脱细胞真皮组织工程鼓膜在豚鼠鼓膜修补术中的应用

目的观察脱细胞真皮组织工程鼓膜在鼓膜修补术动物实验中的效果。方法建立豚鼠慢性鼓膜穿孔模型30只,同时构建复合成纤维细胞的脱细胞真皮组织工程鼓膜。将每只豚鼠左耳作为手术耳,施行内植法植入组织工程鼓膜,右耳作为空白对照。每周观察鼓膜愈合情况、听阈变化,同时观察组织学结构改变。结果鼓膜修补手术30耳中,2耳因感染而未愈合,愈合率为93.3%;对照耳仅4耳愈合,愈合率为(13.3%);愈合鼓膜外观与正常鼓膜相似,听性脑干反应测试示术耳听力恢复正常。苏木精-伊红染色结果表明采用组织工程鼓膜修复的的鼓膜有着正常鼓膜的三层结构,即鳞状上皮层、中间纤维层及粘膜层,而空白对照耳自行修复的鼓膜中缺少纤维层结构。结论组织工程鼓膜可以作为良好的鼓膜移植材料。

三种组织工程鼓膜的构建

目的构建3种不同材料的组织工程鼓膜,并对其进行生物学特性检测。方法体重30kg健康雄性小白猪1只,制备脱细胞硬脑膜及脱细胞真皮,并从牛皮中提取液态胶原,将第3代豚鼠鼓膜成纤维细胞1×106个/mL,各0.2mL种于3种材料表面进行培养,倒置相差显微镜下观察成纤维细胞的生长状态。培养1周后,将3种材料分别进行扫描电镜及HE染色观察,测定材料厚度及其张力。结果成纤维细胞在3种材料表面生长良好,呈束状平行排列,其中以胶原与脱细胞真皮表面成纤维细胞生长情况较佳。HE染色及扫描电镜下可见成纤维细胞呈单层于3种材料表面连续生长。胶原膜、脱细胞真皮及脱细胞硬脑膜的平均厚度分别为9.4、10.0及10.4μm。张力强度测定,复合成纤维细胞的胶原组织工程鼓膜张力(1.417±0.030)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力为(24.500±2.040)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞硬脑膜张力为(53.300±2.600)N/mm2;复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力与正常豚鼠鼓膜张力26.700N/mm2最接近。结论脱细胞猪真皮为支架复合成纤维细胞构建的组织工程鼓膜,其张力与厚度均与正常豚鼠鼓膜相接近,是构建组织工程鼓膜的理想材料。