新方法可获得更佳的组织工程小直径血管细胞外基质支架

背景:获得适宜的支架材料是构建组织工程小直径血管的基础,前期研究发现,非离子型去垢剂的脱细胞效果差,联合应用离子型去垢剂能更有效去除细胞成分。目的:比较不同脱细胞方法制备猪颈动脉脱细胞支架的有效性,探索更适宜的细胞外基质支架制备方法。方法:取普通猪颈动脉30根,随机分为5组(n=6),其中A组不进行脱细胞处理;B组采用1%十二烷基硫酸钠+1%脱氧胆酸钠进行脱细胞处理;C组采用0.5%十二烷基硫酸钠+0.5%脱氧胆酸钠进行脱细胞处理;D组采用1%十二烷基硫酸钠+1%TritonX-100进行脱细胞处理;E组采用0.5%十二烷基硫酸钠+0.5%Triton X-100进行脱细胞处理。对各组样本分别行苏木精-伊红染色、五色套染、扫描电镜、免疫组织化学及生物机械力学检测。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色、五色套染显示,B、C组脱细胞完全,D、E组于局部可见细胞残留;(2)扫描电镜显示,脱细胞各组胶原纤维束和弹性蛋白保存完整,B组孔隙结构的形态、尺寸优于C、D、E组;(3)免疫组织化学评估显示,脱细胞各组均有异种抗原α-1,3-Gal表达,B组α-1,3-Gal抗原表达低于C、D、E组;(4)生物机械力学检测显示,脱细胞各组爆破压力、缝线保持力和缝合保留强度较A组显著下降(P <0.05),脱细胞各组间比较无差异;脱细胞各组顺应性、长轴断裂伸长率、横轴最大应力、横轴断裂伸长率、横轴杨氏模量与对照组比较无差异(P> 0.05);脱细胞各组长轴最大应力和长轴杨氏模量较A组显著下降(P <0.05),其中B、C组长轴最大应力和长轴杨氏模量下降较D、E组明显(P<0.05);(5)结果表明,基于1%十二烷基硫酸钠+1%脱氧胆酸钠的方法可获得更佳的猪颈动脉细胞外基质支架,适用于构建组织工程小直径血管。