VX-2组织悬液原位种植与Panc-1细胞悬液原位种植在家兔胰腺癌模型建立中的效果比较

目的目前有关家兔的胰腺癌模型制作方法报道较为少见,文中比较Panc-1细胞悬液原位种植与VX-2组织悬液原位种植在家兔胰腺癌模型建立中的效果。方法选取健康家兔30只,采取随机数字表法分为组织悬液组(n=15)、细胞悬液组(n=15)。组织悬液组采取VX-2组织悬液原位种植,细胞悬液组采取Panc-1细胞悬液原位种植,种植后观察模型的建立情况。通过B超、3.0T磁共振以及CT等辅助检查评价两种建模结果。结果组织悬液组第3周内有5只家兔出现十二指肠、结肠、盲肠、腹膜壁出现大量肿瘤组织种植性转移,3只家兔大网膜出现肿瘤组织种植性转移,MR T2见胃体后高信号影。细胞悬液组第3周内1只家兔十二指肠出现肿瘤组织种植性转移,MR LAVA见胃体后方稍高信号影。组织悬液组中15只模型全部建立成功,细胞悬液组仅发现3例建模成功。与组织悬液组比较,细胞悬液组第3、4周肿瘤种植成功率明显降低(46.66%vs 6.67%,100%vs 20.00%,P<0.05)。结论 VX-2组织悬液原位种植较Panc-1细胞悬液原位种植的更具有可行性,更易实施。

组织悬液HER-2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值

目的:探讨免疫组化室内质控中应用组织悬液作为HER-2(人表皮生长因子受体-2)阳性对照的效果,为建立更好的HER-2免疫组化室内质控提供参考。方法:择取2018年1月-2019年12月笔者所在医院的37例HER-2(3+)的胃癌根治标本,包埋成石蜡块连续切片,行免疫组化染色,另取切片搅碎后制成组织悬液,分别进行免疫组化染色和常规HE染色,于试验后4、12周时,复行免疫组化染色,比较观察染色定位及强度情况。结果:组织悬液标本HE染色镜下观察均可见异形癌细胞,多数平铺,轮廓清晰。免疫组化染色的胃癌组织悬液标本,HER-2表达均见于细胞膜,染色强度均为强阳性(3+),同石蜡切片定性定位与染色均相符。试验后4、12周复行免疫组化,HER-2染色定位与强度同前无明显改变。结论:组织悬液癌细胞HER-2阳性定位明确,染色强度准确,质量稳定易判读,能够保障染色过程可靠,可以作为免疫组化室内质控,为HER-2染色提供阳性参考。

组织悬液HER2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值

【目的】为了更好的建立人类表皮生长因子受体2(HER2)免疫组化室内质控,探讨一种简易的HER2阳性对照方法。【方法】收集2015年1月至2018年12月安徽省肿瘤医院乳腺癌根治标本,挑选20例HER2表达3+的肿瘤样本制作成组织悬液,分别经HE染色及免疫组化染色证实癌细胞HER2的表达,1个月及3个月后再次HER2免疫组化验证。选取乳腺癌、胃癌HER2明确表达0、1+、2+、3+的归档蜡块与作为对照的悬液样本进行HER2染色对比。【结果】20例组织悬液中的癌细胞HER2定位明确,染色强度3+,3个月后再次染色结果无差异,可为乳腺癌、胃癌HER2染色提供阳性参考。【结论】组织悬液HER2阳性对照可作为免疫组化室内质控使用,该方法简便、可靠、实用、易推广。

对比组织悬液法及组织块法建立兔VX2皮下肿瘤模型的差异

背景:目前建立VX2皮下肿瘤模型的方法有多种,但建模方法各有优劣,能优质高效建立动物肿瘤模型的方法方可满足动物肿瘤实验的需求。目的:对比观察不同方法建立兔VX2皮下肿瘤模型,探索更简单高效的建模方式,为兔VX2皮下肿瘤实验提供大批量高质量的动物模型奠定基础。方法:雄性新西兰大白兔66只。取2只制备VX2荷瘤种兔,再取荷瘤兔肿瘤组织分别制备瘤组织块及肿瘤组织悬液备用。实验分为2组:瘤组织悬液组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面注射组织悬液0.15 mL;瘤组织块组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面皮下植入瘤组织块。2组分别采用相应接种方式种植2只荷瘤种兔,各传5代。记录并比较2组肿瘤种植时间,采用二维及彩色多普勒超声观察肿瘤形态大小及生长情况,比较2组肿瘤成瘤率及传代情况。实验方案经中国人民解放军第三军医大学动物实验伦理委员会批准(批准号为AMUWE2020016)。结果与结论:①组织悬液法肿瘤种植时间(75.70±11.16)s较组织块法肿瘤种植时间(100.80±9.21)s明显缩短(P=0.00);②组织悬液法成瘤率95%显著高于组织块法成瘤率60%(P<0.05),肿瘤体积显著大于组织块法(P<0.05);③组织悬液法传代成功率95%显著高于组织块法传代成功率65%(P<0.05);④结果说明,组织悬液法建立兔VX2皮下肿瘤模型与瘤块法相比,更简单高效。

组织块悬液注射法制作兔VX_2乳腺癌模型

目的 :建立稳定的兔VX2 乳腺癌模型 ,选择最佳的模型制作方法。方法 :3 0只兔随机分为 3组 ,每组10只 ,分别采用乳腺内瘤细胞液注射法、组织块悬液注射法、组织块种植法制作兔VX2 乳腺癌模型 ,比较各组的种植成活率、肿瘤生长率、荷瘤兔存活时间 ,并观察肿瘤的生物学形态。结果 :组织块悬液注射法操作简便 ,成瘤率高 ,肿瘤增殖旺盛 ,生物学特征符合乳腺鳞状细胞癌。结论 :成功建立了兔VX2 乳腺癌模型 。

组织块悬液法建立兔食管VX2移植瘤模型的研究

目的利用组织块悬液法建立兔VX2食管移植瘤模型,观察其肿瘤的成功率,生长情况及转移情况,为研究食管癌提供一个更好的研究方法。方法将VX2肿瘤制作成组织块悬液,直接注射至兔食管黏膜下层,每周进行B超检测,观察肿瘤的生长情况,并结合大体解剖及病理学检查,评价其生物学特性。结果 14只实验兔,成瘤率100%,其中1只死于并发症(术后感染),1只食管穿孔,余皆正常成瘤,其成瘤时间约为5～9天左右,14天后可出现吞咽困难,B超示食管内见一低回声结节(紧贴食管后壁),3周后实验兔明显消瘦,进食困难,中位生存时间约为20天。结论该方法可成功制成兔VX2食管肿瘤模型,生长稳定,难度较易。

睾丸组织悬液体外培养对睾丸精子活力和冷冻复苏结局的影响

目的了解人睾丸组织悬液体外培养对睾丸精子活力和冷冻复苏结局的影响。方法回顾性分析2017年7月至2020年8月在广东省计划生育科学技术研究所(广东省计划生育专科医院)行显微睾丸切开取精术的85例非梗阻性无精子症患者的睾丸组织悬液34℃体外培养16 h、18 h、20 h、21 h、22 h、23 h、24 h后的精子活力和冷冻复苏结局。结果 85例非梗阻性无精子症患者行显微睾丸切开取精术后获得的睾丸组织悬液,经34℃体外培养16~24 h后,5.77%术后未见精子的睾丸组织悬液发现了不动睾丸精子,35.71%术后见不动精子的睾丸组织悬液可见活动睾丸精子,甚至可见前向运动睾丸精子,15.79%术后可见活动精子的睾丸组织悬液未发现活动精子;手术当日未见精子组、见活动精子组、见不动精子组睾丸组织悬液,34℃体外培养16 h、18 h、20 h、21 h、22 h、23 h、24 h后,睾丸精子活力比较,差异无统计学意义(P>0.05);34℃体外培养16~24 h后含有活动精子的睾丸组织悬液,经冷冻复苏后有61.90%仍可见活动精子。结论睾丸组织悬液34℃体外培养16 h、18 h、20 h、21 h、22 h、23 h、24 h对睾丸精子活力影响无差异;活动精子的睾丸组织悬液冷冻复苏是可行的;睾丸组织悬液34℃体外培养可提高部分睾丸精子活力。

组织碎片悬液与分组式多组织对照在免疫组化室内质控中的应用

免疫组化(IHC)染色是病理检测及基础组织学研究中的重要技术手段之一,是病理医师做出正确诊断的重要依据,因此染色质量的质控尤为重要[1]。而设置正确的对照是保证染色结果可靠性的前提[2-3]。当前,各个实验室IHC对照方法不尽相同,包括单组织对照、组织芯片对照、多组织羊膜卷对照及组织内对照等。本科室自2019年以来探索使用分组式多组织蜡块联合组织碎片悬液来对所有IHC切片进行日常室内质量控制,经过不断实践与改善取得良好成效。

小鼠肺组织单细胞悬液制备的酶消化法比较研究

该研究比较两种胶原酶及配合使用Percoll细胞分离液对小鼠肺组织单细胞悬液中淋巴细胞得率、活性和数量的影响,为单细胞测序前处理提供技术参考。将12只C57BL/6小鼠随机分为四组,分别是Ⅰ型胶原酶消化组(G1)、Ⅰ型胶原酶消化+Percoll细胞分离组(G2)、Ⅳ型胶原酶消化组(G3)和Ⅳ型胶原酶消化+Percoll细胞分离组(G4)。四组方法所提取的肺组织单细胞悬液,于显微镜下进行形态学观察,拍照并计数,后采用流式细胞术检测单个核细胞、活细胞和淋巴细胞的得率和数量,以及不同免疫细胞亚群的比例和数量。结果显示,两种胶原酶对小鼠肺组织细胞解离效果无明显差异,G1组制备的肺单细胞数量显著高于G3组(P<0.05)。相同数量的细胞中,G2和G4组获得单个核细胞、活性细胞、CD45^(+)细胞、CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞个数均显著高于G1和G3组(P<0.05),但在CD4^(+)T细胞、CD11c^(+)细胞、NKT细胞个数上没有显著优势。应用Ⅰ型胶原酶消化可以获得更多的细胞总数,但应用Ⅳ型胶原酶消化可以获得更多的淋巴细胞。经过Percoll细胞分离液处理的G2和G4组可以分离获得更高活性的单个核细胞、CD45^(+)细胞、CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和NK细胞,该研究为今后进行肺组织单细胞测序前处理提供了重要的技术参考。

非梗阻性无精子症患者采用睾丸显微取精术联合睾丸组织混悬液冷冻的临床效果

目的探讨睾丸显微取精术(micro-TESE)联合睾丸组织混悬液冷冻治疗不同病理类型的非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)行卵胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的临床结局。方法回顾性分析2016年3月—2017年3月期间本中心经MicroTESE手术获取精子并进行睾丸组织混悬液冷冻的NOA患者的ICSI结局。结果 70例NOA患者中,micro-TESE获得精子30例(42.9%)。睾丸生精细胞成熟阻滞者(maturation arrest,MA)的获精率(sperm retrieval rate,SRR)显著低于生精功能低下者(hypo-spermatogenesis,H-S),差异有统计学意义(P=0.00),但同唯支持细胞综合征(Sertoli cell only syndrome,SCOS)比较,差异无统计学意义(P=0.64)。而早期睾丸生精细胞成熟阻滞(early MA)的SRR[20.8%(5/24)]低于晚期生精细胞成熟阻滞(late MA)[43.8%(7/16)]。30例睾丸组织混悬液解冻行ICSI注射,临床妊娠率为46.7%(14/30)。其中,MA组临床妊娠率为41.7%(5/12);H-S组临床妊娠率为47.1%(8/17);SCOS组1例行ICSI后临床妊娠。结论在辅助生殖技术中,睾丸显微取精术联合睾丸组织混悬液冷冻治疗NOA患者,临床结果满意。

1株鼠痘病毒的分离和鉴定

作者在进行疑似“牛流行热病毒”的分离过程中,利用Vero细胞从盲传乳鼠脑组织中分离到1株病毒。开始误以为是“牛流行热病毒”,后来通过对其形态学、理化学与生物学特性的测定、致病性试验和血清学鉴定等确定此株病毒为鼠痘病毒。现将过程报告如下。一、病毒的分离 1.死亡乳鼠的来源及其脑组织悬液的制备将疑似“牛流行热病毒”感染的奶牛血液白细胞层经脑内接种1日龄乳鼠(购自某实验动物饲养场),第1代不发生死亡,7天后人工剖杀染毒小鼠。

三种建立小鼠乳腺癌移植模型方法的比较

目的:用MA782细胞建立稳定的小鼠乳腺癌模型,选择最佳的模型制作方法。方法:60只BALB/c小鼠随机分为3组,每组20只,分别采用小鼠左腋窝皮下细胞悬液注射法、组织块悬液注射法、组织块种植法制作小鼠乳腺癌模型,比较各组的种植成活率、肿瘤生长率,并观察肿瘤的生物学形态。结果:组织块悬液注射法操作简便,经济,成瘤率高,肿瘤大小均一,肿瘤呈浸润性生长,增殖旺盛;细胞悬液注射法操作复杂,价格昂贵;组织块种植法操作复杂,成瘤率较低,大小相差较大。结论:三种方法中,组织块悬液注射法是最佳的模型制作方法。

三种兔肾VX2肿瘤模型制作方法的比较

目的 探讨三种建立兔肾 VX2肿瘤模型方法的有效性。方法 研究对象为健康家兔 36只 ,动物模型建立采用三种方法 :1超声引导下肿瘤组织混悬液注射法 ;2手术直视下肿瘤组织块包埋 ;3手术直视下肿瘤组织混悬液注射法。结果 健康成年家兔 36只 ,成功建立 VX2肿瘤模型共 2 6只家兔。其中采用超声引导下肿瘤组织混悬液注射法接种 2 2只家兔的 2 8个肾脏 ,其中 10只家兔接种成功 ,成功率为 (10 /2 8) 35 .71% ;手术直视下肿瘤组织块包埋法接种 12只家兔 ,接种成功 4个左肾 ,成功率 (4 /12 ) 33.33% ;手术直视下肿瘤组织混悬液注射法接种 14只家兔左肾 ,成功 12只 ,成功率 (12 /14 ) 85 .71%。结论 三种建立兔肾 VX2肿瘤模型的方法是可行的 ,其中手术直视下肾内 VX2肿瘤组织混悬液注射法建立兔肾

脂质超声造影评价兔乳腺癌内部坏死的实验研究

目的用组织块悬液注射法建立乳腺癌模型、超声造影对肿瘤内部坏死情况进行评价.方法自行配制脂质超声造影剂,并对其理化性质进行检验备用.组织块悬液注射法建立乳腺癌模型,肉眼及普通超声观察肿瘤体积、生长率、生存时间,利用超声造影显示肿瘤内部坏死情况.结果组织块悬液注射法操作简单,成瘤率高,肿瘤增殖旺盛,生物学特征符合乳腺鳞状细胞癌.超声造影能够清晰显示肿瘤内部坏死情况.结论组织块悬液注射法成功建立了兔乳腺癌模型,超声造影能够评价肿瘤内部坏死情况.

疱疹病毒性脑炎的快速诊断

本文在19名疑似疱疹病毒性脑炎病人采取了颞叶活体组织,其中12名从活体组织及脑室脑脊液分离出疱疹病毒,12例中10例免疫萤光阳性,另7例阴性,均未因活体组织手术发生脑部永久性损害。