。结果细胞悬液组成瘤率为20%,组织块组为46.7%。结论组织块法较细胞悬液法成瘤率高,与原发肿瘤生物相似度接近,组织块移植法是建立人睑板腺癌动物模型的理想方法。