基质金属蛋白酶-2及其组织抑制物-2在动脉粥样硬化兔主动脉中的表达变化

目的研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制物-2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)在动脉粥样硬化兔主动脉组织中的表达及与血管病理改变的关系。方法 16只雄性新西兰兔随机分为对照组(喂食普通兔料)、高脂模型组(喂食高脂饲料),饲养12周后处死动物,取主动脉进行病理学检查,并采用RT-PCR方法来检测主动脉病灶中MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果 MMP-2 mRNA在正常对照主动脉组织中低表达而在动脉粥样硬化病变时高表达;TIMP-2 mR-NA在正常对照主动脉组织中高表达而在动脉粥样硬化病变时低表达。结论 MMP-2及TIMP-2的协同表达在动脉粥样硬化及动脉血管重塑过程中起作用,动脉粥样硬化的发生与两者的比例失调有关。

微小RNA-221和组织金属蛋白酶抑制物-2在妊娠期高血压患者中表达

探讨微小RNA-221(miR-221)、组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)在妊娠期高血压(PIH)患者血清、胎盘组织中的表达水平及意义。方法 选取2018年7月~2020年10月于本院分娩的PIH孕产妇65例为PIH组,并纳入同期正常妊娠分娩的孕产妇65例为健康妊娠组。比较两组临床资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定孕产妇产前血清及胎盘组织miR-221、TIMP-2表达水平;Pearson法分析PIH患者血清、胎盘组织中miR-221表达水平与TIMP-2水平的相关性;利用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清、胎盘组织miR-221、TIMP-2表达水平对PIH的诊断价值。结果 PIH组收缩压、舒张压及血清、胎盘组织TIMP-2表达水平均明显高于健康妊娠组(P<0.05),血清及胎盘组织中miR-221表达水平明显低于健康妊娠组(P<0.05);PIH患者血清、胎盘组织中miR-221表达水平与TIMP-2水平均呈负相关(P<0.05);血清、胎盘组织miR-221诊断PIH的曲线下面积(AUC)分别为0.867、0.852,截断值分别为0.81、0.82;血清、胎盘组织TIMP-2诊断PIH的AUC分别为0.894、0.884,截断值分别为1.55、1.52;血清、胎盘组织中miR-221、TIMP-2联合诊断PIH的AUC分别为0.954、0.952,敏感度分别为87.7%、86.2%,对应特异性分别为90.8%、92.3%。结论 PIH患者血清、胎盘组织miR-221表达水平降低,TIMP-2表达水平升高,两者呈负相关,且miR-221、TIMP-2联合可提高对PIH的诊断效能,有利于临床诊断PIH。

盆腔脱垂患者肛提肌剪切波弹性模量与子宫旁韧带组织中MMP-2、TIMP-2、TGF-β1的蛋白表达及相关性研究

探讨盆腔器官脱垂(POP)患者肛提肌杨氏模量值跟宫旁韧带组织中的转化生长因子β1(TGF-β1)以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-2)组织含量水平的相关性。方法 随机抽取2021年5月-2023年5月中国科学院大学(深圳)医院妇科收治的18例合并POP II级及以上患者(POP组)和17例无POP患者(对照组),使用剪切波弹性成像新技术(shear wave elastography,SWE) 获取静息状态下双侧肛提肌的杨氏模量,计算双侧平均值;比较两组肛提肌杨氏模量差异。并采用两组患者因良性妇科疾病行子宫切除的宫旁韧带(骶韧带、主韧带)组织为实验材料,检测两组实验材料中 MMP-2,TIMP-2,TGF-β1的蛋白水平,比较两组差异,并分析POP组肛提肌剪切波弹性模量、TGF-β1与 MMP-2,TIMP-2表达的相关性。结果 两组肛提肌杨氏模量差异有统计学意义(P <0.05), Western blot 结果显示 POP组 TIMP-2,TGF-β1 表达均降低,MMP-2表达升高,且与对照组相比差异有统计学意义;相关性分析表明,肛提肌杨氏模量、TGF-β1与 MMP-2 表达呈负相关,肛提肌杨氏模量、TGF-β1与 TIMP-2表达是正相关。结论 POP 患者存在肛提肌杨氏模量弹性下降,与盆底支撑组织中胶原代谢异常密切相关。

高氧、维甲酸对早产鼠肺组织基质金属蛋白酶-2、-9及特异性组织抑制物-1、-2表达的影响

目的探讨基质金属原蛋白-2(MMP-2)、MMP-9、基质金属蛋白酶特异性组织抑制物-1(TIMP-1)和TIMP-2在高氧肺损伤中的作用及维甲酸(RA)的保护作用机制。方法建立高氧(FiO285%)暴露早产SD大鼠肺损伤模型,应用RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达,采用明胶酶谱检测MMP-2和MMP-9酶原及活酶表达,采用Western blot技术检测TIMP-1和TIMP-2蛋白表达。结果与空气组比较,高氧暴露4、7、14d,MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达均显著升高(P均<0.01),MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶和TIMP-1蛋白的表达明显上调(P<0.05);RA对空气暴露下它们的表达均无明显影响(P均>0.05),但不同程度下调高氧暴露后MMP-2、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达和MMP-2活酶、MMP-9酶原及活酶的表达,进一步提高TIMP-1蛋白表达;高氧、RA对TIMP-2 mRNA和蛋白的表达均无明显影响(P均>0.05)。结论高氧暴露明显改变MMPs/TIMPs的表达,在肺泡形成关键时期,MMPs/TIMPs之间平衡关系的破坏是造成肺发育受阻和纤维化的重要因素;通过协调MMPs/TIMPs之间的表达,改善肺泡结构,降低肺纤维化程度,从而逆转高氧所致肺损伤,是RA发挥保护作用的重要机制之一。

转化生长因子-β1、基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶组织抑制物-2联合检测在胎膜早破中的意义

目的:探讨MMP-9、TIMP-2、TGF-β1联合检测在胎膜早破中的意义。方法:用免疫组化法和RT-PCR法分别检测20例足月胎膜早破产妇(PROM组)、21例足月临产经阴道分娩产妇(足月分娩组)及23例足月未临产择期剖宫产妇(未临产组)胎膜组织中MMP-9、TIMP-2、TGF-β1的分布和表达变化。结果:PROM组胎膜中MMP-9表达阳性率显著高于足月分娩组和未临产组,3组间差异有统计学意义(P<0.01);未临产组胎膜中TIMP-2和TGF-β1表达强度最高,足月分娩组次之,PROM组最低,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。PROM组胎膜中MMP-9mRNA表达最高,足月分娩组次之,未临产组最低;而未临产组胎膜中TIMP-2mRNA和TGF-β1mRNA表达最高,足月分娩组次之,PROM组最低,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。胎膜上的TGF-β1表达水平和MMP-9表达呈负相关(P<0.05),与TIMP-2表达呈正相关(P<0.05)。结论:胎膜早破的发生和MMP-9/TIMP-2比例失衡有一定关系,胎膜上的TGF-β1可通过调控MMP-9及TIMP-2的表达引起MMP-9/TIMP-2比例失衡,增加胎膜细胞外基质的降解,最终导致胎膜早破发生。

宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2表达变化及其与VEGF表达、微血管密度的相关性

目的探讨宫颈癌组织中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)表达变化,及其与宫颈癌组织血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管密度(MVD)的相关性。方法选取80例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本为宫颈癌组,50例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者CIN组织标本为CIN组,20例正常体检者的正常宫颈组织标本为对照组。采用免疫组化SP法对三组标本行TFPI-2、VEGF、CD34染色,半定量观察TFPI-2、VEGF表达情况,用CD34染色切片测算微血管密度(MVD)。结果宫颈癌组、CIN组、对照组TFPI-2阳性表达率分别为21.25%(17/80)、52.00%(26/50)和85.00%(17/20),宫颈癌组TFPI-2阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组TFPI-2阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组VEGF阳性表达率分别为72.50%(58/80)、42.00%(21/50)和10.00%(2/50),宫颈癌组VEGF阳性表达率与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组VEGF阳性表达率与对照组相比,P均<0.05。宫颈癌组、CIN组、对照组MVD分别为(22±8)、(10±2)、(6±2)条/HP,宫颈癌组MVD与CIN组、对照组相比,P均<0.05;CIN组MVD与对照组相比,P均<0.05。Spearman等级相关性分析结果显示,宫颈癌组标本TFPI-2和VEGF蛋白表达、MVD均呈负相关(r分别为-0.632、-0.685,P均<0.05)。结论宫颈癌组织中TFPI-2蛋白低表达。宫颈癌组织中TFPI-2表达与VEGF表达和MVD呈负相关。宫颈癌组织中TFPI-2可能通过下调VEGF表达抑制肿瘤新生血管形成。

组织因子途径抑制物-2在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,评价其与肺癌恶性程度的关系。方法:收集非小细胞肺癌石蜡标本、临床资料和临床分期,采用免疫组化法检测TFPI-2蛋白在60例非小细胞肺癌和15例正常肺组织中的表达水平,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:TFPI-2在非小细胞肺癌中的表达指数为60.0%,低于正常肺组织的89.5%。Ⅰ、Ⅱ期及无转移的非小细胞肺癌组织中TFPI-2表达指数(70.9%)及AI值[(9.58±4.52)%]均高于Ⅲ、Ⅳ期[48.3%、(6.36±1.98)%]及有转移的非小细胞肺癌组织[57.1%、(6.10±2.68)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TFPI-2在正常肺组织中的表达水平明显高于非小细胞肺癌组织,TFPI-2可能在诱导非小细胞凋亡中起到重要作用。

组织因子途径抑制物-2对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:检测人胰腺癌组织中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测43例胰腺癌及9例正常胰腺组织中TFPI-2及Ki-67蛋白的表达。结果:胰腺癌中TFPI-2的表达低于正常胰腺组织,其表达水平与胰腺癌临床分期及转移有关,于Ⅰ、Ⅱ期及无转移的胰腺癌组织中的表达高于Ⅲ、Ⅳ期及有转移的胰腺癌组织(P<0.05)。其表达水平与胰腺癌细胞增殖活性呈负相关(rs=-0.339,P<0.05)。结论:TFPI-2基因在胰腺癌中呈低表达,能抑制肿瘤细胞的增殖,可能参与了胰腺癌细胞周期的调控。

组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)在动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用

组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)是一种含Kunitz型结构域的丝氨酸蛋白酶抑制剂,其生理功能和病理作用尚不清楚。由于TFPI-2在抑制恶性肿瘤侵袭转移中的重要作用及肿瘤侵袭转移与动脉粥样硬化斑块不稳定破裂的原因相似,研究者的目光开始转向TFPI-2对斑块稳定性的作用。本文就TFPI-2在动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用作一综述。

参麦注射液治疗急性非ST段抬高型心肌梗死及对组织因子途径抑制物-2的影响

目的探讨参麦注射液对急性非ST段抬高型心肌梗死治疗疗效并了解其机制。方法选非ST段抬高型心肌梗死患者170例随机分观察组及对照组各85例,对照组常规西药治疗,观察组在对照组的基础上应用参麦注射液。观察临床症状及心电图缓解情况,并检测治疗前后患者血浆组织因子途径抑制物2的浓度。结果临床治疗效果观察组总有效率90.59%,心电图改善总有效率91.67%高于对照组的76.47%、77.64%。两组治疗前组织因子途径抑制物-2水平无显著性差异(P>0.05);治疗以后观察组(7.79±1.112)ng/mL低于对照组的(8.86±1.29)ng/mL,差值为(2.24±0.78)ng/mL高于对照组的(1.14±0.60)ng/mL(P<0.05)。结论参麦注射液可有效提高急性非ST段抬高型心肌梗死治疗效果及心电图改善,参麦注射液对急性非ST段抬高心肌梗死的治疗作用可能与组织因子途径抑制物-2水平变化相关。

组织因子途径抑制物-2在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察组织因子途径抑制物(TFPI)-2在正常宫颈、宫颈上皮内肿瘤(CIN)和宫颈鳞癌组织中表达的差异及TFPI-2对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2009~2010年在该院妇产科住院治疗的68例宫颈鳞癌患者,48例CIN患者及12例宫颈正常患者的宫颈组织标本,免疫组化染色检测宫颈组织中TFPI-2的表达。取生长状态良好的宫颈癌Hela细胞,应用基因转染的方法建立TFPI-2高表达细胞系,Real-time PCR和Western印迹方法检测基因转染前后细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测各组细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 1免疫组化染色显示,正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中TFPI-2表达逐渐降低,三者间比较差异有统计学意义(P<0.01)。2体外观察发现,转染pc DNA3.1-TFPI-2的Hela-TFPI-2组细胞TFPI-2 mRNA和蛋白表达明显高于转染空白质粒组和空白对照组(P<0.01);MTT结果显示,Hela-TFPI-2组细胞增殖速度明显低于空白对照组和空白质粒组,且随着培养时间的延长,这种抑制作用更明显(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Hela-TFPI-2组细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白质粒组(P<0.05)。结论 TFPI-2表达随着宫颈病变的进展逐渐降低;同时过表达的TFPI-2可明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖,促进其凋亡。提示TFPI-2的表达减少可能是宫颈癌发生发展的机制之一,TFPI-2可能是治疗宫颈癌的新靶点。

组织因子途径抑制物-2影响人前列腺癌细胞侵袭能力的实验研究

目的:探讨人组织因子途径抑制物2(TFPI2)对基因转染入人前列腺癌细胞株PC3M体外和体内侵袭转移能力的影响。方法:通过Boyden小室体外侵袭转移模型,评价转染成功的PC3MTFPI2细胞和未转染的PC3M迁徙和侵袭能力的强弱;并且分别进行裸鼠接种实验,观察两组间其形成的局部新生物相对体积、组织浸润程度,以及有无远处转移的差异。结果:转染成功的PC3MTFPI2细胞中,证实有TFPI2mRNA和相应蛋白质的表达,转染成功的PC3MTFPI2细胞较未转染的PC3M体外侵袭能力明显下降,接种PC3MTFPI2组细胞的裸鼠较接种未转染的PC3M的裸鼠形成的新生物肌层浸润明显减少。结论:人TFPI2基因真核表达载体成功转染人PC3M并可以在PC3M中得到表达,TFPI2的表达可以抑制PC3M的体外和体内的侵袭能力。

基质金属蛋白酶-2及组织金属蛋白酶抑制物-2在子宫内膜异位症中的表达及其临床意义

目的观察MMP-2和TIMP-2在子宫内膜异位症中的表达及意义。方法应用免疫组化(S-P)法检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜异位症的在位内膜及45例异位内膜组织中MMP-2和TIMP-2蛋白的表达。结果:MMP-2在内异症在位内膜组织、异位内膜组织阳性表达率分别与正常内膜组织比较均有显著性差异(P<0.01);异位内膜阳性率高于在位内膜,但在统计学上无显著性差异(P>0.05)。TIMP-2在异位内膜组织的阳性表达率与正常内膜组织、EM在位内膜组织相比均有显著性差异(P<0.05);在位内膜组织的阳性表达率低于正常内膜组织,但在统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论:在子宫内膜异位症中MMP-2的高表达,TIMP-2蛋白的低表达,在子宫内膜异位症的发生、发展过程中具有重要作用。

组织因子途径抑制物-2与妇科肿瘤

组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)属于库尼(Kunitz)型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白,是一种广谱的丝氨酸蛋白酶抑制物。大量研究表明,TFPI-2通过抑制和降解基质金属蛋白酶,抑制肿瘤新生血管生成,抑制TF-FVIIa复合物介导的信号转导途径以及诱导肿瘤细胞凋亡等机制调控某些恶性肿瘤细胞的侵袭和转移。就TFPI-2的分子生物学特点、与恶性肿瘤侵袭转移的关系,及其与妇科肿瘤关系的研究进展综述。

组织因子途径抑制物-2影响多发性骨髓瘤血管内皮生长因子表达的研究

目的研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因对多发性骨髓瘤(MM)细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法通过脂质体转染技术将pcDNA3.0/TFPI-2或pcDNA3.0导入多发性骨髓瘤细胞株,分别设为实验组和对照组,用ELISA法测定实验组和对照组上清液中VEGF水平以及骨髓基质细胞(BMSCs)与实验组和对照组细胞共同培养分泌的VEGF蛋白的差异,以实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RQ-PCR)法测定实验组和对照组细胞内VEGF mRNA的表达。结果实验组VEGF、细胞内VEGF mRNA的表达未见明显差异,实验组与骨髓基质细胞共同培养的VEGF水平低于对照组。结论TFPI-2基因可能间接抑制BMSCs产生和分泌VEGF。

组织因子途径抑制物-2影响人前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的:将人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因转染入人前列腺癌细胞株PC3M,探讨TFPI-2对PC3M凋亡的影响。方法:应用脂质体介导的基因转移技术将人TFPI-2基因真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2导入人前列腺癌细胞株PC3M中,并分别通过RT-PCR和Western blot技术检测TFPI-2在人前列腺癌细胞中的表达,然后采用Annexin V/PI法,通过流式细胞仪分别对稳定转染的PC3M-TFPI-2组细胞和未转染的PC3M组细胞进行双参数分析,检测两组细胞的凋亡情况。结果:转染成功的PC3M-TFPI-2组细胞中证实有TFPI-2 mRNA和相应蛋白质的表达,转染TFPI-2的PC3M-TFPI-2组细胞有部分发生凋亡,凋亡率为25.17%,而未转染TFPI-2的PC3M组细胞仅有极小部分发生了凋亡,其凋亡率为4.13%。结论:人TFPI-2基因真核表达载体成功转染人PC3M并可以在PC3M中得到表达,TFPI-2表达可以促进人前列腺癌细胞发生凋亡,这可为将来前列腺癌的基因治疗提供一个新的靶向。

组织因子途径抑制物-2和γ-神经突触核蛋白在食管癌中的表达及其与肿瘤细胞浸润、转移和凋亡之间的关系

目的:探讨组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)和γ-神经突触核蛋白(synuclein gamma,SNCG)在食管癌组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移和细胞凋亡之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测82例食管癌组织及20例相应癌旁不典型增生组织和54例相应癌旁正常食管组织中TFPI-2、SNCG和基质金属蛋白酶-9(matrix metallo-proteinase-9,MMP-9)的表达,应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡并计算细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:TFPI-2和SNCG在食管癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管组织中的阳性表达率分别为30.4%、60.0%、87.0%和63.4%、30.0%、3.7%,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。TFPI-2和SNCG的表达与肿瘤淋巴结转移、浸润深度、TNM分期和分化程度密切相关(P<0.01),但与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位和肿瘤大体分型无关(P>0.05)。食管癌组织中TFPI-2与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.636,P=0.000),而SNCG与MMP-9的表达呈正相关(r=0.393,P=0.000)。TFPI-2和SNCG的表达与AI有关(P<0.05)。结论:TFPI-2可能通过抑制MMP-9的表达诱导细胞凋亡,抑制食管癌细胞的生长和转移,而SNCG可能在此过程中起着相反的作用,TFPI-2和SNCG有望成为有效的肿瘤标志物和肿瘤基因治疗的新靶点。

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子表达失衡与卵巢上皮性肿瘤血管生成的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)在卵巢上皮性肿瘤血管生成中的作用及临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、20例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、50例卵巢上皮性癌组织中MMP-2及TIMP-2的表达及微血管密度(MVD)。结果MMP-2阳性表达组的MVD值明显高于阴性表达组的MVD值(P=0.000),卵巢肿瘤组织中MMP-2的表达水平与TIMP-2的表达呈负相关。结论MMP-2和TIMP-2表达失衡可能在卵巢上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,检测MMP-2和TIMP-2的表达可作为反映卵巢癌侵袭和转移潜能的生物学指标。

组织因子途径抑制物-2的结构及其生物学作用研究进展

蛋白水解失调是机体许多病理过程的主要特征，例如癌症、动脉粥样硬化和炎症等。蛋白酶抑制剂在血液凝集、补体固定、纤维蛋白溶解、受精和胚胎形成等多种生物学过程中均发挥重要的调控作用。大部分的蛋白酶抑制剂都具有多肽支架的特征，包括Kunitz家族、Kazal家族、Serpin家族和Mucus家族等，其中Kunitz家族即丝氨酸蛋白酶抑制剂家族由20多个成员组成，主要包括牛胰蛋白酶抑制剂（bovine pancreatic trypsin inhibitor，BPTI）、组织因子途径抑制物（tissue factor pathway inhibitor，TFPI-1）及其同系物TFPI-2等，