血清金属蛋白酶组织抑制剂3和性别决定区Y框蛋白2在2型糖尿病肾损伤早期诊断中的临床应用

目的探究血清金属蛋白酶组织抑制剂3(tissue inhibitors of metalloproteinases 3,TIMP3)和性别决定区Y框蛋白2(transcription factor determining region Y box protein 2,SOX2)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)肾损伤的早期诊断。方法选取2022年4月至2023年4月在华北石油管理局总医院就诊的102例T2DM患者为研究对象,根据24 h尿蛋白排泄率(uri-nary albumin excretion rate,UAER)将T2DM患者分为肾损伤组(n=40)和无肾损伤组(n=62),另选取同期在华北石油管理局总医院行体检的健康者50名为对照组。酶联免疫吸附法测定所有受试者血清TIMP3、SOX2水平;比较3组受试者一般资料、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、UAER、血肌酐(serum creatinine,Scr)、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血清TIMP3、SOX2水平;Pearson相关性分析血清TIMP3与SOX2及两者与HbA1c、UAER、Scr、eGFR之间的关系;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清TIMP3、SOX2对T2DM患者肾损伤的诊断价值。结果T2DM患者血清TIMP3[(0.68±0.17)μg/L比(1.35±0.35)μg/L]及eGFR[(105.99±20.56)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))比(133.15±26.18)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]显著低于对照组(P<0.05),且肾损伤患者血清TIMP3[(0.47±0.11)μg/L比(0.82±0.21)^(-1)μg/L]及eGFR[(74.69±10.22)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))比(126.18±27.23)mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]显著低于无肾损伤患者(P<0.05);血清SOX2[(8.91±1.82)kU/L比(5.15±1.31)kU/L]及HbA1c[(8.80±1.55)%比(5.52±0.83)%]、UAER[(70.13±18.06)mg/24 h比(13.22±3.61)mg/24 h]、Scr[(82.14±15.23)µmol/L比(53.19±5.62)µmol/L]显著高于对照组(P<0.05),且肾损伤患者血清SOX2[(10.81±2.13)kU/L比(5.15±1.31)kU/L]及UAER[(156.83±40.29)mg/24 h比(13.22±3.61)mg/24 h]、Scr[(113.77±13.58)µmol/L比(53.19±5.62)µmol/L]显著高于无肾损伤患者(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,TIMP3与UAER、Scr、HbA1c呈显著负相关(P<0.05),与eGFR呈显著正相关(P<0.05);SOX2与UAER、Scr、HbA1c呈显著正相关(P<0.05),与eGFR呈显著负相关(P<0.05);血清TIMP3与SOX2呈显著负相关(r=-0.590,P<0.05)。ROC结果显示,血清TIMP3联合SOX2诊断T2DM患者肾损伤的敏感度和特异度分别为95.0%、85.3%,显著高于TIMP3、SOX2单独测定。结论T2DM肾损伤患者血清TIMP3水平显著降低,SOX2水平显著升高,且两者与T2DM患者肾损伤密切相关,可用于T2DM患者肾损伤早期诊断。

尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7与金属蛋白酶组织抑制剂-2在脓毒症急性肾损伤中的应用价值

目的分析尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)和金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在脓毒症急性肾损伤(AKI)中的早期预测价值。方法选取2020年1月—2021年12月山西省人民医院急诊科监护室收治的脓毒症患者58例,并根据KDIGO的诊断标准分成脓毒症AKI组22例和非AKI组36例。分别在入组后0 h、24 h、48 h、72 h采集患者尿液及血液标本,并检测血肌酐(SCr)与尿IGFBP-7、TIMP-2水平。分析SCr、尿IGFBP-7、TIMP-2与脓毒症AKI的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析SCr、尿IGFBP-7及TIMP-2在脓毒症早期急性肾损伤中的诊断价值。结果与非AKI组比较,AKI组各时点SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2水平均升高,差异具有统计学意义(F/P=147.848/<0.001、330.849/<0.001、136.777/<0.001)。SCr与尿IGFBP-7、尿TIMP-2均呈正相关(r/P=0.680/<0.001,0.392/0.002),尿IGFBP-7与尿TIMP-2呈正相关(r/P=0.618/<0.001)。ROC曲线分析显示,SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2及尿IGFBP-7联合TIMP-2预测脓毒症AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.586、0.907、0.738、0.914,尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于SCr(Z/P=4.117/<0.001,4.196/<0.001);尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于尿TIMP-2(Z/P=2.663/0.008,3.378/0.008)。结论尿IGFBP-7、尿TIMP-2与尿IGFBP-7联合TIMP-2均可以作为早期预测脓毒症急性肾损伤发生的指标,且尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2的预测价值优于尿TIMP-2。

芪叶保肝饮对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者血清基质金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制剂-2的影响

目的探讨在西医治疗基础上联合芪叶保肝饮对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者的治疗效果以及对血清基质金属蛋白酶(MMP)-2和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-2的影响。方法根据随机数字表,将70例慢性乙型肝炎早期肝硬化患者随机分两组,每组35例。两组患者均进行常规西医治疗,口服恩替卡韦抗病毒治疗,观察组则在此基础上联合芪叶保肝饮治疗,3个月为1个疗程,连续服用2个疗程。观察临床治疗效果,并检测肝纤维化指标和血清MMP-2、TIMP-2的变化。结果观察组和对照组总有效率分别为91.4%(32/35)和71.4%(25/35),两组差异显著(P<0.05);治疗前,血清肝纤维化指标比较两组间无统计学差异(P>0.05);治疗后,两组肝纤维化指标均好转(P<0.05),观察组优于对照组(P<0.05);治疗前,两组血清MMP-2和TIMP-2水平无统计学差异,治疗后,观察组MMP-2水平较治疗前降低,并且低于对照组(P<0.05);TIMP-2水平较治疗前升高,并且高于对照组(P<0.05)。结论西医治疗基础上联合芪叶保肝饮有效抗病毒的同时,可抑制肝纤维化过程,并且可对MMP-2、TIMP-2水平有一定调节作用。

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1与2型糖尿病亚临床大血管病变的相关性

糖尿病大血管病变的本质是动脉粥样硬化（AS），AS的形成过程也是细胞外基质（ECM）重构的过程。基质金属蛋白酶（MMP）-9对ECM有极强的降解作用，而基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1是MMP-9的特异抑制物，调节MMP-9的活性。本研究联合检测2型糖尿病中尚无临床表现的亚临床大血管病变患者的血清MMP-9及TIMP-1水平，以期找到能尽早反映糖尿病相关血管活性异常的标志物，从而采取干预措施。

2型糖尿病患者血清基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶2组织抑制剂及超敏C反应蛋白与大血管病变的关系研究

目的探讨血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶2组织抑制剂(TIMP-2)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)与2型糖尿病(T2DM)患者大血管病变的关系。方法选取2010年9月—2011年4月在我科住院的T2DM患者60例,根据颈动脉内膜中层厚度(CIMT)将患者分为无CIMT增厚组(CIMT≤0.9 mm)和CIMT增厚组(CIMT>0.9 mm),各30例。另选取同期在本院体检中心体检的健康者30例为对照组。采用酶联免疫吸附法测定3组受检者血清MMP-2、TIMP-2水平,采用全自动生化分析仪测定血清hs-CRP水平,比较3组受检者这3个指标的差异,并将这3个指标与临床及生化指标进行Pearson相关分析和多元逐步线性回归分析。结果 (1)对照组、无CIMT增厚组、CIMT增厚组血清MMP-2〔分别为(547±130)、(986±104)和(1 346±204)μg/L〕、TIMP-2〔分别为(67.3±9.4)、(87.2±6.5)和(102.6±14.5)μg/L〕、hs-CRP水平〔分别为(0.92±0.28)、(2.72±1.12)、(4.29±2.59)mg/L〕比较,差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。(2)相关分析显示,血清MMP-2、TIMP-2及hs-CRP均与收缩压、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)呈正相关(P<0.05),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关(P<0.01);此外,血清MMP-2还与三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)、TIMP-2、hs-CRP呈正相关(P<0.05),血清TIMP-2还与舒张压、TG、hs-CRP呈正相关(P<0.05),hs-CRP还与FPG呈正相关(P<0.01)。回归分析显示,TIMP-2、hs-CRP是影响MMP-2的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.829和0.166,P均<0.05);MMP-2、舒张压是影响TIMP-2的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.904和0.147,P均<0.05);MMP-2、收缩压是影响hs-CRP的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.488和0.317,P均<0.05)。结论 T2DM患者血清MMP-2、TIMP-2、hs-CRP水平较健康者显著升高,尤其是T2DM合并大血管病变的患者;MMP-2和TIMP-2可能与炎症密切相关;检测血清MMP-2、TIMP-2及hs-CRP水平,对监测T2DM大血管病变的发生、发展有重要的临床意义。

血浆基质金属蛋白酶2和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平变化与急性冠状动脉综合征的关系

目的探讨不同类型冠心病患者基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平及其比值变化,分析其在急性冠状动脉综合征中的临床意义。方法经冠状动脉造影的118例心内科住院患者,依据其临床表现和冠状动脉造影结果分组:急性冠状动脉综合征患者49例,其中包括不稳定型心绞痛患者30例、急性心肌梗死患者19例;非急性冠状动脉综合征冠心病患者44例,包括稳定型心绞痛患者23例、冠状动脉慢性完全闭塞患者21例;25例冠状动脉正常患者为对照组。采用夹心酶联免疫吸附法检测动脉血浆基质金属蛋白酶2和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平。结果急性冠状动脉综合征和非急性冠状动脉综合征患者血浆基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平均明显高于对照组(P<0.05),且基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2比值均显著高于对照组(P<0.01);与非急性冠状动脉综合征患者比较,急性冠状动脉综合征患者基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平及基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2比值均显著增高(P<0.05和P<0.01);与对照组比较,不稳定型心绞痛组、急性心肌梗死组和冠状动脉慢性完全闭塞组基质金属蛋白酶2水平明显增高(P<0.05和P<0.01),不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛组和冠状动脉慢性完全闭塞组组织型基质金属蛋白酶抑制剂2显著增高(P<0.05和P<0.01)。结论动脉粥样硬化斑块的演变与血基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2水平及基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2比值变化和失衡密切相关,基质金属蛋白酶2水平和基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2比值显著升高提示动脉粥样硬化斑块的不稳定性,有可能作为急性冠状动脉综合征病情严重程度的有效预测指标之一。

社区获得性肺炎患者血清和肺泡灌洗液基质金属蛋白酶-2、-29和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1检测

目的:通过检测社区获得性肺炎(CAP)患者血清和肺泡灌洗液(BALF)的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的水平,探讨它们在CAP发病中的可能机制。方法:60例CAP患者分为2组:重症CAP组20例;普通CAP组40例,其中20例收集BALF,所有患者均收集血清。健康志愿者26例为对照组,收集血清和BALF。用ELISA法检测血清及BALF中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的水平,同时进行CAP组患者外周血中性粒细胞计数。结果:①CAP组血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1水平均高于对照组(t值分别为4.874、9.961和4.500,P均<0.001)。②CAP组BALFMMP-2和MMP-9水平高于对照组(t值分别为4.513和8.165,P均<0.001),而2组TIMP-1差异无统计学意义(t=1.717,P=0.093)。③重症CAP组血清MMP-2及MMP-9水平高于普通CAP组(t=3.995,P=0.002;t=3.539,P=0.008),而2组的TIMP-1差异无统计学意义(t=0.759,P=0.080)。④CAP组血清MMP-9水平与外周血中性粒细胞计数呈正相关(r=0.855,P<0.001)。结论:MMP-2、MMP-9和TIMP-1参与了CAP的发病过程;血清MMP-2、MMP-9可以作为CAP诊断和判断病情的血清学指标;在CAP中中性粒细胞可能是MMP-9的主要来源。

大鼠角膜新生血管模型中基质金属蛋白酶-2及其抑制物的表达

目的 探讨大鼠角膜碱烧伤后基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织型抑制剂（TIMP-2）在角膜中的表达和意义。方法 采用碱烧伤大鼠角膜建立角膜新生血管动物模型;应用免疫组织化学技术检测MMP-2及TIMP-2在角膜新生血管模型不同阶段的表达和变化。结果 实验鼠于伤后3～4天开始形成大量新生血管,可见炎性细胞浸润,伤后14～21天新生血管和炎性细胞均明显减少。免疫组化显示MMP-2于伤后1天表达开始升高,3天达最高,以后逐渐下降。而TIMP-2则于早期变化不明显,7天表达开始升高,14天达高峰。结论 大鼠角膜新生血管形成早期MMP-2活性增高,继而TIMP-2分泌增多,MMP-2活性受抑,基底膜降解受阻,新生血管延伸停滞。

白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌纤维化和基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的影响

目的观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌间质胶原纤维变化和基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达水平的影响。方法33只新西兰白兔随机分为对照组、模型组和白藜芦醇干预组。观察心肌间质胶原纤维的变化,测量心肌间质胶原容积分数。逆转录聚合酶链反应检测心肌组织基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2mRNA水平。结果与对照组相比,模型组胶原纤维明显增多、增粗、排列紊乱,呈不规则网状或粗块状沉积于心肌间质,胶原容积分数和基质金属蛋白酶2表达增多,组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少(P<0.01)。白藜芦醇干预能显著减少上述指标的改变。结论动脉粥样硬化进程中,存在着心肌纤维化、基质金属蛋白酶2表达增多和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少等现象,白藜芦醇能减轻基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的失衡,改善心肌纤维化。

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2与2型糖尿病大血管病变的关系

[目的]探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子-2(TIMP-2)与2型糖尿病(T2DM)大血管病变的关系。[方法]采用酶联免疫吸附法测定了30例对照组和57例T2DM患者(其中单纯T2DM者27例,大血管病变者30例)血清中的MMP-2、TIMP-2及生化、临床指标,观察各组间的差异并进行对比。[结果]大血管病变组血清中MMP-2的水平显著高于单纯T2DM组和对照组,与FBP、HbA1c、TG、TC、SBP、DB呈正相关,而TIMP-2结果相反。[结论]血清中MMP-2、TIMP-2水平的检测对监测T2DM大血管病变的发生、发展有重要的临床意义。

胃癌组织中基质金属蛋白酶-2和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在人胃癌组织中的表达,及其与胃癌临床病理特征的关系。方法选取100个胃癌手术切除标本中胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织,采用免疫组织化学法检测MMP-2和TIMP-2蛋白的表达,并分析两者的表达及其与胃癌临床病理特征之间的相关性。结果胃癌组织中的MMP-2蛋白阳性率为77.0%,显著高于癌旁组织的33.0%和正常胃组织的8.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著高于正常胃组织(P<0.01)。胃癌组织中的TIMP-2蛋白阳性率为29.0%,显著低于癌旁组织的62.0%和正常胃组织的76.0%(P值均<0.01),癌旁组织又显著低于正常胃组织(P<0.01)。随着肿瘤浸润深度的增加(Tis～T4)、周围淋巴结转移的增多(N0～N3)、临床分期的进展(0～Ⅳ期),MMP-2蛋白阳性率逐渐升高,TIMP-2蛋白阳性率逐渐降低,且差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论MMP-2和TIMP-2的表达可能与胃癌的发生、侵袭和转移有关,检测MMP-2和TIMP-2的表达有助于预测胃癌转移。

人组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1在Pichia pastoris酵母中重组表达研究

为研究组织型基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMPs)的分子作用机制 ,探讨了在 Pichia pastoris酵母中高效表达分泌型人组织型基质金属蛋白酶抑制剂 - 1 (TIMP- 1 )的技术路线 ,并对产物性质进行初步研究 .通过 PCR从含有 TIMP- 1基因的 p BS质粒获得了该基因的全长序列 ,构建了 p PIC9/T1表达载体 ,电击法转化酵母 ,通过表型筛选和 PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入 Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS- PAGE表明表达量高达 40 mg/L培养上清 .用免疫印迹法确定了产物的正确性 ;同时 ,反向明胶酶谱法证明了重组蛋白具有抑制基质金属蛋白酶的活性 .

阿霉素肾病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠中的表达和意义。方法 25只Sprague-Dawlay(SD)雄性大鼠,随机分为对照组10只和观察组15只,观察组尾静脉内一次性注射阿霉素7.5 mg.kg-1(以生理盐水稀释至3 mL),对照组尾静脉内一次性注射等量生理盐水,对照组和观察组每日1次按10 mL.kg-1给予生理盐水灌胃,灌胃共8周。采用反转录聚合酶链式反应法检测肾组织MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果实验8周时与对照组比较,观察组的24 h尿蛋白定量、肌酐和尿素氮水平均显著上升(P<0.01),血白蛋白显著降低(P<0.01)。对照组大鼠肾皮质区肾小球毛细血管襻开放较好,无细胞外基质(ECM)聚集;观察组大鼠肾组织可见部分毛细血管腔变窄甚至完全闭塞,肾小囊扩张,囊壁增厚,球囊粘连。观察组MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达较对照组明显下降(P<0.01),观察组中MMP-2/TIMP-2 mRNA半定量比值较对照组明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中起到重要的作用;MMP-2/TIMP-2的比值失调使肾小球ECM降解减少,导致ECM过度积聚,参与肾小球硬化的发生发展。

盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬对增生性膝骨关节炎患者高迁移率族蛋白B1人类成纤维生长因子-2组织金属蛋白酶抑制剂-1水平的影响

目的 探讨盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬对增生性膝骨关节炎患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、人类成纤维生长因子-2(FGF-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法 选取2021年6月至2023年1月陆军第七十二集团军医院确诊增生性膝骨关节炎患者100例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各50例,对照组接受盐酸氨基葡萄糖治疗,观察组联合应用氟比洛芬治疗,2组连续治疗6周。比较2组临床疗效,比较2组视觉模拟评分法(VAS)、Lysholm膝关节评分系统(LKSS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分、HMGB1、FGF-2、TIMP-1水平、不良反应发生率。结果 与对照组(74%)比较,观察组临床总有效率(90%)升高(P<0.05);与治疗前比较,治疗后2组VAS、WOMAC评分降低,LKSS评分升高,并且观察组VAS、WOMAC评分低于对照组,LKSS评分高于对照组(P<0.05);治疗后2组HMGB1水平比治疗前降低,FGF-2、TIMP-1水平升高,并且观察组HMGB1低于对照组,FGF-2、TIMP-1水平高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬能够有效治疗增生性膝骨关节炎,同时还能降低HMGB1水平,升高FGF-2、TIMP-1水平,且不良反应少,具有较高的临床参考价值。

补脏通络方对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原、转化生长因子-β表达及基质金属蛋白酶-9/金属蛋白酶抑制剂-1平衡的影响

目的观察补脏通络方对糖尿病(DM)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、转化生长因子(TGF)-β表达及基质金属蛋白酶(MMP)-9/金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1平衡的影响。方法大鼠以脂肪乳灌胃21 d后一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造模,后予补脏通络方治疗。于第8周末取左肾,测算肾重指数;SABC-FITC免疫组织化学荧光法检测肾组织Ⅳ-C、TGF-β表达;免疫印迹法分析肾组织MMP-9、TIMP-1蛋白含量。结果病理组较正常组肾重指数增加(P<0.01),各治疗组较病理组肾重指数降低(P<0.01)。病理组肾小球体积增大,系膜区扩大病变经治疗后均有不同程度改善。病理组较正常组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达增高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值下降(P<0.01);各治疗组较病理组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达下降(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值上升(P<0.01);中、高剂量组降低TIMP-1表达,升高MMP-9/TIMP-1比值的作用优于低剂量组(P<0.01)。结论下调肾组织TGF-β表达,调节MMP-9/TIMP-1平衡,促进胶原降解,可能是补脏通络方保护DM肾脏作用的机制之一。

基质金属蛋白酶组织抑制剂-2过表达对人成釉细胞瘤鸡胚尿囊膜移植瘤的抑制作用

目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因过表达对人成釉细胞瘤鸡胚尿囊膜(CAM)移植瘤的抑制作用。方法建立成釉细胞瘤的鸡胚尿囊膜移植瘤模型。将实验分组:空白对照组(Empt),脂质体转染组(Lipo),质粒转染组(P)。TIMP-2基因转染成釉细胞CAM移植瘤细胞后,测定移植瘤体积和瘤重;将移植瘤侵袭能力分为4个级别进行移植瘤病理检查。Western blot分析移植瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及TIMP-2蛋白的表达。结果移植瘤能在鸡胚绒毛尿囊膜上生长。接种后第9天,转染质粒组的0级侵袭为7例、2级侵袭为1例、3级侵袭为0例。TIMP-2基因转染可以显著抑制成釉细胞CAM移植瘤的局部侵袭能力。质粒转染组TIMP-2表达明显高于空白组TIMP-2的表达(P<0.05);质粒转染组MMP-2表达明显低于空白组MMP-2的表达(P<0.05)。结论成功建立成釉细胞瘤的CAM移植瘤模型。TIMP-2基因转染后,成釉细胞瘤CAM移植瘤的侵袭性生长被抑制。移植瘤的侵袭性生长被抑制的可能原因是由于特异性抑制MMP-2蛋白引起的。

携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2基因重组腺病毒载体的构建

目的 构建携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂 2 (hTIMP 2 )基因的重组腺病毒载体 ,为基因治疗提供实验基础。方法 利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1以及线性化的重组穿梭质粒 pTrack CMV hTIMP 2共转化BJ5 183受体菌并在其中发生同源重组 ,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子 ,重组腺病毒质粒AdhTIMP 2经过 2 93细胞的包装 ,扩增和纯化后 ,测定病毒滴度。一步法提取细胞总RNA ,RT PCR检测hTIMP 2的mRNA。收集细胞上清 ,进行Western杂交检测TIMP 2蛋白。结果 得到了携带hTIMP 2基因的重组腺病毒 ,纯化后滴度为 4× 10 11pfu/ml,应用RT PCR和Westernblot方法 ,在转染 2 93细胞后 2 4h即可检测到hTIMP 2的表达。结论 成功地构建了携带hTIMP 2的重组腺病毒载体 ,为下一步的基因治疗提供了基础。

他汀类药物对基质金属蛋白酶-1及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1的影响

目的观察阿托伐他汀(立普妥)、普伐他汀(普拉固)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法培养的大鼠腹腔巨噬细胞中先加入10ng/ml的白介素-1β(IL-1β),促进MMP-1的分泌,24h后加入不同浓度的阿托伐他汀、普伐他汀(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),继续孵育24h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测培养上清液中的MMP-1及TIMP-1的浓度;取阿托伐他汀10-5mmol/L浓度,分别在6h、24h、48h测培养上清液中的MMP-1的浓度。结果随着药物浓度的增加(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),阿托伐他汀对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少17.36%、19.40%、26.54%、33.70%),与对照组有显著统计学差异,而不同浓度的普伐他汀虽使大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1略有降低,但与对照组比较无统计学差异,且各组间也无统计学差异;两组他汀使大鼠腹腔巨噬细胞TIMP-1的分泌均略有降低,但与对照组比较,均无统计学意义;随着药物作用时间的延长(6h、24h、48h),阿托伐他汀(1×10-5mmol/L)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少11.96%、26.54%、32.77%),与对照组有显著统计学差异。结论阿托伐他汀呈时间剂量依赖性抑制IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1,而对TIMP-1的分泌无影响;普伐他汀对IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1无影响,对TIMP-1的分泌也无影响。

甲状腺乳头状癌原发灶与淋巴结转移灶中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制剂-2的表达对比分析

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP2),组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达。方法:采用免疫组织化学方法检测86例PTC原发灶及其中40例颈部淋巴结转移性癌灶中MMP2、TIMP2的表达。结果:伴有颈部淋巴结转移的PTC原发灶中MMP2的表达强度高于无淋巴结转移者,而前者TIMP2的表达强度低于后者,差异均有统计学意义(P<0.05);PTC原发灶中MMP2的表达强度高于转移灶,差异有统计学意义(P<0.05),而TIMP2在原发灶与转移灶中表达强度的差异无统计学意义(P>0.05);两者在PTC原发灶和转移灶中表达强度的自身对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PTC癌组织中的MMP2/TIMP2表达比例失衡,MMP2起着主导作用,这可能是导致PTC淋巴结转移的因素之一,高MMP2/TIMP2比例蛋白组成的PTC癌细胞亚克隆在转移过程中发挥着重要的作用。